穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型PLA2R和IgG4表达的影响及其机制

目的 分析穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠肾组织M型磷脂酶A2受体(Phospholipase A2 receptor, PLA2R)和免疫球蛋白G亚型4(Immunoglobulin G4,IgG4)表达影响及可能机制。方法 将40只SPF级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、贝那普利组(10 mg/kg)、低和高剂量穿山龙总皂苷组(80 mg/kg、160 mg/kg),每组各8只。除对照组,其余4组采用Border法制备膜性肾病模型,造模成功后,贝那普利组灌胃给予贝那普利10 mg/(kg·d),低和高剂量穿山龙总皂苷组分别灌胃给予穿山龙总皂苷80 mg/(kg·d)、160 mg/(kg·d),对照组、模型组灌胃给予10 ml/(kg·d)生理盐水。连续给药4周后,检测24 h尿蛋白、白蛋白、血肌酐、血尿素氮、尿酸水平,HE染色观察肾脏病理改变,蛋白免疫印迹法检测肾脏中M型PLA2R、IgG4、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(Phosphorylated phosphoinositide 3-kinase, p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(Phosphorylated protein kinase B,p-AKT)、核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、血红素加氧酶(Heme oxygenase-1,HO-1)表达水平。结果 与模型组比较,贝那普利组、高剂量穿山龙总皂苷组白蛋白水平明显升高,血肌酐、血尿素氮、尿酸水平明显降低,差异均有统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,贝那普利组、低剂量和高剂量穿山龙总皂苷组肾脏病理改变明显改善,24 h尿蛋白水平及肾脏中M型PLA2R、IgG4、p-PI3K、p-AKT表达水平明显降低,肾脏中Nrf2、HO-1表达水平明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 穿山龙总皂苷对膜性肾病大鼠的肾脏具有保护作用,其机制可能与降低PLA2R、IgG4表达,抑制PI3K/AKT通路,激活Nrf2/HO-1通路相关。

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨水蛭素拮抗腹膜间皮细胞表型转化的分子机制

探究水蛭素通过Wnt蛋白/β-连锁蛋白(Wnt/β-catenin)信号通路对腹膜间皮细胞(PMCs)表型转化的分子机制。方法:体外培养人腹膜间皮细胞系HMrSV5,分为对照组、水蛭素低、中、高剂量组。对照组细胞不做特殊处理,低、中、高剂量组分别加入1122.5单位,2245单位及4490单位的水蛭素。采用MTT法、Transwell实验分别检测细胞活力、侵袭能力,q-PCR、western blot法检测Wnt/β-catenin信号通路相关mRNA、蛋白表达情况。结果:与对照组比较,水蛭素低、中、高剂量组细胞增殖抑制率升高,细胞侵袭细胞数减少,Wnt1、Wnt5、P-GSK-3及β-catenin mRNA、蛋白相对表达下调,DKKI mRNA、蛋白相对表达上调(P<0.05);与水蛭素低剂量组比较,中、高剂量组细胞增殖抑制率升高,细胞侵袭细胞数减少,Wnt1、Wnt5、P-GSK-3及β-catenin mRNA、蛋白相对表达下调,DKKI mRNA、蛋白相对表达上调(P<0.05);与水蛭素中剂量组比较,高剂量组细胞增殖抑制率升高,细胞侵袭细胞数减少,Wnt1、Wnt5、P-GSK-3及β-catenin mRNA、蛋白相对表达下调,DKKI mRNA、蛋白相对表达上调(P<0.05)。结论:水蛭素可能通过抑制 Wnt/β-catenin通路中相关蛋白活性,起到抗腹膜纤维化的作用。