化痰散结方对肿瘤间质纤维母细胞活化相关蛋白表达的影响

目的探讨化痰散结方对肿瘤间质纤维母细胞活化状态的影响。方法 walker-256细胞株建立大鼠胃种植瘤模型,40只大鼠,36只于胃部接种瘤块,其余4只不接种的大鼠为正常对照组,种植瘤块的Wistar大鼠随机分为化痰散结方高剂量组,化痰散结中药3m L/只(含生药3g·m L-1),化痰散结方低剂量组,化痰散结中药3m L/只(含生药1g·m L-1),模型对照组(给予生理盐水3m L/只);每组12只,各组于造模后次日立即给药,每日灌胃,连续给药21d;正常对照组每日仅正常饮食饲养;21d后通过免疫组化、Western-blot、Real-time PCR法检测各组胃种植瘤组织中及正常大鼠胃组织中CD34、成纤维细胞激活蛋白(fibroblast activation protein alpha,FAPα)、平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-Sma)的表达。结果模型对照组与化痰散结方高、低剂量组胃种植瘤中CD34的蛋白及基因表达水平明显低于正常对照组大鼠胃组织(P<0.05或<0.01),而其FAPα和α-SMA的表达则明显高于正常对照组(P<0.05);与模型对照组相比,中药高、低剂量组CD34的表达均升高(P<0.05或<0.01);而中药高剂量组中FAPα与α-SMA的表达则明显低于模型对照组(P<0.01)。结论化痰散结方可以降低肿瘤间质纤维母细胞活化相关蛋白的表达,对间质纤维母细胞活化有一定的阻断作用。

AI细胞形态学联合DNA定量分析鉴别良恶性胸腹水的探讨

目的探讨通过人工智能(AI)细胞学联合DNA定量分析(DNA-ICM)辅助诊断系统在良恶性胸腹水鉴别中的诊断价值。方法用液基细胞学(LCT)、DNA-ICM、AI、AI联合DNA-ICM系统对360例胸腹水标本进行良恶性鉴别,比较几种检测方法的敏感度、特异性、准确度、Kappa值、约登指数及曲线下面积。结果通过AI联合DNA-ICM检测良恶性胸腹水的敏感度、特异性、准确度分别为95.23%、94.12%、94.44%,高于其他三种单独检测方法,差异均具有统计学意义(P<0.05)。LCT、DNA-ICM、AI检测的Kappa值分别为0.646、0.642、0.586,约登指数分别为0.693、0.687、0.676,AUC分别为0.846、0.843、0.838;通过AI联合DNA-ICM的Kappa值为0.869,约登指数为0.893,AUC为0.947,均高于三种单独检测方法。结论三种单独检测方法中LCT的可靠性、真实性、诊断价值最高,可为临床鉴别良恶性胸腹水的常用方法。通过AI联合DNA-ICM辅助诊断系统阅片,在鉴别良恶性胸腹水的诊断效能比三种单独检测方法好,可作为临床鉴别良恶性胸腹水的可靠方法。

射干麻黄汤对哮喘性肺炎大鼠肺部炎症反应及免疫反应的影响

【目的】探讨射干麻黄汤对哮喘性肺炎大鼠肺部炎症反应及免疫反应的影响。【方法】将120只大鼠随机分为空白组,模型组,地塞米松组,中药低、中、高剂量组,每组20只。除空白组,其他各组大鼠采用卵清蛋白(OVA)激发法复制哮喘性肺炎模型。成功造模后,空白组和模型组用等量的生理盐水灌胃,地塞米松组给予剂量为1.0 mg·kg^-1·d^-1的地塞米松溶液灌胃,中药低、中、高剂量组分别对应给予剂量为10.0、20.0、40.0 g·kg^-1·d^-1的射干麻黄汤灌胃,共计14 d。给药结束后,苏木素-伊红(HE)染色观察肺组织病理,称质量法测定肺组织湿干质量比,牛鲍氏计数板计算血液白细胞数目,酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测肺组织匀浆中炎症因子白细胞介素(IL)-4、IL-13、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,流式细胞术检测血液中CD4^+CD25^+、CD8^+CD28^-细胞所占比例,蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测肺组织胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)、Toll样受体4(TLR4)和核因子κB(NF-κB)表达。【结果】与模型组比较,中药各剂量组大鼠肺组织病理损害明显减轻,肺湿干质量比明显减少,血液中白细胞数量明显减少,肺组织中炎症因子IL-4、IL-13和TNF-α含量明显减少,血液中CD4^+CD25^+和CD8^+CD28^-细胞所占比例明显增多,肺组织中TSLP、TLR4和NF-κB表达水平明显减少(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性。【结论】射干麻黄汤呈剂量依赖性减轻哮喘肺炎大鼠的肺部病理损伤、炎症反应,增强免疫效应,并下调肺组织TSLP、TLR4和NF-κB的表达。

