含氮二磷酸盐联合IL-2对肾癌患者外周血γδT细胞增殖的影响

目的探讨含氮二磷酸盐联合IL-2(N-BPS/IL-2)对肾癌患者外周血γδT细胞体内诱导增殖的作用。方法①采用流式细胞仪分别测定试验组26例未经任何治疗的肾癌患者和对照组42例健康人外周血总T细胞绝对值、γδT细胞绝对值、γδT细胞相对值。②测定26例肾癌患者手术治疗后外周血总T细胞绝对值、γδT细胞绝对值、γδT细胞相对值。③26例肾癌患者行N-BPS/IL-2体内诱导γδT细胞增殖的免疫治疗,测定治疗前后外周血总T细胞绝对值、γδT细胞绝对值、γδT细胞相对值,与对照组比较。结果①肾癌患者和健康人群外周血总T细胞绝对值比较,差异无统计学意义(P>0.05);γδT细胞绝对值、γδT细胞相对值分别比较,低于健康人群水平,差异有统计学意义(P<0.001)。②26例肾癌患者手术治疗前后外周血总T细胞绝对值、γδT细胞绝对值、γδT细胞相对值比较,差异无统计学意义(P>0.05)。③26例肾癌患者N-BPS/IL-2体内诱导γδT细胞增殖治疗后外周血总T细胞绝对值、γδT细胞绝对值、γδT细胞相对值显著高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组健康人群比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论肾癌患者外周血γδT细胞计数显著低于健康人群;手术对肾癌患者外周血γδT细胞计数无明显影响;N-BPS/IL-2在体内可诱导肾癌患者外周血γδT细胞显著增殖。

苏木抑制诱变效应的初步研究

在丝裂霉素(MMC)诱导下,生长中细胞的姊妹染色单体互换频率显著增高,环磷酰胺(C.C.P)可诱发高微核率,已被普遍认同。本文以SCE及微核率为检测指标,观察活血化瘀药物:“苏木”抗MMC及C.C.P的诱导。发现苏木对MMC、C.C.P的诱导有一定的抑制作用,但其本身也能致使细胞SCE升高。

直肠癌环周切缘组织中CD133＋肿瘤干细胞表达与预后的关系

目的 探讨直肠癌环周切缘组织内是否含有CD133＋肿瘤干细胞及其与患者预后的关系.方法 取直肠癌患者手术切除标本的环周切缘组织,1/2组织做HE染色切片后显微镜下观察,环周切缘阳性为试验组,阴性为对照组,两组均经免疫组织化学法标记CD133;剩余1/2组织制成单细胞悬液,用流式细胞仪检测CD133＋肿瘤干细胞比例.随访试验组患者术后复发情况.结果 试验组28例患者中2例环周切缘存在CD133＋肿瘤干细胞,对照组72例均阴性,两组相比差异无统计学意义（P=0.076）.试验组与对照组CD133＋肿瘤干细胞比例差异具有统计学意义（5.19％比0.56％,Z=-7.739,P＜0.01）.试验组术后复发患者环周切缘CD133＋肿瘤干细胞表达水平为（6.57±1.72）％,高于未复发者的（4.77±1.33）％,差异有统计学意义（t=3.038,P＜0.05）.Spearman秩相关分析结果显示,试验组CD133＋肿瘤干细胞比例与术后复发呈正相关（r2=0.473,P＜ 0.05）.结论 直肠癌环周切缘组织中存在CD133＋肿瘤干细胞,并且环周切缘阳性时CD133＋肿瘤干细胞表达与患者术后复发有关。

前列腺素E_2合成酶与类风湿关节炎

目的 研究膜相关前列腺素E2 合成酶 (membrane associatedprostagladinE2 synthase ,mPGES)与类风湿关节炎的关系。方法 用反转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,酶联免疫吸附测定法 (ELISA)等方法分析环氧化酶 2(cyclooxygenase 2 ,COX 2 ) ,mPGES基因转录和表达以及前列腺素E2 (PGE2 )合成。结果 白细胞介素 (IL) 1β可诱导滑膜成纤维细胞COX 2 ,mPGES转录水平升高 ,主要的炎性介质PGE2 合成增加。COX 2抑制剂NS 398和mPGES抑制剂MK 886可降低IL 1β诱导的PGE2 合成增加。提示COX 2、mPGES、PGE2 三者密切相关。丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)抑止剂PD和SB可降低IL 1β诱导的滑膜成纤维细胞COX 2 ,mPGES转录水平。

