一种pH稳定的黄色漆酶的快速纯化和性质特征

通过丙酮沉淀和DEAE-cellulose DE52柱层析,快速、有效地从一株白腐菌Trametes sp. SQ01的发酵液中纯化了漆酶。纯化的漆酶并非传统漆酶那样呈现蓝色,而是一种黄色蛋白。以ABTS为底物时,该酶的最适pH和温度分别是pH4.5和70°C,Km为0.029mmol/L。T.SQ01漆酶在pH3.0～11.0时,酶活相对稳定,在pH5.0时最为稳定,是目前报道的pH稳定性最好的漆酶。低浓度的金属离子(1mmol/L)Cu2+、Mg2+、Ca2+和Co2+对漆酶有促进作用,而高浓度(5mmol/L)的Co2+、Zn2+、Mn2+、Mg2+却抑制漆酶酶活。SDS对该酶有激活作用,当其浓度为1mmol/L时,漆酶相对酶活达到128%。DTT对漆酶强烈抑制,即使是浓度为1mmol/L,亦可完全抑制漆酶酶活。纯化后的漆酶对亮蓝(RBBR)(100mg/L)的脱色能力显著,0.5U/mL的漆酶在10min内即可达到80%的脱色率。T.sp.SQ01漆酶的快速纯化以及高效脱色的能力表明该酶在染料脱色降解方面有着广阔的应用前景。