葛根素对工频电磁场下人胚胎眼巩膜成纤维细胞增殖活性和Ⅰ型胶原及MMP-2表达的影响

目的探讨葛根素对工频电磁场下人胚胎眼巩膜成纤维细胞（HFSFs）的增殖活性和细胞内基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及Ⅰ型胶原表达的影响。方法培养HFSFs细胞，分为4个辐射组（0．2mT、50Hz）和对照组，辐射组分别加入0．0、1．0、5．0、10．0μmol／L葛根素；采用3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑溴盐（MTT）比色法测定HFSFs的增殖活性；采用蛋白质印迹（Western blot）法和实时定量荧光聚合酶链式反应（RT-qPCR）法分别测定葛根素对工频电磁场引起HFSFs Ⅰ型胶原和MMP-2蛋白和mRNA表达的变化。结果随着培养时间的延长，辐射组和对照组HFSFs增殖活性明显增大，差异有统计学意义（F值分别为959．472、279．468，均P〈0．01）；辐射组HFSFs24和48h增殖活性分别为0．432±0．038、0．591±0．017，明显低于对照组（0．536±0．034、0．801±0．020），差异均有统计学意义（均P〈0．01）。HFSFs在0．0、1．0、5．0、10．0μmol／L浓度葛根素的干预下增殖活性逐渐增强，A值分别为0．598±0．031、0．809±0．041、0．910±0．037、0．983±0．054，差异均有统计学意义（P〈0．05）。暴露24h后，辐射组Ⅰ型胶原蛋白表达明显低于对照组，MMP-2蛋白表达明显高于对照组，差异有统计学意义（t=7．917、7．831，均P〈0．01）；与0．0μmol／L葛根素组比较，1．0、5．0、10．0μmol／L葛根素组Ⅰ型胶原蛋白表达明显增高，MMP-2蛋白表达明显降低，差异均有统计学意义（均P〈0．01）。与对照组相比，辐射组HFSFs细胞Ⅰ型胶原mRNA表达下降，MMP-2mRNA表达升高，差异有统计学意义（t=17．293、16．378，P〈0．01）；与0．0μmol／L葛根素组比较，1．0、5．0、10．0μmol／L葛根素组Ⅰ型胶原mRNA表达明显增高，MMP-2mRNA表达明显降低，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论葛根素能够抑制工频电磁场下HFSFs的增殖活性下降，上调Ⅰ型胶原和下调MMP-2的表达，起到保护作用。