笨鸡养殖是山区农民增收的一条有效途径——山西省榆社县笨鸡产业发展的调查

随着人们生活水平的日益提高，对绿色、健康食品的需求越来越多。山西省榆社县笨鸡产业的发展正是迎合了市场的需求，取得了较快发展，为市场提供了安全、健康的笨鸡蛋，山区农民获得了好收益。

树体自动滴输微肥对果树生理和果实品质的影响

研究了树体自动滴输技术在苹果树、核桃树及柿树上的应用.结果表明:通过输施微肥可以促进树体营养生长和发育,提高核桃树花粉生活力及坐果率.苹果树经输施后,果实着色显著增加,微量元素含量显著提高,铁(Fe)、锌(Zn)元素可分别比对照提高13.28％-22.90％、42.54％-43.22％,处理果实中硒(Se)及锗(Ge)的增幅较大,分别是对照的9.545倍及4.717 3倍.该技术是提高我国果树生产力和改善苹果营养价值的有效方法.

小RNA深度测序技术分析西瓜花叶病毒蜀葵分离物

蜀葵病毒病害的发生对其生长造成严重影响,明确蜀葵病毒病害的种类及变异进化对蜀葵病毒病害的防治具有重要意义。利用小RNA深度测序技术对具有明显脉明、花叶症状的蜀葵叶片进行鉴定。结果发现,感病蜀葵被西瓜花叶病毒(Watermelon mosaic virus, WMV)、锦葵脉明病毒(Mala vein cleaning virus, MVCV)和一种新的RNA病毒[暂命名为蜀葵病毒1号(Althaea rosea virus1, ArV1)]所侵染。为进一步明确WMV蜀葵分离物(WMV-Tg)的进化关系,对病毒WMV-Tg全基因组进行扩增,获得全长为10 046个核苷酸序列(nt)。序列分析结果显示,WMV-Tg与已报道的WMV分离物基因组核苷酸序列的同源性为83.3%～90.2%。系统进化关系表明,WMV-Tg与WMV-Pg聚为一簇,亲缘关系最近。对蜀葵WMV-Tg来源的小RNA(WMV-derived small interfering RNAs, WMV-vsiRNAs)的长度分布、5′碱基偏好性、极性分布以及热点区分布的分析,有助于加深对WMV-vsiRNAs的了解,并为进一步研究病毒来源的小RNA(virus-derived small interfering RNAs, vsiRNAs)在抗病毒防御中的功能,以及为蜀葵病毒病的防治奠定理论基础。

利用小RNA深度测序技术鉴定半夏病毒病病原

RNA沉默是真核生物体内由病毒来源的干扰小RNA(virus-derived small interfering RNA,vsiRNA)沉默复合物介导目标RNA特异降解的一种保守机制,通过对vsiRNA分析可进行植物病毒病原鉴定。本文利用小RNA深度测序技术对感病半夏叶片进行鉴定,结果发现,表现典型花叶症状的半夏叶片受到大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,Ds MV)、魔芋花叶病毒(Konjac mosaic virus,KoMV)、烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)等多种病毒的复合侵染。为明确SMV山西半夏分离物(SMV-SXBX)的进化关系,进行SMV-SXBX全基因组克隆与分析,获得SMV-SXBX全长为9735 nt,编码一个由3 105个氨基酸组成的多聚蛋白质。通过核苷酸与氨基酸序列比对发现,SMVSXBX与半夏分离物P同源性最高,分别为91. 1%和94. 1%,且系统发育分析表明,SMV-SXBX与半夏SMV分离物P聚为一簇。同时,也对vsiRNA进行了系统分析,研究结果有望为半夏SMV的有效防治提供一定科学依据。

