淫羊藿通过miR-148a调控乳腺癌干性表达

目的观察淫羊藿对乳腺癌细胞增殖及干性表达的影响,探讨其抑制干性与miR-148a的关系及分子机制。方法淫羊藿处理乳腺癌MDA-MB-231细胞后,采用MTT法和平板克隆实验评估其对细胞增殖和群体依赖的影响;悬浮成球实验检测其对衍生乳腺球大小的影响;qPCR检测其对CD44、ALDH-1、Oct4、BMI1和EpCAM表达水平的影响;Western blot检测EpCAM、SOX4、ZO-1、E-cadherin、Vimentin的蛋白表达量;免疫荧光观察EpCAM的蛋白定位情况;划痕实验检测其对细胞迁移能力的影响。将miR-148a mimic转染至MDA-MB-231细胞中,观察淫羊藿对转染后细胞干性表达的影响。结果淫羊藿可明显抑制MDA-MB-231细胞的增殖和群体依赖性(P<0.01),减少乳腺球的形成;与Control组相比,其可明显降低CD44、ALDH-1、Oct4、BMI1和EpCAM的mRNA水平(P<0.05),降低EpCAM、SOX4和Vimentin的蛋白含量(P<0.01),上调ZO-1、E-cadherin的蛋白表达(P<0.01),抑制细胞的迁移能力(P<0.05)。淫羊藿能够上调MDA-MB-231细胞miR-148a的表达(P<0.01)。与Control组相比,淫羊藿+miR-148a mimic组能够明显抑制MDA-MB-231细胞的干性表达和EMT过程(P<0.05)。结论淫羊藿能够抑制MDA-MB-231细胞的增殖,其机制可能与其上调miR-148a水平,降低乳腺癌细胞干性表达,抑制EMT过程有关。

正交试验优选益气通脉胶囊提取工艺

益气通脉胶囊为山西省中西医结合医院制剂,处方由黄芪、肉桂、泽泻等组成,具有补气升阳、温通经脉、活血化瘀、利水渗湿等功效,多年临床使用表明其治疗高脂血症疗效显著。本实验采用单因素试验优选挥发油的提取工艺,以出膏率和黄芪甲苷转移率作为综合评价指标,采用正交试验优选益气通脉胶囊的水提取条件,为益气通脉胶囊的制备工艺优化及该制剂的进一步研究提供实验依据。

加味黄芪建中汤治疗脾胃虚寒证消化性溃疡的效果评价

目的:探讨加味黄芪建中汤治疗脾胃虚寒证消化性溃疡的临床效果.方法:按照随机数字表法将109例脾胃虚寒证消化性溃疡患者分为实验组(中医治疗)55例和对照组(三联疗法治疗)54例,比较两组患者疗程结束后症状疗效、胃镜疗效、治疗前后主要症状积分情况.结果:两组患者症状疗效总有效率比较(89.09%v s 77.78%),差异无统计学意义(P>0.0 5);两组患者胃镜疗效总有效率比较(92.73%vs 87.04%),差异无统计学意义(P>0.05);但实验组患者有效率显著高于对照组(27.27%vs 7.41%),差异具有统计学意义(P<0.05);实验组患者治疗后痞满积分、畏寒肢冷积分以及症状总积分均显著低于对照组(1.39分±0.65分vs 2.06分±0.68分、1.43分±0.67分vs 2.35分±0.83分、9.15分±1.40分vs 12.31分±1.98分),差异具有统计学意义(P<0.05);实验组患者随访12 mo复发率显著低于对照组(7.27%vs 22.22%),差异具有统计学意义(P<0.05).结论:加味黄芪建中汤治疗脾胃虚寒证消化性溃疡的临床疗效不低于常规三联疗法,在改善患者中医症状和降低复发率上效果优于常规西药,临床应用价值较高.

温阳解郁颗粒调节BDNF/TrkB/ERK信号通路保护皮质酮诱导损伤型海马神经细胞的作用机制研究

目的观察温阳解郁颗粒(Wenyang Jieyu granule,WYJY)对皮质酮(Corticosterone,CORT)诱导损伤型小鼠海马神经细胞(TH22 cell)的保护作用,基于脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)/酪氨酸激酶B(Tyrosine kinase B,TrkB)/细胞外信号调节蛋白激酶(Extra cellular regulated protein kinases,ERK)信号通路探讨WYJY保护海马神经细胞的作用机制。方法体外构建小鼠海马神经细胞皮质酮诱导损伤模型,以不同浓度的WYJY和氟西汀(Fluoxetine,FXT)含药血清作用于模型细胞,细胞增殖-毒性检测(Cell Counting Kit-8,CCK-8)法分析细胞活性,倒置显微镜下观察给药前后细胞形态结构的改变,采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)、实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)法检测神经细胞内凋亡因子(BCL2-Associated X,Bax)、抗凋亡因子(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、BDNF、Trkb、ERK以及丝氨酸/苏氨酸激酶(Phospho-p90RSK,RSK)、环磷腺苷效应元件结合蛋白(cAMP-response element binding protein,CREB)蛋白表达水平以及相关基因的表达水平。结果在浓度为459.5μmol·L^(-1)的CORT作用24 h后,HT22细胞的活性抑制率达到50%,在此条件作用下细胞形态结构损伤明显,凋亡程度严重,细胞上清中BDNF的含量显著减少(P<0.05),细胞内凋亡相关因子Bcl-2/Bax的比值明显降低(P<0.01),BDNF、Trkb、ERK、RSK、CREB磷酸化蛋白表达水平和mRNA表达水平明显降低(P<0.01);以5%的浓度为2.85 g·kg-1的WYJY和10%的FXT含药血清作用于受损的HT22细胞后,HT22细胞存活率明显提升(P<0.01),细胞结构的损伤明显改善,细胞凋亡程度减轻,细胞外BDNF的含量显著升高(P<0.05),细胞内Bcl-2/Bax比值显著上调(P<0.01),BDNF、Trkb、ERK、RSK、CREB磷酸化蛋白表达水平和mRNA表达水平显著提升(P<0.05,P<0.01)。结论温阳解郁颗粒可有效保护高浓度CORT造成的小鼠海马神经细胞损伤。调控BDNF/Trkb/ERK通路,放大CREB信号传导,影响Bcl-2、BDNF水平,可能是其保护海马神经元,发挥抗抑郁疗效的重要机制。

