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重组P_(53)基因转染的肝癌细胞克隆株的建立及其生物学活性观察
1
作者 杨晓红 任碧轩 +2 位作者 唐恩洁 李仁 冯莉 《川北医学院学报》 CAS 1999年第2期10-12,共3页
人P53基因位于17 号染色体短臂上(17p13.1) ,编码一个由393 个氨基酸组成的核磷酸蛋白,有调控细胞的生长,维持基因组的稳定,其突变、缺失在恶性肿瘤发生发展中起着非常重要的作用。为进一步探讨野生型P53 基因... 人P53基因位于17 号染色体短臂上(17p13.1) ,编码一个由393 个氨基酸组成的核磷酸蛋白,有调控细胞的生长,维持基因组的稳定,其突变、缺失在恶性肿瘤发生发展中起着非常重要的作用。为进一步探讨野生型P53 基因的抗肿瘤特性,我室采用分子克隆方法构建了重组野生型P53 真核表达载体(pxT1—P53) ,用磷酸钙—DNA 共沉淀法将其导入人肝癌HepG2 细胞内,通过标记基因NeOR 筛选带外源P53 基因的G418 抗药性克隆,对G418 抗药性克隆细胞的生长增殖和粘附能力进行观察。结果表明,导入野生型P53基因能使肝癌HepG2 细胞的生长增殖速度较对照细胞明显减慢,细胞粘附能力下降。提示野生型P53 基因能抑制肝癌细胞的生长。本研究为肝癌的P53 实验性基因治疗提供了一定的依据。 展开更多
关键词 野生型P53基因 肝癌细胞系 肝癌 基因治疗
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绿色荧光蛋白表达质粒的构建及鉴定 被引量:4
2
作者 杨健 任碧轩 唐恩洁 《川北医学院学报》 CAS 2005年第2期123-125,共3页
目的构建能表达绿色荧光蛋白的载体———pCDNA3.1-GFP。方法使用基因重组方法从质粒pGreenlantern中获取绿色荧光蛋白基因片段,克隆入PCDNA3.1的多克隆区,构建成PCDNA3.1-GFP,通过限制性核酸内切酶NotI与BamHI对所建质粒进行分析后,转... 目的构建能表达绿色荧光蛋白的载体———pCDNA3.1-GFP。方法使用基因重组方法从质粒pGreenlantern中获取绿色荧光蛋白基因片段,克隆入PCDNA3.1的多克隆区,构建成PCDNA3.1-GFP,通过限制性核酸内切酶NotI与BamHI对所建质粒进行分析后,转染HepG2细胞并观察绿色荧光蛋白表达。结果经限制性内切酶及转染HepG2细胞表达鉴定,证实成功构建了PCDNA3.1-GFP。结论成功构建成携有绿色荧光蛋白报告基因哺乳动物表达载体,该质粒可用于融合表达目的蛋白,并将目的蛋白表达定位。 展开更多
关键词 表达质粒 鉴定 绿色荧光蛋白报告基因 PCDNA3.1 限制性核酸内切酶 HepG2细胞 PCDNA3 限制性内切酶 基因片段 蛋白表达 细胞表达 表达载体 哺乳动物 融合表达 表达定位 组方法 多克隆 克隆人 分析后 转染
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RNA干扰体外抑制乙型肝炎病毒抗原表达的实验研究 被引量:3
3
作者 汪光蓉 张国元 +3 位作者 杨健 胡为民 唐恩洁 朱道银 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期311-315,共5页
目的针对乙型肝炎病毒(HBV)prec/c区构建shRNA表达载体,观察shRNA表达载体对HBV抗原表达的抑制作用,为运用RNA干扰(RNAi)技术治疗乙型肝炎奠定基础。方法运用基因重组技术构建shRNA表达载体,经酶切,测序鉴定确认后,与1.5倍HBV真核表达质... 目的针对乙型肝炎病毒(HBV)prec/c区构建shRNA表达载体,观察shRNA表达载体对HBV抗原表达的抑制作用,为运用RNA干扰(RNAi)技术治疗乙型肝炎奠定基础。方法运用基因重组技术构建shRNA表达载体,经酶切,测序鉴定确认后,与1.5倍HBV真核表达质粒pHBV1.5共转染Hela细胞,并于转染后72 h,用微粒子酶免疫实验(MEIA)分别检测细胞上清液和细胞裂解液中HBsAg和HBeAg表达水平;用半定量PCR检测prec/c mRNA的转录情况;分析shRNA表达载体对HBe/HBs抗原表达的抑制情况。结果成功构建了针对HBV prec/c区的shRNA表达载体psiHBV4、psiHBV5、psiHBV6及无关shRNA表达载体psiC;筛选到对HBeAg有明显的抑制作用的psiHBV4载体,同时其对HBsAg的表达有促进作用;psiHBV5和psiHBV6对HBeAg的抑制作用相对较弱,其对HBsAg的表达也有不同程度的促进作用;无关干扰对照psiC对HBV两种抗原的表达均无显著抑制作用。