肌动蛋白相关蛋白2调控人抗原R稳定性对非小细胞肺癌细胞放疗抵抗的影响

目的 探讨肌动蛋白相关蛋白2(ARPC2)通过人抗原R(HuR)对肺癌细胞放疗抵抗的影响.方法 将肺癌细胞根据不同处理,分为7组,ARPC2过表达组(使用ARPC2过表达慢病毒感染肺癌细胞)、ARPC2敲低组(使用shARPC2敲低慢病毒感染肺癌细胞)、HuR过表达组(使用HuR过表达慢病毒感染肺癌细胞)、HuR敲低组(使用shHuR敲低慢病毒感染肺癌细胞)、ARPC2过表达的同时HuR敲低组(同时使用ARPC2过表达和shHuR敲低慢病毒感染肺癌细胞)、ARPC2敲低的同时HuR过表达组(同时使用shHuR敲低和HuR过表达慢病毒感染肺癌细胞)、对照组(使用空载体慢病毒感染肺癌细胞).6 Gy的电离辐射处理后,流式细胞术检测各组肺癌细胞(A549、Calu-1、HCC827、MSTO-211H、NCI-H1299、NCI-H520、SK-MES-1)的凋亡水平.免疫印迹法检测肺癌细胞中HuR的蛋白表达水平.通过凋亡水平指示肺癌细胞的放疗抵抗.通过HuR的表达水平的半衰期以指示HuR的稳定性.比较用非配对双尾t检验,多组间比较则采用方差分析.结果 A549(0.43±0.08、1.88±0.15)、Calu-1(0.38±0.05、1.90±0.14)、HCC827(0.37±0.07、1.89±0.23)、MSTO-211H(0.39±0.06、1.95±0.29)、NCI-H1299(0.40±0.07、1.92±0.32)、NCI-H520(0.42±0.10、1.85±0.30)、SK-MES-1(0.44±0.09、1.90±0.33)中 ARPC2 的 mRNA 和蛋白表达水平高于人正常肺细胞 BEAS-2(0.12±0.03、1.19±0.19)、BNHLF(0.08±0.02、1.16±0.20,t=11.473、14.100、13.825、15.627、18.364、20.594、24.504、9.107、10.335、9.634、11.910、10.882、9.027、10.658,P<0.05).电离辐射处理组中 ARPC2 的蛋白表达水平(0.81±0.15、1.25±0.25、0.63±0.12,0.51±0.10、0.64±0.15、1.86±0.30、0.85±0.14)高于未处理组(0.17±0.04、0.15±0.04、0.16±0.04,0.17±0.05、0.16±0.04、0.17±0.05、0.18±0.06,t=13.037、21.035、13.610、7.331、9.925、28.567、14.814,P<0.05).电离辐射处理后ARPC2过表达组肺癌细胞的凋亡[(16.48±6.11)%、(16.03±5.35)%、(18.28±8.22)%、(24.70±9.71)%、(17.68±9.11%)]低于对照组[(47.92±6.58)%、(55.31±6.94)%、(51.29±7.16)%、(51.96±9.17)%、(54.16±2.24)%,t=11.071、14.183、9.579、6.453、12.311,P<0.05],ARPC2 敲低组肺癌细胞的凋亡[(70.47±8.46)%、(84.16±0.73)%、(76.71±1.87)%、(76.05±0.47)%、(88.07±9.14)%]高于对照组[(55.21±6.29)%、(51.59±7.04)%、(50.07±5.33)%、(47.14±7.53)%、(44.41±9.38)%,t=4.584、14.550、14.912、12.124、10.543,P<0.05].ARPC2 过表达组中 HuR、p-HuR、JAK1、p-STAT3 的蛋白表达水平(0.81±0.11、0.92±0.14、0.55±0.10、0.63±0.12)高于对照组(0.15±0.03、0.14±0.04、0.15±0.03、0.16±0.05,t=18.305、22.614、8.391、11.287,P<0.05),ARPC2 敲低组中 HuR、p-HuR、JAK1、p-STAT3 的蛋白表达水平(0.19±0.05、0.15±0.04、0.14±0.03、0.17±0.05)低于对照组(0.90±0.15、0.85±0.13、0.63±0.12、0.71±0.14,t=14.200、15.628、11.307、13.462,P<0.05).ARPC2 过表达组[(11.32±0.26)、(10.17±0.22)、(10.49±0.21)、(10.17±0.03)、(10.53±0.06)h]相较对照组 HuR 半衰期[(5.61±1.31)、(5.30±2.53)、(5.72±1.95)、(5.34±0.70)、(5.86±1.09)h]延长(t=13.523、6.056、7.691、21.819、13.533,P<0.05),ARPC2 敲低组[(2.02±0.71)、(2.96±1.23)、(2.61±0.68)、(3.04±0.82)、(2.23±0.22)h]相较于对照组 HuR 半衰期[(4.92±1.69)、(5.05±0.45)、(5.38±0.56)、(5.64±0.21)、(4.62±0.37)h]缩短(t=5.012、5.047、9.941、9.714、17.558,P<0.05).电离辐射处理后,HuR 过表达组(23.01±3.83、17.30±6.59、21.10±4.58、16.44±9.04、23.36±4.56)比对照组(47.30±6.59、51.10±4.58、46.44±9.00、53.36±9.56、45.97±2.54)可抑制肺癌细胞的凋亡(t=10.077、13.322、7.935、8.869、13.716,P<0.05),HuR 敲低组(80.90±17.46、72.24±10.84、77.82±18.9、84.16±10.98、83.50±11.54)比对照组能促进肺癌细胞的凋亡(t=5.693、4.918、5.163、6.025、5.925,P<0.05).结论 ARPC2通过提高HuR的蛋白稳定性促进了肺癌细胞的放疗抵抗.

基于倾向性评分匹配分析血小板淋巴细胞比值对食管癌患者预后的预测价值

目的采用倾向性评分匹配分析法探讨血小板淋巴细胞比值(PLR)对食管癌患者预后的预测价值。方法回顾性分析2012年1月至2018年12月在山西省肿瘤医院收治的272例食管癌患者的临床资料。通过约登指数确定PLR最佳临界值。根据临界值将患者分为高PLR组和低PLR组,应用倾向性评分匹配(PSM)分析降低患者选择偏倚。采用单因素与多因素Cox回归分析患者的预后因素。生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-Rank检验。结果Cox单因素分析显示性别、吸烟史、TNM分期、体质量指数(BMI)、癌胚抗原(CEA)、系统免疫炎症指数(SII)、淋巴细胞/单核细胞比值(LMR)和PLR与食管癌患者预后相关(χ^(2)=6.63、7.08、30.38、10.40、12.95、13.21、4.52、4.06、7.77,P<0.05)。PLR最佳临界值为159.93。倾向性评分匹配前高PLR组103例,低PLR组169例,SII和LMR有统计学意义(χ^(2)=52.23、13.51,P<0.05)。倾向性评分匹配后,高PLR组62例,低PLR组62例,两组的预后相关指标之间差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。Cox多因素分析显示,倾向性评分匹配前后,TNM分期、BMI、CEA和PLR均为食管癌患者预后的独立危险因素。高PLR组食管癌患者的生存期明显短于低PLR组(χ^(2)=3.29,P<0.05)。结论PLR对评估食管癌患者预后具有重要价值,PLR越高,生存期越短。针对PLR开展个体化干预,或许对改善患者预后有积极作用。