慢病毒介导的GHSR1a shRNA对结直肠癌细胞生长的影响

目的:构建生长激素促泌素受体1a(growth hormone secretagogue receptor 1a,GHSR1a)基因短发夹干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体,感染人结直肠癌细胞系SW480,观察沉默GHSR1a基因对SW480细胞生长的影响,并探讨其作用机制。方法:构建特异性靶向GHSR1a基因的shRNA慢病毒表达载体和阴性对照序列慢病毒载体;建立稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞、阴性对照细胞(NC)及空白对照细胞(BC),RTPCR检测GHSR1a的mRNA在细胞中的表达;通过Western blot技术检测细胞中GHSR1a、ghrelin、PTEN、p-AKT及p53蛋白的水平;CCK-8法测定GHSR1a shRNA对SW480细胞活力的影响;建立裸鼠结直肠癌皮下移植瘤模型,实验结束后处死裸鼠并测量各组裸鼠肿瘤重量;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Ki-67和PTEN的阳性表达。结果:在体外实验中,GHSR1a在人结直肠癌细胞株Caco-2及SW480中的表达明显高于人正常结肠上皮细胞株NCM460的表达;成功建立了稳定表达GHSR1a shRNA的SW480细胞;GHSR1a shRNA能明显抑制SW480细胞GHSR1a mRNA及蛋白的表达;沉默GHSR1a基因后SW480细胞活力明显减弱;与NC组相比较,GHSR1a shRNA组细胞中PTEN mRNA及蛋白水平上调,AKT磷酸化被抑制,p53的表达明显增加;在体内实验中,与NC组相比较,GHSR1a shRNA组裸鼠结直肠癌皮下移植瘤重量明显减轻,同时Ki-67表达下调,PTEN表达上调。结论:慢病毒介导的GHSR1a shRNA对体内、外人结肠癌细胞的生长有明显抑制作用,该作用可能通过上调PTEN及其下游PI3K/AKT通路实现。

腹腔镜与开腹手术治疗早期胃癌的临床疗效和两年复发率对比评价

目的:研究腹腔镜与开腹手术治疗早期胃癌的临床疗效和两年复发率。方法:以60例早期胃癌患者为研究对象,根据其入院顺序进行分组,其中包括观察组30例、对照组30例。观察组应用腹腔镜手术治疗,对照组应用开腹手术治疗,将两组手术指标、治疗效果以及两年复发率进行对比。结果:观察组早期胃癌患者术中出血量(156.52±2.65)ml、手术切口长度(6.22±1.54)cm、住院时间(12.22±1.31)d,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组早期胃癌患者治疗总有效率93.33%高于对照组的66.67%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组两年复发率3.33%低于对照组的33.33%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:腹腔镜与开腹手术治疗早期胃癌的临床疗效比较中,腹腔镜手术更具有优势,具有极高安全性,复发率较低,值得研究和推广。

术后早期肠梗阻再手术17例分析

目的探讨术后早期肠梗阻再手术的原因，总结再手术的经验。方法回顾分析1995年1月～2009年7月17例剖腹术后早期肠梗阻再手术患者的临床资料。结果16例经再手术明确梗阻原因，其中术后肠粘连7例，术前术中漏诊消化系统肿瘤3例，遗漏多发肠石1例，手术操作失误致盆底关闭不严1例，粘连带卡压肠管1例，合并新发疾病3例，经再手术后2～5d梗阻解除。1例手术亦未能明确梗阻原因及部位，行盲目肠侧侧吻合术后31d梗阻解除。结论术后早期肠梗阻原因复杂，充分的术前准备，规范的手术操作，严密的术后观察，可减少再手术的机率，选择适宜的手术方式，精确细致的手术操作是再手术成功的关键。

