rh-Endostatin与肿瘤血管正常化时相的关系初探

目的肿瘤血管生成和抗肿瘤血管药物均存在一定的时间窗,在该时间窗内,肿瘤新生血管形态结构趋于正常,抗肿瘤效果最佳。因此本研究评估重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,rh-ES)对小鼠Lewis肺癌(Lewis lung carcinoma,LLC)皮下移植瘤模型肿瘤微血管正常化的最佳时间及其分子机制。方法将40只LLC移植瘤模型小鼠随机分成NS组和rh-ES组,每组各20只。NS组小鼠腹腔注射生理盐水(0.2 mL/d);rh-ES组小鼠腹腔注射rh-ES〔5mg/(kg·d)〕。每组分别于治疗后的第2、4、6、9天处死5只小鼠留取标本。测量小鼠肿瘤体积变化,绘制肿瘤生长曲线。同时,ELISA方法检测肿瘤血管重构相关指标,G蛋白调节信号5(regulator of G-protein signaling 5,RGS5)、免疫组化检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和微血管密度(microvessel density,MVD)。结果成功建立C57/BL6小鼠移植瘤模型,成瘤率为100%。rh-ES组第4和6天的肿瘤体积分别是(0.81±0.1)cm3和(1.54±0.4)cm3,NS组第4和6天的肿瘤体积分别是(1.71±0.2)cm3和(2.86±0.4)cm3,差异有统计学意义,P值分别是0.04和0.03。ELISA结果显示,rh-ES组肿瘤组织中RGS5的表达在治疗第4和6天分别是(4.02±0.68)ng/mL和(2.98±0.46)ng/mL,与NS组比较明显降低,P值分别是0.01和0.02。免疫组化结果表明,NS组第4和6天VEGF在肿瘤组织表达率分别为(44.10±4.14)%和(45.13±4.28)%,rh-ES组分别为(27.16±3.68)%和(25.08±3.08)%(n=5),rh-ES组VEGF表达率明显减少,P值分别是0.03和0.02。NS组第4和6天MVD分别为25.10±5.28和25.68±5.64,rh-ES组MVD分别为15.50±3.12和8.36±2.04,rh-ES组明显减少,P值分别是0.04和0.03。结论 rh-ES作用于Lewis肺癌后第4和6天可作为血管正常化时间窗,可能与VEGF和MVD相关。

Rh-Endostatin作用肺癌血管正常化时相与CA9表达的关系初探

目的初步探索重组人血管内皮抑素(rh-Endostatin,rh-ES)作用于肺癌的血管正常化时相与CA9的关系,以及CA9在肺癌中的表达水平。方法收集对数生长期的Lewis细胞,制成1×106 mL-1的单细胞悬液,注射入40只C57/BL6小鼠(0.2mL/只),建立Lewis肺癌皮下移植瘤(LLC)模型,然后随机分成对照组和rh-ES组,各20只。rh-ES组小鼠腹腔注射rh-ES 5 mg/(kg·d),9d,1次/d。对照组小鼠同时点腹腔注射生理盐水(NS)0.2mL/次。于治疗第2、4、6、9天,每组各处死5只小鼠。免疫组化检测肿瘤组织和癌旁组织中CA9表达,Real-time PCR及ELISA技术分别检测两组不同时间点肿瘤组织中CA9表达。结果 C57/BL6小鼠成瘤率为100%。同时,对照组不同时间点CA9在肿瘤组织中表达均高于癌旁组织(P<0.05)。Real-time PCR及ELISA发现在LLC移植瘤模型中CA9基因和蛋白表达在rh-ES组给药后第4天和第6天(血管正常化时相)降低,与同组第2天、第9天比较,差异有统计学意义(P<0.05),与对照组第4天和第6天比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CA9在肿瘤组织中高表达。rh-ES可于血管正常化时间段内降低CA9表达,逆转Lewis肺癌乏氧。