木犀草素改善脊髓损伤大鼠血清诱导的心肌细胞死亡

背景:脊髓损伤导致的心功能不全是脊髓损伤患者死亡的重要原因,但具体机制并不清楚。因此,揭示脊髓损伤患者出现心功能不全的机制对于提高患者的生存质量和生存率有重要意义。目的:探讨木犀草素改善脊髓损伤大鼠血清诱导心肌细胞死亡的作用机制。方法:使用Allen’s冲击仪损伤雄性SD大鼠脊椎T9-T11,进行脊髓损伤造模,设置假手术组作为对照,取各组大鼠血清。将H9c2细胞分为空白对照组、假手术大鼠血清组、脊髓损伤大鼠血清组以及木犀草素预处理组,空白对照组为普通培养基培养,假手术大鼠血清组使用含体积分数10%假手术大鼠血清的培养基培养,脊髓损伤大鼠血清组使用含体积分数10%脊髓损伤大鼠血清的培养基培养,木犀草素预处理组预先使用含有终浓度为20μmol/L木犀草素的培养基培养心肌细胞4 h,之后更换含体积分数10%脊髓损伤大鼠血清的培养基培养,培养24 h后使用CCK-8法检测各组H9c2心肌细胞的存活率,采用Western blot检测各组H9c2心肌细胞自噬相关蛋白LC3及p62的蛋白表达。结果与结论:与空白对照组相比,假手术大鼠血清组细胞存活率无明显改变(P>0.05);与假手术大鼠血清组相比,脊髓损伤大鼠血清组细胞存活率显著降低(P<0.01),LC3蛋白表达显著降低(P<0.05),p62蛋白表达显著升高(P<0.05);与脊髓损伤大鼠血清组相比,木犀草素预处理组细胞存活率明显回升(P<0.0001),LC3蛋白表达显著升高(P<0.05),p62蛋白表达显著降低(P<0.05)。结果表明:木犀草素可能通过促进自噬进而改善脊髓损伤大鼠血清诱导的心肌细胞死亡。

槲皮素抑制p53表达改善过氧化氢诱导的神经细胞死亡

目的 研究槲皮素对过氧化氢(H_(2)O_(2))引起的神经细胞损伤的潜在保护作用及机制。方法 为模拟脊髓损伤后神经细胞出现的缺氧损伤,使用不同浓度的H_(2)O_(2)(0,100,200,300,400,500,600,700μmol/L)对SH-SY5Y细胞进行干预8 h,采用CCK-8试剂检测细胞存活率,并结合显微镜下观察,摸索H_(2)O_(2)造模的最佳浓度。使用不同浓度(10,25,50,100,200μmol/L)的槲皮素(quercetin,QUE)对SH-SY5Y细胞进行预处理4 h,再予以H_(2)O_(2)造模处理,通过CCK-8法检测细胞存活率。使用生物信息技术预测槲皮素改善脊髓损伤后神经细胞缺氧损伤的可能作用靶点,首先在TCMSP数据库中筛选槲皮素的作用靶点,同时在5个疾病相关数据库检索与脊髓损伤相关靶点基因,筛选获得槲皮素和脊髓损伤的共同靶点,对靶点蛋白进行PPI蛋白互作分析,并利用Cytoscape中的cytoNCA进行关键靶点的筛选。为进一步验证预测的靶点是否参与槲皮素对神经细胞缺氧损伤的改善作用,将SH-SY5Y细胞分为control组、H_(2)O_(2)组(400μmol/L H_(2)O_(2)作用8 h)以及QUE组(100μmol/L QUE预处理4 h后再予以H_(2)O_(2)干预),使用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同分组p53蛋白的表达水平。为验证p53蛋白在槲皮素干预H_(2)O_(2)诱导的神经细胞损伤中的作用,使用慢病毒感染SH-SY5Y细胞以构建p53蛋白敲低的细胞稳转株以及病毒空白载体对照(shRNA-NC),将携带慢病毒的SH-SY5Y细胞分为shRNA-NC组、shRNA+H_(2)O_(2)组和shTP53+H_(2)O_(2)组,shRNA+H_(2)O_(2)组在感染病毒空载的基础上予以H_(2)O_(2)干预,shTP53+H_(2)O_(2)组在成功感染p53敲低慢病毒的基础上再给予H_(2)O_(2)处理8 h,利用CCK-8检测不同分组细胞的存活率变化。结果 300,400,500,600,700μmol/L H_(2)O_(2)对SH-SY5Y细胞造成不同程度的损伤,细胞存活率随着H_(2)O_(2)浓度的升高而降低(P<0.05),浓度为400μmol/L的H_(2)O_(2)持续作用8 h能够造成SH-SY5Y细胞近半数死亡(P<0.001),此时镜下观察显示:部分细胞形态严重损伤并有少量细胞碎片。使用50,100,200μmol/L槲皮素对细胞进行预处理可减少H_(2)O_(2)诱导的神经细胞死亡,提高细胞存活率(P<0.05)。通过生物信息技术分析获取槲皮素治疗脊髓损伤的作用靶点有91个,使用Cytoscape软件中的cytoNCA筛选槲皮素作用的关键靶点为p53。Western blot检测结果显示:与control组相比,H_(2)O_(2)组p53蛋白表达显著升高(P<0.05),而与H_(2)O_(2)组相比,QUE组p53蛋白表达则明显下降(P<0.001)。CCK-8结果显示,与shRNA-NC组相比,shRNA+H_(2)O_(2)组细胞存活率明显降低(P<0.001);而与shRNA+H_(2)O_(2)组相比,shTP53+H_(2)O_(2)组的细胞存活率则明显升高(P<0.001)。结论 槲皮素通过抑制p53蛋白的表达减少H_(2)O_(2)诱导的神经细胞死亡。