结论成功构建带U6启动子的shRNA表达载体并初步筛选到可显著抑制HBeAg表达的psiHBV4;本研究设计的3个靶向序列中,只有一个序列有大约70%的抑制率,而另外两个序列的抑制率相对较小,说明RNA干扰作用有较强的序列依赖性;无关干扰序列psiC几乎无干扰作用,说明siRNA产生的干扰作用具有高度的特异性。以上结果为应用RNAi治疗乙型肝炎奠定了一定的基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 抗原 SHRNA RNA干扰 表达载体
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小干扰RNA(siRNA)对小鼠乙型肝炎病毒复制和表达影响的实验研究 被引量:4
4
作者 汪光蓉 张国元 +3 位作者 杨健 唐中 唐恩洁 朱道银 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期157-160,共4页
目的建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染的动物模型,并在此基础上观察小干扰RNA(siRNA)对小鼠乙型肝炎病毒复制和表达的影响。方法用水动力学方法,向小鼠尾静脉注射1.5倍的HBV真核表达质粒pHBV1.5建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型,明确感染... 目的建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染的动物模型,并在此基础上观察小干扰RNA(siRNA)对小鼠乙型肝炎病毒复制和表达的影响。方法用水动力学方法,向小鼠尾静脉注射1.5倍的HBV真核表达质粒pHBV1.5建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型,明确感染后,再将其与针对乙型肝炎病毒核心区的siRNA表达载体(psiHBV4)共注射,于注射后第6天取血测血清HBsAg,HBeAg(MEIA),通过RT-PCR检测肝组织HBVC区mRNA转录子的水平。同时设立PBS对照组,空载体对照组和无关干扰对照组。结果注射后第6天血清中HBsAg,HBeAg在pHBV1.5感染组中高表达。psiHBV4干扰组中HBeAg的表达受到了明显的抑制,与感染组比较差异有显著性(P<0.01),RT-PCR显示肝内HBVCmRNA水平亦明显降低。而无关干扰对照组则无相应的干扰作用。结论RNAi能特异,高效的抑制小鼠体内HBV的复制和表达,同时通过水动力学方法,成功建立了小鼠急性乙型肝炎病毒感染的动物模型,为进一步研究乙型肝炎病毒奠定了基础。 展开更多
关键词 肝炎病毒乙型 模型 动物 基因疗法 RNA干扰
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喉癌癌基因研究进展 被引量:2
5
作者 李丽 冯俊 +1 位作者 唐嗣泉 赵冰琳 《川北医学院学报》 CAS 2007年第4期387-390,共4页
关键词 晚期喉癌 基因研究进展 全身恶性肿瘤 鳞状细胞癌 癌癌 治疗效果 病理类型 早期喉癌
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抑制性消减杂交筛选食道癌相关基因 被引量:3
6
作者 李丽 王朝莉 +1 位作者 陈果 敬保迁 《川北医学院学报》 CAS 2007年第5期421-424,共4页
目的筛选食道癌发生、发展和转移过程中表达变化的基因。方法使用基于抑制性PCR技术的消减杂交方法,对食道鳞状上皮细胞癌组织与癌旁正常黏膜组织cDNA进行消减杂交,并对食道癌组织表达发生变化的基因克隆、测序及同源性分析。结果对等... 目的筛选食道癌发生、发展和转移过程中表达变化的基因。方法使用基于抑制性PCR技术的消减杂交方法,对食道鳞状上皮细胞癌组织与癌旁正常黏膜组织cDNA进行消减杂交,并对食道癌组织表达发生变化的基因克隆、测序及同源性分析。结果对等量的食道鳞状上皮细胞癌组织与癌旁正常黏膜组织cDNA进行消减杂交后,获得4个与食道癌发生与转移有关的序列标签,经测序和同源性检索证实为食道癌相关基因2、胱抑素B、膜联蛋白A1、钙粒蛋白A,它们的表达变化可能与食道癌的去分化、恶性增殖转化有关。结论抑制性消减杂交技术可高通量地分析食道癌发生、发展和转移过程中基因表达的变化。 展开更多