肺腺癌转移相关转录本1诱导肺癌HCC827细胞对奥希替尼耐药的作用机制

目的探讨肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)和奥希替尼对肺癌细胞HCC827增殖和凋亡的影响以及MALAT1介导奥希替尼耐药的机制。方法应用LV-vector和LV-over/MALAT1转染HCC827细胞,建立稳定细胞株HCC827/Vector和HCC827/MALAT1。应用短发夹RNA阴性对照(shRNA-NC)、shRNA人表皮生长因子受体3(shRNA-ERBB3)转染HCC827/MALAT1细胞,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测MALAT1、奥希替尼和shRNA-ERBB3对细胞增殖的影响,应用流式细胞术检测MALAT1、奥希替尼和shRNA-ERBB3对细胞凋亡的影响。应用Westernblot检测MALAT1、奥希替尼和shRNA-ERBB3作用后,肺癌细胞中表皮生长因子受体(EGFR)和ERBB3信号通路相关蛋白的表达。结果MTT结果显示,奥希替尼对HCC827/MALAT1细胞增殖的抑制作用显著降低,半数抑制浓度(IC50)>4000nmol/L;但干扰ERBB3后,HCC827/MALAT1细胞对奥希替尼再次敏感,IC50为(17.27±3.21)nmol/L。细胞凋亡实验显示,10nmol/L奥希替尼干预HCC827/MALAT1细胞后,凋亡率为(8.38±0.92)%;但干扰ERBB3后,奥希替尼能促进HCC827/MALAT1细胞凋亡,凋亡率为(27.17±5.83)%,差异有统计学意义(P<0.01);Westernblot检测结果显示,HCC827/MALAT1细胞中磷酸化ERBB3(p-ERBB3)、p-AKT和p-ERK蛋白明显上调,奥希替尼能抑制磷酸化EGFR(p-EGFR)蛋白的表达,但对p-ERBB3、p-AKT和p-ERK蛋白的表达无影响。敲减ERBB3后,奥希替尼能下调p-EGFR、p-ERBB3、p-AKT和p-ERK蛋白的表达水平。结论MALAT1可能是通过激活ERBB3/PI3K/AKT和ERBB3/MAPK/ERK信号通路介导了奥希替尼耐药。

健脾解毒降浊汤联合FOLFOX4方案治疗晚期结直肠癌效果观察

目的:观察健脾解毒降浊汤联合FOLFOX4方案治疗晚期结直肠癌的疗效及不良反应。方法:选择晚期结直肠癌47例,随机分为观察组25例和对照组22例。对照组采用FOLFOX4方案进行化疗,观察组在对照组治疗的基础上加用健脾解毒降浊汤。两组均以21天为1个疗程,入组病例均至少完成2个周期的治疗。观察两组近期疗效、生存质量改善及不良反应发生情况。结果:两组总有效率差异不显著(P>0.05),但观察组疾病控制率显著高于对照组(P<0.05);观察组治疗后KPS分值提高率、体重增加率均显著高于对照组(P<0.05)。观察组白细胞、中性粒细胞减少发生率显著低于对照组,外周神经毒性、乏力、呕吐发生率均显著或非常显著低于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:健脾解毒降浊汤配合FOLFOX4方案化疗可提高结直肠癌的疾病控制率,改善患者生存质量,降低化疗药物的不良反应。