显微外科再植治疗手指旋转撕脱离断伤断指患者的临床效果分析

断指是指手指连续性遭到破坏产生断离,在临床中多由暴力产生[1]。而手指旋转撕脱离断伤断作为断指的一种特殊类型,主要会导致手段周围的皮肤、肌腱、血管和神经遭到不同程度的破坏[2]。有研究表明[3],手指旋转撕脱离断伤断曾经作为断指再植的禁忌证,这主要是因为断指修复后患者断指血运差、神经恢复慢,并且术后易发生血管危象,因此过去手术治疗较少。但随着显微外科技术的不断发展,手指旋转撕脱离断伤断已不再是断指再植的禁忌证,治疗成功率也得到了一个质的提升[4]。有研究表明[5],手指旋转撕脱离断伤断患者应用显微外科再植技术效果显著。但既往学者研究病例较少[6],本次研究通过对54例手指旋转撕脱离断伤断指患者进行临床研究,进一步探讨显微外科再植的治疗效果,现报告如下。

传统入路与Quadrant微创通道下治疗腰椎骨折的临床比较研究

脊柱骨折在骨外科较为常见,其中胸腰椎骨折占总数的40%左右[1],现阶段,临床仍然没有统一胸腰椎骨折的类型、手术适应证、手术类型等诊疗方式。相关医学研究表明[2],在胸腰椎骨折的治疗中,可以采用椎弓根螺钉系统。目前,在腰椎骨折的治疗中,后正中入路椎弓根钉内固定术已经成为临床通常采用的治疗方法[3]。近年来,在腰椎手术减压治疗中,Quadrant微创通道下减压椎弓根钉内固定术在临床应用,获得了理想的临床效果,因此在临床得到了日益广泛的应用[4]。本研究进一步比较传统入路与Quadrant微创通道下治疗腰椎骨折的临床效果。

髓内钉治疗肱骨干骨折不愈合的影响因素分析

肱骨干骨折是临床中常见的一种长管状骨骨折,其发生率约占骨科创伤中全部骨折的1%~3%。随着老龄化社会的到来,该类型骨折更加多见于高龄和骨质疏松患者,发病率逐年上升[1]。其定义为:发生于肱骨外科颈平面以下1.0~2.0 cm至肱骨内、外髁水平以上2.0 cm区间内的骨折[2]。伴随着社会经济的发展、骨科器械和内固定技术的不断提高,患者对术后功能的较高期许和对早日回归正常工作生活的急迫追求;手术治疗肱骨干骨折的逐渐成为主流。