关键词 食道癌 SSH 特异表达基因
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反义核苷酸沉默Livin基因对喉鳞癌细胞凋亡影响的体外研究 被引量:5
7
作者 冯俊 李丽 +2 位作者 杨九梅 彭涛 王朝莉 《西部医学》 2016年第9期1207-1210,共4页
目的为了保护喉功能和提高喉鳞癌病人的生活质量,我们设计反义Livin作用于喉鳞状细胞癌来减少Livin表达,分析在体外对喉鳞状细胞癌细胞凋亡的影响。方法用real-time quantitative PCR对AS-ODNs、SenODNs、Mis-ODNs、hep-2组(Control)的L... 目的为了保护喉功能和提高喉鳞癌病人的生活质量,我们设计反义Livin作用于喉鳞状细胞癌来减少Livin表达,分析在体外对喉鳞状细胞癌细胞凋亡的影响。方法用real-time quantitative PCR对AS-ODNs、SenODNs、Mis-ODNs、hep-2组(Control)的Livin mRNA进行分析;用Western blot对AS、Sen、Mis、与hep-2组的Livin蛋白进行分析;用流式细胞仪分析喉癌细胞的凋亡情况。结果AS-ODNs、Sen-ODNs、Mis-ODNs与Control组的Livin mRNA相对表达量以AS-ODNs组最低,为(24.03±7.02)%,AS组与Sen、Mis、Control组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。AS、Sen、Mis与Control组的Livin蛋白相对表达量以AS-ODNs组最低,为(11.65±3.68)%,AS组与Sen、Mis、Control组比较,差异亦有统计学意义(均P<0.05)。将AS、Sen、Mis转染喉鳞状细胞癌细胞,行流式细胞仪检测,结果发现AS组的凋亡率为(36.54±6.04)%,远高于Sen、Mis、Control组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在体外,Livin反义多核苷酸降低了喉鳞状细胞癌中Livin的表达,同时增强了喉鳞状细胞癌细胞的凋亡。 展开更多
关键词 LIVIN 反义核苷酸 喉鳞状细胞癌 凋亡
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Livin基因在喉癌组织的表达及siRNA对喉鳞癌细胞影响的研究 被引量:3
8
作者 冯俊 李丽 +3 位作者 杨久梅 庄元卓 彭涛 王朝莉 《川北医学院学报》 CAS 2018年第5期645-648,共4页
目的:(1)研究Livin基因在喉癌组织中的表达;(2)设计siRNA沉默喉鳞癌细胞Livin基因,检测其细胞中Livin蛋白表达。方法:(1)采用免疫组织化学MaxVision法染色检测87例喉癌组织,79例癌旁组织及19例转移淋巴结中Livin蛋白的表达情况;(2)用Wes... 目的:(1)研究Livin基因在喉癌组织中的表达;(2)设计siRNA沉默喉鳞癌细胞Livin基因,检测其细胞中Livin蛋白表达。方法:(1)采用免疫组织化学MaxVision法染色检测87例喉癌组织,79例癌旁组织及19例转移淋巴结中Livin蛋白的表达情况;(2)用Western blot对SH2-R、SH2-F、NC组的喉鳞癌细胞(hep-2)的Livin蛋白进行分析。结果:(1)喉鳞癌组织中Livin表达阳性率为71. 26%,显著高于癌旁喉组织。TNM分期中Ⅲ+Ⅳ期喉癌阳性表达率为89. 28%,明显高于TNM分期中Ⅰ+Ⅱ期喉癌;在喉鳞癌颈淋巴结转移阳性者Livin阳性表达率高达73. 68%,高于颈淋巴结转移阴性者。(2) SH2-R、SH2-F、NC组的Livin蛋白相对表达量以SH2-R组最低(12. 31±4. 43)%,SH2-R组与SH2-F、NC组比较有统计学意义。结论:Livin基因在喉癌组织中高表达;在体外,siRNA降低了喉鳞状细胞癌中Livin的表达。 展开更多
关键词 LIVIN SIRNA 喉鳞状细胞癌
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反义ATM多核苷酸对喉鳞状细胞癌ATM mRNA、蛋白影响的体外研究 被引量:2
9
作者 李丽 冯俊 +1 位作者 王朝莉 敬保迁 《川北医学院学报》 CAS 2012年第5期438-440,共3页