食管鳞状细胞癌患者γδT细胞研究

目的探讨食管癌患者机体γδT细胞水平及与临床的关系,为γδT细胞在食管癌综合治疗中的应用提供依据。方法采用流式细胞术测定食管癌患者外周血中和癌组织中γδT细胞水平,分析其与临床的关系。结果癌组织中浸润γδT细胞水平显著高于癌旁组织(P=0.045);食管癌患者外周血中γδT细胞水平显著低于正常人(P=0.047);食管癌术后患者外周血中γδT细胞水平显著高于术前患者(P=0.037)。食管癌T分期、N分期、M分期、大体分型、病变部位、病变长度(3￣5cm组和5cm组)、组织学分级各组与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05)。食管癌患者外周血中总T细胞,各组与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05);外周血中γδT细胞年龄、性别、病变长度(<3cm),各组与正常组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论γδT细胞在机体抗食管癌中发挥重要作用,手术切除肿瘤后可使患者γδT细胞恢复正常水平。

聚合酶链反应

聚合酶链反应(polymerase chain reaction简称PCR)是近几年发展起来的一种新技术。在诊断遗传病和传染病时,可以利用此方法在体外合成几百万拷贝数的某段DNA进行分析。此方法具有快速、简便。

直肠癌环周切缘组织中CD133的表达及临床意义

目的检测直肠癌环周切缘组织内是否含有肿瘤干细胞,并观察环周切缘浸润对患者预后的影响。方法取直肠癌患者手术切除标本的环周切缘,4%甲醛固定后做成病理切片;根据环周切缘有无浸润分为环周切缘阳性组和环周切缘阴性组,2组均做免疫组织化学标记CD133肿瘤干细胞,观察CD133表达情况;随访2组患者术后1～2年复发情况。结果环周切缘阳性组免疫组织化学标记CD133+,存在CD133+肿瘤干细胞,但与环周切缘阴性组相比无统计学意义(P>0.05)。环周切缘阳性组患者1～2年复发率显著高于阴性组(P<0.05)。结论环周切缘浸润是导致直肠癌患者术后复发的重要因素,部分环周切缘浸润中存在肿瘤干细胞。

食管癌患者外周血γδT细胞对Th1/Th2细胞因子的影响

目的探讨食管癌患者外周血γδT细胞水平及对Th1/Th2细胞因子的影响。方法用流式细胞仪测定46例食管癌患者、28例本院健康职工外周血γδT细胞在淋巴细胞中的百分率和血浆中Th1/Th2细胞因子的含量。结果两组比较γδT细胞有显著性意义,Th1类因子有显著性意义,Th2类细胞因子无显著性意义。结论食管癌患者γδT细胞水平显著低于正常人群,γδT细胞可以通过分泌细胞因子调节和维护机体Th1/Th2的免疫平衡。

肺癌患者外周血免疫细胞毒细胞的检测

目的探讨肺癌患者群体的免疫细胞毒细胞的功能状态。方法应用流式细胞仪检测30例手术前肺癌患者和30例该院健康职工外周血总T淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)、NK样T杀伤细胞(NKT)、γδT细胞和CTL细胞。结果γδT细胞:正常组为(6.54±2.94)%,患者组为(3.58±2.14)%(t=3.730,P=0.001)。CTL细胞:正常组为(17.21±4.49)%,患者组为(10.86±4.67)%(t=5.130,P<0.001);其他被测细胞的百分率,经统计学分析,均无统计学意义。结论特异性免疫杀伤细胞低下对肺癌的发生有重要影响。非特异性免疫细胞毒细胞影响有限。