慢性压迫性颈脊髓病患者行C3-C7单开门椎板成形术后发生轴性症状影响因素分析

目的探讨C3-C7单开门椎板成形术治疗慢性压迫性颈脊髓病术后出现轴性症状(AS)的影响因素。方法选取2017年6月至2018年10月我院收治的因慢性压迫性颈脊髓病行颈椎后路C3-C7单开门椎板成形术的患者128例,根据术后轴性症状的发生情况,将患者分为AS组和非AS组。记录并比较2组患者的性别、年龄、病程、术前日本骨科协会(JOA)脊髓功能评分、JOA改善率、术前颈痛情况、术后早期功能锻炼情况等一般资料,手术时间、术中出血量、佩戴颈托时间等手术情况,以及颈椎生理曲度、术前脊髓受压率、开门角度、术后脊髓漂移程度和颈椎总活动度等影像学参数。采用单因素和多因素Logistic回归分析,分析AS发生的影响因素,采用R3.3.2和软件包RMS将筛选出的独立危险因素构建列线图预测模型,计算C-index指数并用于评价模型的区分度,内部验证和外部验证测试其符合度。结果随访至术后12个月,128例患者中61例发生AS(AS组),67例未发生AS(非AS组)。单因素分析结果显示,2组患者的年龄、术前脊髓受压率、术前颈椎总活动度、颈椎曲度丢失度以及术后早期功能锻炼差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄增加、颈椎曲度丢失度大及术前脊髓受压率高是AS发生的独立危险因素;术前颈椎总活动度大和术后早期功能锻炼是AS发生的保护因素。由列线图预测模型可知,年龄>55岁为22.5分,术前脊髓受压率>28.35%为52.5分,术前颈椎总活动度≤29.57°为33分,颈椎曲度丢失度>9.5°为31分,未接受术后早期功能锻炼为37.5分,以上积分相加所得总分(176.5分)对应的值即为模型预测的AS发生率(78.3%)。本模型一致性指数(C-in-dex)为0.871,内部验证C-index指数为0.865,下降0.006;外部验证C-index指数为0.852。结论年龄增加、颈椎曲度丢失度大及术前脊髓受压率高是AS发生的独立危险因素;术前颈椎总活动度大和术后早期功能锻炼是AS发生的保护因素。列线图预测模型准确度较高,能够有效预测影响AS发生的相关因素。

带血管蒂大粗隆骨瓣治疗Ⅲa期股骨头坏死

非创伤性股骨头的坏死,是由不同的原因造成股骨头血液的供应系统破坏及骨细胞变性坏死,从而引起骨结构破坏的一种病理过程。对于一些股骨头已经开始出现轻微的塌陷,即股骨头塌陷深度范围在2 mm之内的中青年男性患者,保留和修复股骨头塌陷是大家一致努力的方向和目标。保留和修复股骨头的手术治疗和方法很多,诸如股骨头颈部开窗手术的打压植骨、直径3.5 mm的克氏针髓芯减压、髋关节外科脱位后的股骨近端的旋转截骨、病灶清除后带血运的骨膜和软组织瓣移植、吻合血管的腓骨移植、带血管蒂髂骨瓣移植等手术的治疗,均已经在临床上取得了一定的进展和疗效,但存在手术难度大、临床医师的学习曲线长,要具备吻合微小血管的手术技术,术中创伤大、影响2期人工全髋关节置换等。

安全吞咽管理在颈椎前路术后吞咽困难患者中的应用

颈椎前路椎间盘切除减压、植骨融合术(ACDF)被认为是治疗颈椎退行性疾病的金标准术式之一,手术术野较小,且毗邻有重要血管和神经。吞咽困难是颈椎前路术后最常见的并发症,文献报道其术后2周发生率为71%,术后1周发生率为83%^([1,2])。其临床表现为体质量减轻、声音嘶哑、窒息感、吸入性肺炎、持续咳嗽,可引起营养不良、肺炎、穿孔、甚至死亡等严重并发症。

传统切开与微创钢板接骨术锁定加压钢板治疗锁骨中段骨折的疗效比较

目的比较传统切开与微创钢板接骨术(MIPO)锁定加压钢板治疗锁骨中段骨折的临床疗效。方法回顾性队列研究。回顾性分析2016年1月至2020年12月福建医科大学附属南平第一医院收治的42例采用锁定加压钢板治疗的锁骨中段骨折患者的临床资料,其中男27例,女15例,年龄(36.5±8.7)岁(19~61岁)。根据手术方法的不同分为两组:传统切开组20例,MIPO组22例。两组术中注意保护锁骨上神经。记录比较两组手术时间、术中出血量、切口长度、骨折愈合时间,与健侧锁骨的比例长度差异,末次随访采用肩关节功能Constant评分和上肢功能评定表(DASH)评价肩关节功能。评估术后6周、12周和1年切口周边麻木发生率,观察比较两组并发症的发生情况。结果所有42例患者术后获13~35个月(平均16.5个月)随访。传统切开组手术时间(68.4±12.7)min、术中出血量(72.5±16.9)ml和切口长度(8.7±2.3)cm均大于MIPO组的(55.3±10.2)min、(52.8±13.5)ml、(4.5±1.2)cm,两者比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组骨折愈合时间,与健侧锁骨比例长度差异以及末次随访肩关节功能Constant评分、DASH评分比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。传统切开组术后6周、12周切口周边麻木发生率分别为60.0%(12/20)和45.0%(9/20),大于MIPO组的27.3%(6/22)和13.6%(3/22),两组差异均有统计学意义(均P<0.05),但术后1年切口周边麻木发生率差异无统计学意义[15.0%(3/20)比4.5%(1/22),P=0.531]。两组术后各种并发症发生率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论传统切开与MIPO技术锁定加压钢板治疗锁骨中段骨折都能取得良好疗效,MIPO技术能减少手术时间和术中出血量,降低术后早期切口周边麻木的发生率。