目的:设计反义ATM多核苷酸作用于喉鳞状细胞癌以探讨其对ATM mRNA、蛋白表达的影响。方法:用Westernblot和real-time quantitative PCR对AS-ODNs、Sen-ODNs、Mis-ODNs、lipo与hep-2组的ATM蛋白和ATM mRNA进行分析。结果:AS-ODNs、Sen-O... 目的:设计反义ATM多核苷酸作用于喉鳞状细胞癌以探讨其对ATM mRNA、蛋白表达的影响。方法:用Westernblot和real-time quantitative PCR对AS-ODNs、Sen-ODNs、Mis-ODNs、lipo与hep-2组的ATM蛋白和ATM mRNA进行分析。结果:AS-ODNs、Sen-ODNs、Mis-ODNs、lipo与hep-2组(对照组)的ATM蛋白及ATM mRNA相对表达量以AS-lipo组最低,分别为(48.14±5.53)%和(11.03±2.51)%,AS组与Sen、Mis、lipo、hep-2组比较有差异(P<0.05)。结论:反义ATM多核苷酸降低了喉鳞状细胞癌细胞中ATM mRNA、蛋白的表达,其可能使喉鳞状细胞癌细胞对放射治疗的敏感性增强。 展开更多
关键词 ATM 反义ATM 喉鳞状细胞癌
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RNAi抗病毒感染的研究进展 被引量:2
10
作者 汪光蓉 朱道银 唐恩洁 《川北医学院学报》 CAS 2005年第4期473-475,共3页
RNA干扰(RNA interference,RNA i)是指由双链RNA(doub le-strand RNA,dsRNA)引发的转录后基因沉默机制(postt-ranscriptional gene silenc ing,PTGS),具有序列特异性和高效性。RNA i作为一门新的基因阻断技术,其作用是由dsRNA启动,通过... RNA干扰(RNA interference,RNA i)是指由双链RNA(doub le-strand RNA,dsRNA)引发的转录后基因沉默机制(postt-ranscriptional gene silenc ing,PTGS),具有序列特异性和高效性。RNA i作为一门新的基因阻断技术,其作用是由dsRNA启动,通过在转录水平,转录后水平,翻译水平等多个水平上,对同源基因表达的特异阻断和抑制来实现的。它在抗病毒感染的研究中显示出强大而特异的作用,故受到人们的广泛关注。本文就近年来有关RNA i抗病毒感染的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 DSRNA RNA干扰 病毒感染
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RNAi—一种关闭基因的新方法 被引量:1
11
作者 杨健 唐恩洁 朱道银 《川北医学院学报》 CAS 2003年第3期187-189,共3页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)在哺乳类细胞中是利用同源双链小型干扰RNA(small interference RNA,siRNA)诱导特异性基因表达抑制,它主要发生于转录后基因水平,所以又称为转录后基因沉默(post transcription gene silencing,PTGS),它... RNA干扰(RNA interference,RNAi)在哺乳类细胞中是利用同源双链小型干扰RNA(small interference RNA,siRNA)诱导特异性基因表达抑制,它主要发生于转录后基因水平,所以又称为转录后基因沉默(post transcription gene silencing,PTGS),它的发生机制目前虽不十分清楚,但一些实验证实了其发生过程。双链 RNA(double strand RNA,dsRNA)首先被切割为siRNA,siRNA与一些蛋白形成RNA引导的沉默复合物(RNA induced silencing complex,RISC),介导基因表达沉默。由于 RNAi的特异性、高效性、方便性,已成为研究基因功能、肿瘤基因治疗、病毒感染基因治疗的新方法。 展开更多
关键词 RNAI RNA干扰 基因表达 基因治疗 沉默复合物
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RNA干扰技术在肿瘤基因治疗中的研究进展 被引量:2
12
