miRNA-675-5p与食管鳞癌上皮间质转化的相关性研究

目的探讨miRNA-675-5p表达水平与食管鳞癌(ESCC)上皮间质转化(EMT)的相关性。方法采用实时定量PCR技术检测miRNA-675-5p在ESCC组织及配对癌旁正常组织中的表达差异,并分析其表达水平与患者临床分期的相关性。脂质体转染ECA109细胞,分为miR-675-recursor组、miR-675-5p-inhibition组和NC组,上调及抑制miRNA-675-5p表达水平,分析改变目的基因表达后对ECA109细胞株迁移侵袭能力的影响,蛋白印迹实验检测干扰表达每组细胞中EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达水平,评估其对ECA109株EMT过程的影响。结果与癌旁正常组织比较,miRNA-675-5p在ESCC组织中表达显著升高(P<0.05),不同分期患者miRNA-675-5p表达比较,差异有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,miR-675-recursor组细胞迁移侵袭能力明显增强,miR-675-5p-inhibition组细胞迁移侵袭能力受到显著抑制(P<0.05)。此外,与NC组比较,miR-675-recursor组E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin、Vimentin蛋白表达升高;miR-675-5p-inhibition组E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P<0.05)。结论miRNA-675-5p表达与ESCC患者TNM分期相关,miR-675-5p能促进ESCC细胞间质转化从而增强侵袭能力;下调表达能逆转ESCC细胞EMT过程,降低迁移侵袭能力。

色素上皮衍生因子联合5-氟尿嘧啶抑制结肠癌细胞凋亡和血管生成的作用研究

目的:探讨色素上皮衍生因子(PEDF)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对结肠癌CT26细胞的抑制作用以及对荷瘤小鼠模型的治疗效果。方法:将体外培养的CT26细胞分为对照组、5-FU组和PEDF+5-FU组3组,分别加入PBS、5-FU和PEDF+5-FU处理CT26细胞。通过细胞划痕实验和Transwell小室检测CT26细胞迁移能力。建立CT26荷瘤小鼠模型,将24只荷瘤模型小鼠随机分为对照组、5-FU组和PEDF+5-FU组,每组8只。用相应药物给药干预,共给药3次,20 d后处死小鼠测量肿瘤体积。通过CD31免疫荧光染色检测肿瘤组织内的微血管密度,TUNEL染色观察肿瘤细胞凋亡情况。结果:与对照组比较,5-FU组和PEDF+5-FU组CT26细胞迁移率显著下降,CD31表达明显下调,肿瘤细胞的凋亡率明显提高(均P<0.05);与5-FU组相比,PEDF+5-FU组CT26细胞迁移率显著下降,CD31表达明显下调,肿瘤细胞凋亡率明显提高(P<0.05)。与对照组相比,5-FU组和PEDF+5-FU组肿瘤体积显著减小(均P<0.05),PEDF+5-FU组肿瘤体积小于5-FU组(P<0.05)。结论:PEDF和5-FU联合用药可以对CT26结肠癌细胞起到协同治疗的目的,且治疗效果优于5-FU单独治疗效果。