miRNA-1-3p通过肌细胞增强因子2A对骨肉瘤细胞生物学功能的影响

目的探讨miRNA-1-3p(miR-1-3p)对骨肉瘤细胞肌细胞增强因子2A(MEF2A)表达及生物学功能的影响。方法收集2019年1月至2020年1月山西省肿瘤医院临床确诊的20例骨肉瘤患者的肿瘤组织及癌旁正常组织,使用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测样本中miR-1-3p表达水平。采用qRT-PCR检测骨肉瘤细胞株U2-OS、SAOS-2、MG63、SW1353及人正常成骨细胞株hFOB1.19中miR-1-3p表达水平,选择miR-1-3p表达水平最低的细胞株进行后续实验。构建过表达miR-1-3p载体(miR-1-3p mimcs),转染miR-1-3p mimcs的细胞为miR-1-3p过表达组,转染空载体(miR-1-3p nc)的细胞为对照组;使用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期变化。采用miRwalk网站工具预测miR-1-3p靶基因,并通过双荧光素酶报告基因实验进行验证;蛋白质印迹法检测各组细胞MEF2A蛋白的表达。结果与癌旁组织相比,骨肉瘤组织中miR-1-3p表达下调(0.31±0.14比0.62±0.21),差异有统计学意义(t=5.31,P<0.01)。miR-1-3p在骨肉瘤U2-OS细胞中表达最低;与对照组相比,miR-1-3p过表达组细胞U2-OS细胞增殖活性受抑制(48 h吸光度值0.56±0.01比0.77±0.03,t=2.77,P<0.01;72 h吸光度值0.87±0.02比1.40±0.03,t=2.93,P<0.01),细胞周期G1至S期阻滞增加[G1期(38.24±0.55)%比(32.11±0.80)%,t=9.27,P=0.01;S期(61.24±0.90)%比(67.78±0.83)%,t=7.52,P=0.02],细胞早期凋亡率升高[(11.20±0.12)%比(1.50±0.12)%,t=2.91,P<0.05]。miRwalk网站工具预测miR-1-3p靶基因为MEF2A。双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-1-3p和MEF2A 3’UTR靶向结合,miR-1-3p过表达组U2-OS细胞荧光素酶活性低于对照组(海肾荧光素酶与萤火虫荧光素酶活性比值0.53±0.06比1.00±0.04,t=4.04,P<0.05);蛋白质印迹法结果显示,miR-1-3p过表达组U2-OS细胞MEF2A蛋白表达水平较对照组低(蛋白相对表达量0.41±0.14比0.77±0.12,t=3.93,P<0.05)。结论 miR-1-3p低表达可能与骨肉瘤细胞增殖、凋亡和周期改变相关。miR-1-3p可负向调控MEF2A蛋白表达并调控骨肉瘤的发生、发展。

肺癌患者外周血γδT细胞的检测及意义

目的探讨肺癌患者群体的γδT细胞的功能状态。方法应用流式细胞术检测124例手术前肺癌患者（肺癌组）和56名健康职工（健康对照组）外周血γδT细胞。结果γδT细胞健康对照组为（6．54±2．90）％，患者组为（3．76±2．81）％（t=3．568，P〈0．001）。肺癌患者外周血中γδT细胞水平显著低于健康人（P=0．000）；肺癌组织学分类、T分期、N分期、M分期、临床分期、大体分型、病变部位各组与健康对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；肺癌患者中不同年龄、性别各组患者外周血中γδT细胞比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论γδT细胞减少对肺癌的发生有重要影响。

非小细胞肺癌患者γδT细胞和NKT细胞及其亚群检测的意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者γδT细胞、自然杀伤性T(NKT)细胞及相关亚群细胞免疫功能状态及其意义。方法用荧光标记的单克隆抗体染色,流式细胞仪检测外周血γδT细胞、NKT细胞及相关亚群的水平。结果NSCLC患者γδT细胞、CD_(56)^+γδT细胞、CD_(56)^-γδT细胞、NKT细胞、γδT^+NKT细胞绝对计数和γδT细胞、γδT^-NKT细胞相对计数显著低于正常对照;NKT细胞、γδT^+ NKT细胞、γδT^-NKT细胞相对计数和γδT^-NKT细胞绝对计数与正常对照比较,差异无统计学意义。γδT细胞与NKT细胞相关性分析结果,正常对照无相关性,NSCLC人群呈正相关关系(r=0.426,P= 0.009)。结论NSCLC患者γδT细胞、NKT细胞及其亚群细胞数量显著低于正常对照,NSCLC人群γδT细胞与NKT细胞呈正相关关系。