作者 汪光蓉 朱道银 唐恩洁审校 《四川生理科学杂志》 2005年第1期20-23,共4页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指由双链RNA(double2strand RNA,dsRNA)引发的转录后基因沉默机制(posttranscriptional gene silencing,PTGS),具有序列特异性和高效性,RNAi作为一门新的基因阻断技术,是一种有广阔应用前景的抗肿瘤基... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指由双链RNA(double2strand RNA,dsRNA)引发的转录后基因沉默机制(posttranscriptional gene silencing,PTGS),具有序列特异性和高效性,RNAi作为一门新的基因阻断技术,是一种有广阔应用前景的抗肿瘤基因治疗方法,近年来受到人们的广泛关注。本文将RNAi作用机制及其在肿瘤治疗中的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 RNA干扰技术 肿瘤基因治疗 基因沉默机制 基因治疗方法 RNAI 序列特异性 gene 阻断技术 肿瘤治疗 作用机制 高效性 抗肿瘤
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RNAi——一种抗病毒感染的新方法 被引量:1
13
作者 杨健 唐恩洁 朱道银 《国外医学(病毒学分册)》 2003年第3期89-94,共6页
RNAi又称之为转录后基因沉默 (post transcription gene silencing,PTGS) ,是广泛存在于植物、线虫、果蝇、真菌和动物中的一种抗病毒机制 ,有如脊椎动物的免疫系统 ,它能特异地用于抗病毒感染 ,是一种有广泛应用前景的抗病毒感染的基... RNAi又称之为转录后基因沉默 (post transcription gene silencing,PTGS) ,是广泛存在于植物、线虫、果蝇、真菌和动物中的一种抗病毒机制 ,有如脊椎动物的免疫系统 ,它能特异地用于抗病毒感染 ,是一种有广泛应用前景的抗病毒感染的基因治疗方法 。 展开更多
关键词 RNAI 抗病毒感染 转录后基因沉默 感染性疾病 基因治疗
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RNA干扰体内抑制HBeAg表达
14
作者 汪光蓉 张国元 +3 位作者 杨健 唐中 唐恩洁 朱道银 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期420-423,共4页
目的在机体水平观察小干扰RNA(siRNA)对HBeAg表达的影响。方法通过尾静脉注射1.5倍的HBV真核表达质粒pHBV1.5建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型,再将其与针对乙型肝炎病毒核心区的siRNA表达载体(psiHBV4)共注射,于注射后第6天取血测HBeA... 目的在机体水平观察小干扰RNA(siRNA)对HBeAg表达的影响。方法通过尾静脉注射1.5倍的HBV真核表达质粒pHBV1.5建立小鼠急性乙型肝炎病毒感染模型,再将其与针对乙型肝炎病毒核心区的siRNA表达载体(psiHBV4)共注射,于注射后第6天取血测HBeAg的表达,并用RT-PCR检测肝组织HBV prec/c mRNA转录子的水平。结果注射后第6天血清中,HBsAg、HBeAg在造模组中高表达。psiHBV4干扰组中HBeAg的表达受到了明显的抑制,与对照组相比有显著差异(P<0.05),RT-PCR显示肝内HBV prec/c mRNA水平亦明显降低,而无关干扰对照组则无相应的干扰作用。结论RNAi能特异,高效的抑制小鼠体内HBeAg的表达,为乙型肝炎的治疗带来了新的希望。 展开更多
关键词 HBEAG 动物模型 基因疗法 RNA干扰
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HBeAg真核表达载体的构建及表达
15
作者 杨健 胡为民 唐恩洁 《川北医学院学报》 CAS 2006年第4期308-311,共4页
