软骨脱细胞基质-Ⅱ型胶原纳米支架复合BMSC修复兔关节软骨缺损的实验研究

目的观察软骨脱细胞基质(Cartilage acellular extracellular matrix,CAEM)-Ⅱ型胶原(CollagenⅡ,COLⅡ)纳米支架,复合骨髓基质干细胞(Bone marrow stem cells,BMSCs)修复兔关节软骨缺损的效果。方法 CAEM和COLⅡ按质量比1∶1混合,通过静电纺丝技术制备组织工程纳米支架。将第二代BMSCs种植到该支架上,培养箱内静置2 h。12只日本大耳白兔随机分为实验组和对照组,将细胞支架复合物植入实验组兔膝关节软骨缺损处,对照组仅行膝关节软骨缺损建模。12周后实验动物取材,大体观察修复效果,并行HE染色、Ⅱ型胶原染色观察。结果大体观察见实验组软骨缺损修复良好,对照组软骨缺损处由肉芽样组织充填。HE染色显示,实验组关节软骨缺损处可见软骨陷窝形成,对照组关节软骨缺损处仅有纤维组织充填。实验组修复区Ⅱ型胶原染色为阳性,对照组为阴性。结论 CAEM-COLⅡ纳米支架复合BMSC,对兔关节软骨缺损具有较好的修复能力,具有潜在的临床应用价值。

Ⅱ型胶原-透明质酸构建组织工程软骨复合三维纳米支架的体外实验研究

目的探讨Ⅱ型胶原-透明质酸（hyaluronic acid，HA）构建软骨组织工程复合三维纳米支架的可行性。 方法将Ⅱ型胶原和HA以8∶1（W∶W）比例溶于三氟乙醇和水按1∶1（V∶V）比例混合的溶剂中制成溶液，通过静电纺丝技术制备三维多孔纳米支架材料，通过光镜和扫描电镜观察其表面形貌，测定其孔隙率、吸水率、表面接触角和降解率。取1周龄日本大耳兔肋软骨，采用酶消化法制备软骨细胞。取第2代软骨细胞种植于支架上，用细胞计数试剂盒8（cell counting kit 8，CCK-8）评价其细胞黏附性及增殖情况；细胞-支架复合物体外连续培养2周后，行组织学和免疫组织化学染色观察其生物学形态及细胞外基质（extracellular matrix，ECM）分泌情况。 结果以最佳电纺液浓度为10%、接收距离为10 cm、纺丝注射速度为5 mL/h电纺获得的支架材料，光镜及扫描电镜观察示其孔隙均匀，纳米纤维直径均匀（300～600 nm），孔隙率为89.5% ± 25.0%，表面接触角为（35.6 ± 3.4）°，24 h内支架吸水率可达1 120% ± 34%，48 d内支架降解率可达42.24% ± 1.51%。CCK-8检测结果显示，培养12 h细胞在支架上黏附率可达169.14% ± 11.26%，培养7 d时细胞存活率可达126.03% ± 4.54%。组织学和免疫组织化学染色示，细胞在支架上黏附增殖情况良好，可分泌ECM；细胞在支架上培养2周后，有类似于软骨陷窝的结构形成。 结论以Ⅱ型胶原-HA制备的复合三维纳米支架材料具有良好的物理性能、生物学性能和促进细胞黏附及增殖的能力，是一种良好的组织工程软骨支架材 料。

改良手术切除法治疗睑黄瘤

早期我们用单纯手术切除法治疗睑黄瘤，有个别病例要求同时行重睑成形，术中发现睑黄瘤病损区的眶隔后脂肪较其他重睑成形者有异常增生现象，切除眶隔后异常增生脂肪者，睑黄瘤无复发。于是我们进行了改良手术切除法治疗睑黄瘤的研究，自1993年5月至2008年11月用改良手术切除法治疗睑黄瘤278例，取得了良好的美容效果，现报告如下。