PTEN在白藜芦醇对体外直肠癌细胞生长和凋亡的影响

分析第10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白基因(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)在直肠癌细胞系中的相对表达水平,以及白藜芦醇对直肠癌细胞增殖和凋亡的作用,并分析其可能作用机制。利用Western blot检测PTEN在人直肠癌细胞株Caco-2和SW480及人正常结肠上皮细胞株NCM460中的表达;不同浓度的白藜芦醇作用体外SW480细胞后,CCK-8法检测白藜芦醇对细胞增殖的影响;流式细胞术检测白藜芦醇对细胞凋亡的影响;Western blot检测Caspase-3,PTEN,p53以及AKT蛋白在SW480细胞中的表达水平;构建慢病毒介导特异性短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)下调SW480细胞中PTEN的表达,检测下调PTEN的表达后是否影响白藜芦醇对体外直肠癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用。结果表明,与NCM460细胞相比较,PTEN在Caco-2和SW480中的表达量均显著下调,差异有统计学显著性(P<0.001);白藜芦醇对体外直肠癌SW480细胞增殖有明显抑制作用,并诱导细胞凋亡;白藜芦醇对SW480细胞中Caspase-3,PTEN和p53蛋白的表达均有明显上调作用,而抑制磷酸化AKT的表达;shRNA PTEN可明显下调PTEN在SW480细胞中的表达,同时降低白藜芦醇对SW480细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用。提示白藜芦醇可通过上调PTEN的表达从而调控体外直肠癌细胞增殖和凋亡。

经肛门取出标本的改良达芬奇机器人手术系统直肠乙状结肠前切除术的临床疗效

目的：探讨经肛门取出标本的改良达芬奇机器人手术系统直肠乙状结肠前切除术治疗直肠乙状结肠肿瘤的临床疗效。方法：采用回顾性横断面研究方法。收集2016年3—10月中南大学湘雅二医院收治的47例行经肛门取出标本的改良达芬奇机器人手术系统直肠乙状结肠前切除术的直肠乙状结肠肿瘤患者临床病理资料。术中切除肠管直接经肛门拖出，不取腹部小切口。观察指标：（1）手术及术后恢复情况。（2）术后病理学检查情况。（3）随访情况。采用门诊和电话方式进行随访，了解患者术后生存及肿瘤复发、转移情况。随访时间截至2017年6月。正态分布的计量资料采用x^-±s表示。结果：（1）手术及术后恢复情况：47例患者均顺利完成手术，无一例中转开腹。47例患者中，8例行结肠肛管超低位吻合术； 3例行末端回肠预防性造瘘术；1例将拟切除标本外翻后行括约肌间切除术。47例患者手术时间为（222±73）min，术中出血量为（21±9）mL，术后首次下床活动时间为（1.7±0.8）d，术后肛门首次排气时间为（2.3±1.0）d，术后引流管拔除时间为（6±5）d。术后3例患者发生并发症，其中吻合口瘘2例，予保守治疗后痊愈；尿潴留1例，于术后4周拔除导尿管。47例患者肛门功能均恢复良好，术后住院时间为（10±4）d。（2）术后病理学检查情况：47例患者淋巴结清扫数目为（15±7）枚，均为R0切除。肿瘤病理学诊断：直肠乙状结肠腺癌38例（高分化1例、中分化32例、低分化5例），混合型癌4例，管状绒毛腺瘤2例，黏液腺癌1例，神经内分泌癌1例，灶癌1例。47例患者肿瘤最大直径为（3.5±1.5）cm。术后肿瘤病理学T分期：T1期 4例，T2期9例，T3期18例，T4a期14例。术后肿瘤病理学N分期：N0期30例，N1期8例，N2期7例。术后肿瘤病理学TNM分期：Ⅰ期11例，Ⅱ期19例，Ⅲ期15例。2例管状绒毛腺瘤无分期。（3）随访情况：47例患者中，42例获得术后随访，随访时间为7～15个月，中位随访时间为11个月。随访期间，38例患者无瘤生存，3例肿瘤复发或转移，1例死亡。结论：经肛门取出标本的改良达芬奇机器人手术系统直肠乙状结肠前切除术治疗直肠乙状结肠肿瘤安全可行，创伤小，近期疗效满意。

腹腔镜结直肠肿瘤手术的临床分析

目的 总结腹腔镜结直肠肿瘤手术的临床经验.方法 回顾性分析2006年12月至2009年5月收治47例腹腔镜结直肠肿瘤手术患者的临床资料.结果 本组41例成功完成腹腔镜结直肠肿瘤手术,中转开腹手术6例,术后全组无死亡病例,平均手术时间（180±30）min,平均术中出血量（70±30）ml,术后平均住院时间（8.5±2.5）d,腹腔镜结直肠肿瘤手术38例（92.7%）获3～36个月随访,11例肿瘤复发、转移死亡,复发率28.9%,未发现Trocar穿刺部位及小切口部位肿瘤转移.结论 腹腔镜结直肠肿瘤手术安全可行,可以达到根治性切除肿瘤的目的 .