目的构建HBeAg真核表达载体,观察其在HeLa细胞的表达。方法用PCR方法从质粒PHBV1.5中扩增乙肝病毒前C/C基因,克隆到pCDNA3.1的EcoRⅠ和BamHⅠ位点,构建HBeAg表达载体,通过酶切、PCR及测序鉴定,并把载体转染HeLa细胞,用RT-PCR、免疫细胞... 目的构建HBeAg真核表达载体,观察其在HeLa细胞的表达。方法用PCR方法从质粒PHBV1.5中扩增乙肝病毒前C/C基因,克隆到pCDNA3.1的EcoRⅠ和BamHⅠ位点,构建HBeAg表达载体,通过酶切、PCR及测序鉴定,并把载体转染HeLa细胞,用RT-PCR、免疫细胞化学、ELISA和MEIA检测其表达。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建HBeAg表达载体,该载体可以在HeLa细胞中表达前C/C蛋白,并可分泌表达HBeAg。结论构建了HBeAg表达载体,为运用RNA干扰技术进行HBeAg的抑制研究奠定基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 乙型肝炎病毒E抗原 RNA干扰
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bcl-2与GM-CSF的LdsRNA对肿瘤细胞生长的抑制作用
16
作者 唐恩洁 杨健 +3 位作者 杜冰 任碧轩 冯莉 李丽 《世界肿瘤杂志》 2005年第1期12-15,48,共5页
目的 探索bcl-2-9GM-CSF的长链dsRNA(Longer doublestrand RNA,LdsRNA)对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法使用体外转录法制备地高辛标记的bcl一2和GM—CSF基因的LdsRNA,转染THP1、HL-60和K562髓系白血病细胞系,分别以MTT法、免疫组化... 目的 探索bcl-2-9GM-CSF的长链dsRNA(Longer doublestrand RNA,LdsRNA)对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法使用体外转录法制备地高辛标记的bcl一2和GM—CSF基因的LdsRNA,转染THP1、HL-60和K562髓系白血病细胞系,分别以MTT法、免疫组化、免疫荧光技术和紫外分光光度计检测细胞LdsRNA转染水平,细胞增殖,特异性bcl-2蛋白表达和细胞总蛋白含量。结果LdsRNA能显著抑制THP1细胞增殖(P<0.05)和蛋白质合成,对HL-60和K562细胞系也有一定的抑制作用。结论LdsRNA能抑制肿瘤细胞的增殖,为以后利用LdsRNA用于肿瘤的治疗奠定一定的理论基础。 展开更多
关键词 肿瘤细胞生长 抑制作用 GM-CSF bcl-2蛋白表达 紫外分光光度计 K562细胞系 HL-60 白血病细胞系 免疫荧光技术 抑制肿瘤细胞 细胞增殖 bcl一2 地高辛标记 体外转录法 RNA转染 总蛋白含量 蛋白质合成 MTT法 免疫组化 理论基础
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RNA干扰在消化道肿瘤基因治疗中的应用
17
作者 张小丽 朱道银 唐恩洁 《中外医疗》 2008年第22期127-128,共2页
消化道肿瘤的恶性度高,发展迅速,治疗困难,病死率高。因而消化道肿瘤的防治始终是医学界面临的重大课题。该类肿瘤的发生、发展涉及原癌基因的激活、抑癌基因的失活及突变,以及凋亡相关基因的异常表达过程,其共同特点是大量基因的过度... 消化道肿瘤的恶性度高,发展迅速,治疗困难,病死率高。因而消化道肿瘤的防治始终是医学界面临的重大课题。该类肿瘤的发生、发展涉及原癌基因的激活、抑癌基因的失活及突变,以及凋亡相关基因的异常表达过程,其共同特点是大量基因的过度表达。RNAi是近几年发展起来的一种特异性抑制基因表达的新方法,通过导入一段与内源基因同源的双链RNA序列,使内源mRNA降解,达到抑制基因表达的目的。RNAi操作的简单性和对靶基因表达抑制的高效性使其成为研究基因功能的有力手段,并能选择性地抑制人类疾病相关基因的表达,为肿瘤等疾病的基因治疗带来新的希望。本文就近年来RNA干扰技术在消化道肿瘤基因治疗研究中的应用作一综述。 展开更多
关键词 RNA干扰 消化道肿瘤 基因治疗
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p27和CyclinE在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其临床意义
18
作者 周洪贵 阳志宁 +2 位作者 任碧清 王琦 唐恩洁 《肿瘤防治杂志》 2003年第5期484-486,共3页