菊花R病毒杭白菊分离株全基因组序列测定与分析

杭白菊作为著名的中药"浙八味"之一,种植规模和产区不断扩大,但其病毒病的发生也日益严重,对其产量和品质造成严重影响。本研究利用双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)和非序列依赖PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)等方法,对感病杭白菊病原物进行鉴定,为杭白菊病毒病原的检测构建一套快速和简便的方法。结果表明,感病杭白菊被菊花R病毒(Chrysanthemum virus R,CVR)侵染,将其命名为CVR-TX。通过对其全基因组进行序列扩增与分析,获得其全长基因组为8872 bp,编码6个ORF,具有Carlavirus属病毒的典型特征。基于全基因组核酸序列以及复制酶、外壳蛋白氨基酸的序列比对发现,CVR-TX与CVR-BJ同源性最高,分别为85.5%、96.0%和96.3%;与Carlavirus属其他病毒同源性分别在48.2%~54.4%、46.9%~55.3%和36.8%~59.5%,因此CVR被确定为一种新的Carlavirus属病毒。系统进化分析表明,基于全长基因组、复制酶(replicase)基因和外壳蛋白(coat protein,CP)基因与CVR-BJ聚为一簇,亲缘性最近。本研究获得了CVR-TX的全长基因组,丰富了CVR的基因组信息,通过生物信息学分析明确其种属关系和区域变化情况,从而为建立CVR可靠灵敏的分子检测手段和有效的防控措施提供理论基础。

基于微流控芯片的牡丹籽粕低聚茋类化合物抗癌活性的研究

为探究油用牡丹籽粕低聚茋类化合物对人源性乳腺癌细胞(MCF-7)活性的影响,通过设计制作一种浓度梯度微流控芯片,利用AO/PI双染鉴定细胞在不同质量浓度低聚茋类化合物诱导下的活性情况。结果表明:细胞在药液(低聚茋类化合物)诱导下,呈明显皱缩和裂解;在药液质量浓度梯度作用下,芯片每个培养腔内细胞活力不同;进行细胞计数可知,药液质量浓度为0. 5 mg/mL时,细胞活力约50%;药液质量浓度为0. 75 mg/mL时,细胞活力16. 17%;药液质量浓度达到1 mg/mL时,培养腔内几乎无正常细胞。该方法实现了对药液质量浓度梯度影响细胞活性的实时监测和观察,为微流控芯片技术与油用牡丹副产物抗癌活性研究的结合提供了一种新思路和新方法。

微流控芯片上循环肿瘤细胞高效率分选研究

本研究将高通量的惯性微流技术与高回收率的空间位阻技术相结合,设计并制备了一种用于血液中循环肿瘤细胞高效率分选的被动式微流控芯片。该装置通过设置过滤区域、惯性聚集区域、惯性分离区域和空间位阻区域,实现了循环肿瘤细胞的高效率分选,可在不使用任何抗体标记的情况下,从2%血细胞比容血液样品中分选出人源性乳腺癌细胞和人源性宫颈癌细胞,分离速率均达到3.43×10~7 cell/min,癌细胞回收率与富集率均分别大于95.20%和2.05×10~5。对比目前存在的诸多循环肿瘤细胞分离方法,该技术具有高通量、高回收率及高富集率的优势,可为建立癌症患者微型诊断分析平台提供新的技术手段。

半夏茎尖脱毒培养及病毒检测

以半夏(Pinellia ternata)茎尖为外植体,研究不同生长调节物质浓度配比对半夏茎尖脱毒苗诱导效果的影响。在单因素试验基础上,分别选取6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三个最优诱导浓度设计L29(3)正交试验,以确定茎尖愈伤组织诱导的最适培养基,并利用分子生物学方法对脱毒苗进行病毒检测,结果表明:当6-BA浓度为1.5 mg·L^(-1), 2,4-D浓度为2.0 mg·L^(-1)时,愈伤组织诱导率最高。正交试验得出诱导愈伤的最佳培养基配方为MS+1.5 mg·L^(-1) 6-BA+2.0 mg·L^(-1) 2,4-D+7 g·L^(-1)琼脂+30 g·L^(-1)蔗糖,并可一次性成苗。该培养基所诱导的脱毒苗经斑点酶联免疫吸附法(DOT-ELISA)和反转录PCR检测后,烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus, CMV)和大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus, SMV)脱毒率均达到100%。