后正中入路和经通道椎旁入路椎间融合术治疗老年Ⅰ~Ⅱ度腰椎滑脱症患者的围术期分析

目的比较后正中入路腰椎椎体间融合术(PLIF)、开放经椎间孔腰椎椎体间融合术(TLIF)和经通道椎旁入路椎间融合术(MIS-TLIF)治疗老年I~Ⅱ°腰椎滑脱症患者围术期差异。方法回顾性分析我院2014年1月至2017年12月因腰椎滑脱症行后路手术的老年患者(年龄≥60岁)68例的临床资料,按手术方式将行PLIF和TLIF手术的患者40例纳入开放组,男12例,女28例;行MIS-TLIF的28例患者为微创组,男6例,女22例。比较两组患者围术期手术时间、出血量、投照次数、术后引流量、尿管留置时间、术后住院天数及并发症差异。结果开放组和微创组患者手术时间为(156±51)min比(153±38)min,(P=0.77);术中出血量(458±272)ml比(157±104)ml(P<0.001);透视次数(6.7±1.5)次比(30.6±6.9)次(P<0.01);术中并发症开放组25.0%(10例),微创组7.1%(2例),差异无统计学意义(P=0.057)。术后引流量开放组患者(664±351)ml多于微创组患者(210±127)ml(P<0.001);尿管留置时间开放组患者(3.7±2.9)d长于微创组患者(2.2±0.8)d(P=0.002),术后住院时间开放组患者(9.2±3.6)d多于微创组患者(6.9±1.7)d(P=0.001)。术后神经并发症分别为7.5%(3例)和14.3%(4例),差异无统计学意义(P=0.365),术后非神经并发症发生率开放组27.5%(11例)高于微创组7.1%(2例),差异有统计学意义(P=0.036)。结论与PLIF和TLIF术比较,MIS-TLIF治疗老年I~Ⅱ°腰椎滑脱症具有出血少、引流量少、尿管留置时间短、住院时间短、非神经并发症较低等优点,但其投照次数较多。

纤维蛋白-1c促进老年膝骨关节炎软骨细胞增殖代谢的机制

目的观察纤维蛋白-1c(Fibulin-1c)对老年膝骨关节炎(OA)软骨细胞增殖代谢的影响。方法2018年8月至2019年8月,收集山西白求恩医院因外伤截肢年轻人和人工膝关节置换术时老年膝OA患者10例的血清、膝关节软骨标本,检测标本中Fibulin-1c的含量变化。实验分4组,实验组1为培养液含rFibulin-1c(10μg/L);实验组2为培养液含rFibulin-1c(100μg/L);实验组3为培养液含rFibulin-1c(200μg/L);对照组为单纯培养液。常规培养人软骨细胞,实验组培养液中加入不同浓度(10、100、200μg/L)重组人Fibulin-1c蛋白,培养48 h后,5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)检测软骨细胞增殖,蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测软骨细胞Col2、基质金属蛋白酶(MMP)-13、Smad3和pSmad3的表达。组间比较采用t检验和单因素方差分析。结果年轻人血清Fibulin-1c蛋白相对表达量为(1.009±0.109),老年人为(0.695±0.071),两者比较差异有统计学意义(t=2.406,P<0.05);年轻人软骨中蛋白相对表达量(1.021±0.097)高于老年人(0.733±0.079,t=2.297,P<0.05),差异有统计学意义。实验组EdU阳性细胞百分比[(25.330±1.453)%、(34.170±2.822)%]高于对照组[(13.170±1.447)%,F=24.300,P<0.01],差异有统计学意义;与对照组(0.786±0.042)比较,实验组软骨细胞Col2含量增高(1.470±0.105、1.880±0.120,F=30.110,P<0.01),差异有统计学意义;Col2的基因表达水平与蛋白表达水平一致。结论Fibulin-1c可以促进老年膝关节软骨细胞增殖代谢能力。

盖氏骨折合并腕豌豆骨脱位及第五掌骨基底部骨折一例

患者男,24岁。因摔伤致右腕关节及右前臂疼痛肿胀伴活动受限2 d就诊。患者系驾驶摩托车时向前方摔倒,右前臂及右手背侧着地。临床检查:右腕及前臂肿胀、疼痛、畸形及功能障碍,可及明显反常活动及骨擦感,右手末梢色泽、皮温及感觉与健侧无明显差别,右手第五掌骨基底部及右腕关节尺侧疼痛、压痛明显,可触及一骨性突起,并可推动;伴有右手握力的减退。