赵杰主任医师治疗糖尿病经验举隅

随着现代人生活质量与消费水平的提高,糖尿病的发病率也逐渐上升。糖尿病严重降低了患者的生活质量,给患者增加了巨大的心理压力,给家庭和社会带来巨大的经济负担。西医治疗上,目前尚无特殊治疗手段,不仅药物种类繁多,费用较高,而且副作用大。在临床跟随赵杰主任医师学习中,赵杰老师多次强调糖尿病的本质为"阳虚",故治疗应以扶阳为主,且应用六经辨证及经方治疗本病取得了良好的疗效。

风邪与疫病关系探讨

外邪是引起外感病的主要原因,中医将外邪分为风、寒、暑、湿、燥、火,共称为六淫。风邪是六淫之首,所以风邪更容易导致外感病的发生。除了六淫之外,天地之间还存在着一种特殊的、非正常的邪气,被称作疠气,或疫毒、异气等,而疫病主要是指感受疫疠之邪而引起的并且具有传染性,能够造成流行的一类疾病,亦属于外感病的范畴。疫病可通过呼吸道飞沫、消化道或直接接触传播,疠气、邪毒等是疫病的主要致病因素。风邪致病与许多疾病的发生、发展有着直接或间接的关系,那么风邪是否与疫病也有着一定的相关性呢?本文结合风邪与疫病的致病特点,探讨风邪与疫病二者在病因病机上的相关性。

温阳败毒饮对脓毒症大鼠血清降钙素原及C反应蛋白水平影响的研究

目的研究温阳败毒饮对脓毒症大鼠血清降钙素原、C反应蛋白水平的影响。方法选用120只健康雄性SD大鼠,采取腹腔内注射大肠杆菌内毒素的方法,制备细菌毒血症大鼠模型。将其随机分为正常组、模型组、常规西药组、中药干预组、联合用药组,正常组、模型组给予生理盐水灌胃,常规西药组给予地塞米松灌胃,中药干预组给予温阳败毒饮经口灌胃,联合用药组给予温阳败毒饮联合地塞米松经口灌胃。比较观察不同时间点(24h、48h、72h)不同组别大鼠炎症反应因子变化(CRP、PCT)。结果联合用药组血清PCT、CRP的水平低于其他四组,常规西药组和中药干预组血清PCT、CRP的水平低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温阳败毒饮可有效降低大肠杆菌内毒素诱导的脓毒症大鼠血清PCT、CRP水平。

温肾助阳法对慢性应激性抑郁症大鼠学习记忆功能及海马神经增殖分化功能的影响

目的通过观察温阳解郁(Wenyang Jieyu,WYJY)颗粒对慢性不可预见性温和应激(Chronic unpredictable mild stress,CUMS)模型大鼠学习记忆功能和海马神经增殖分化功能的影响,探究温阳助肾法治疗抑郁症的作用机制。方法将60只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、温阳解郁颗粒低(1.89g/kg)、中(3.78g/kg)、高(7.56g/kg)剂量组和氟西汀(3.33mg/kg)组,除正常组外,其余各组构建CUMS大鼠模型。采用Morris水迷宫实验评价各组大鼠给药后的学习记忆能力,苏木精--伊红(hematoxylin-eosin HE)染色法观察海马CA1区和齿状回(DG)区神经元的形态变化,5-溴脱氧尿嘧啶核苷/神经核抗原(BrdU/NeuN)免疫荧光双重染色法检测海马神经元的增殖、分化能力。结果Morris水迷宫实验结果显示,与正常组相比,CUMS模型组大鼠的逃避潜伏期显著延长(P<0.01),穿越平台次数显著减少(P<0.01),目标象限的游程占比和游泳时间占比显著降低(P<0.01);温阳解郁颗粒各剂量组所需的逃避潜伏期与正常组无显著差异(P>0.05);温阳解郁颗粒高剂量组穿越平台次数较模型组显著增加(P<0.05),目标象限的游程占比和游泳时间占比较模型组显著提高(P<0.01,P<0.05);HE染色结果显示,温阳解郁颗粒可显著改善CUMS抑郁大鼠海马组织的病理损伤;免疫荧光结果显示,中剂量的温阳解郁颗粒可以增加CUMS抑郁大鼠新生和成熟的海马神经元数量(P<0.01),促进受损的海马神经元再生与分化。结论具备温肾助阳功效的方药可显著改善抑郁症大鼠的学习记忆功能,增强成年大鼠海马神经的增殖与分化能力,这可能是温肾助阳法抗抑郁的重要作用机制。