目的 :研究p2 7、CyclinE与卵巢上皮性肿瘤发生及发展的关系。方法 :采用SP免疫组织化学方法检测了 4 0例卵巢恶性上皮肿瘤、6例交界性肿瘤及 18例良性肿瘤中p2 7、CyclinE蛋白的表达情况。结果 :p2 7和CyclinE在良性肿瘤与交界性肿瘤... 目的 :研究p2 7、CyclinE与卵巢上皮性肿瘤发生及发展的关系。方法 :采用SP免疫组织化学方法检测了 4 0例卵巢恶性上皮肿瘤、6例交界性肿瘤及 18例良性肿瘤中p2 7、CyclinE蛋白的表达情况。结果 :p2 7和CyclinE在良性肿瘤与交界性肿瘤中表达差异无显著意义。p2 7在恶性肿瘤中的表达率 (35 0 % )显著低于交界性肿瘤和良性肿瘤表达率 (77 78%、4 6 ) ,P <0 0 1;CyclinE在卵巢上皮恶性肿瘤中的表达率显著高于良性肿瘤及交界性肿瘤 ,P <0 0 1。p2 7和CyclinE蛋白表达与卵巢癌的临床分期、病理分级、淋巴结转移有关。p2 7阴性 CyclinE阳性者 ,其生物学行为极差。结论 :p2 7、CyclinE与卵巢癌的发生及发展密切相关 。 展开更多
关键词 卵巢上皮性肿瘤 病理学 代谢 细胞周期蛋白类 生物合成 免疫组织化学 P27蛋白 CYCLINE蛋白 表达
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膜联蛋白A2在乳腺癌及乳腺纤维腺瘤中的表达及意义
19
作者 李金穗 赵锐 +5 位作者 幸天勇 李敬东 陈果 杨正伟 敬保迁 邓世山 《四川解剖学杂志》 2012年第4期33-36,共4页
目的研究膜联蛋白A2(Annexin II,ANX A2)在乳腺浸润性导管癌和乳腺纤维腺瘤中表达,以探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。方法分别使用免疫组织化学染色(SP)法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测乳腺浸润性导管癌和乳腺纤维腺瘤中ANX A2... 目的研究膜联蛋白A2(Annexin II,ANX A2)在乳腺浸润性导管癌和乳腺纤维腺瘤中表达,以探讨其在乳腺癌发生发展中的作用。方法分别使用免疫组织化学染色(SP)法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测乳腺浸润性导管癌和乳腺纤维腺瘤中ANX A2的蛋白表达水平和mRNA表达水平,并分析其在不同病理分级、临床分期及有无淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌组织中的表达情况。结果免疫组化结果显示乳腺浸润性导管癌组织中ANX A2表达高于乳腺纤维腺瘤(P<0.05),RT-PCR结果也显示乳腺浸润性导管癌中ANX A2mRNA的表达高于乳腺纤维腺瘤(P<0.05)。乳腺癌中ANX A2的表达与年龄、病理分级、临床分期和淋巴结转移呈正相关。结论乳腺浸润性导管癌中annexinA2表达明显高于乳腺纤维腺瘤,annexinA2可能是乳腺癌的生物学标记物之一,其在乳腺癌的发生发展中可能扮演重要的角色。 展开更多
关键词 乳腺浸润性导管癌 膜联蛋白A2 免疫组化染色法 逆转录聚合酶链反应法
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HBeAg融合表达载体的构建及表达
20
作者 杨健 唐恩洁 朱道银 《世界感染杂志》 2006年第1期22-25,共4页
目的构建HBeAg融合表达载体,并探讨其在HepG2细胞的表达。方法采用PCR的方法从质粒PHBV1.5中扩增乙型肝炎病毒前C/C基因,克隆到pEC3FP-C1的多克隆位点区EcoRⅠ和BamHⅠ位点,构建HBeAg融合表达载体,通过酶切、PCR及测序鉴定,并把... 目的构建HBeAg融合表达载体,并探讨其在HepG2细胞的表达。方法采用PCR的方法从质粒PHBV1.5中扩增乙型肝炎病毒前C/C基因,克隆到pEC3FP-C1的多克隆位点区EcoRⅠ和BamHⅠ位点,构建HBeAg融合表达载体,通过酶切、PCR及测序鉴定,并把质粒转染HepG2细胞,用荧光显微镜、RT-PCR、免疫组化、ELISA检测融合蛋白的表达。结果通过酶切、PCR及测序鉴定,成功构建了HBeAg融合表达载体,并且该载体可以在HepG2细胞胞浆中表达融合蛋白。结论成功构建了乙肝病毒HBeAg融合表达载体,为以后用RNAi进行HBeAg的抑制研究奠定基础。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 RNAI HBEAG
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