期刊文献+
共找到1篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
NF2/YAP信号通路通过FSP1诱导CD24高表达的三阴性乳腺癌细胞铁死亡
1
作者 蒲卢兰 李静佳 +4 位作者 陈宇 周瑜清 荣欣欣 侯令密 周方方 《中华乳腺病杂志(电子版)》 CAS CSCD 2024年第4期206-211,共6页
目的研究NF2和YAP表达对CD24高表达的三阴性乳腺癌细胞铁死亡的影响,探讨铁死亡的相关分子机制。方法培养CD24^(high)和CD24^(low)MDA-MB-231细胞,通过台盼蓝染色(TBA)实验检测经半胱氨酸饥饿、铁死亡诱导剂Erastin和RSL3处理后细胞的... 目的研究NF2和YAP表达对CD24高表达的三阴性乳腺癌细胞铁死亡的影响,探讨铁死亡的相关分子机制。方法培养CD24^(high)和CD24^(low)MDA-MB-231细胞,通过台盼蓝染色(TBA)实验检测经半胱氨酸饥饿、铁死亡诱导剂Erastin和RSL3处理后细胞的死亡情况,TBA法检测丙二醛(MDA)含量,分析细胞铁死亡水平。使用Western blot检测NF2和YAP在CD24^(high)和CD24^(low)MDA-MB-231细胞中的蛋白表达情况,并用慢病毒分别进行敲除和过表达,观察细胞铁死亡水平,并采用实时定量RT-PCR和Western blot检测成纤维细胞特异蛋白1(FSP1)的表达变化。结果经半胱氨酸饥饿、铁死亡诱导剂Erastin和RSL3分别处理后MDA-MB-231细胞死亡率增加,CD24^(low)细胞死亡率高于CD24^(high)细胞(t=14.548,P<0.001;t=8.310,P=0.001;t=8.600,P=0.001)。同时,TBA法结果显示,在含或不含半胱氨酸条件下,CD24^(high)和CD24^(low)MDA-MB-231细胞的MDA含量差异有统计学意义(t=-3.920,P=0.017;t=11.566,P<0.001);与对照组(DMSO)相比,CD24^(high)和CD24^(low)细胞经铁死亡诱导剂Erastin和RSL3处理后MDA水平增加,其中CD24^(low)细胞的MDA含量比CD24^(high)更高(t=10.763,P=0.006;t=24.067,P<0.001)。Western blot实验结果表明,NF2与YAP在CD24^(low)和CD24^(high)细胞的蛋白含量差异有统计学意义(t=-4.331,P=0.012;t=4.219,P=0.013),CD24^(low)细胞中YAP的蛋白表达更高(t=4.219,P=0.013),而CD24^(high)细胞中NF2的蛋白表达更高(t=-4.331,P=0.012)。在CD24^(high)MDA-MB-231细胞中构建NF2敲除或(和)YAP过表达细胞株,并用实时定量RT-PCR和Western blot检测,结果显示铁死亡关键蛋白FSP1在4组间的表达差异有统计学意义(F=30.297,P<0.001)。同时,检测NF2敲除或(和)YAP过表达后CD24^(high)MDA-MB-231细胞的铁死亡情况,结果表明敲除NF2或(和)过表达YAP后加入铁死亡诱导剂Erastin均可在一定程度上促进细胞死亡(F=38.911,P<0.050),其中在NF2敲除联合YAP过表达条件下,CD24^(high)MDA-MB-231细胞死亡率最高,而在Erastin的基础上添加铁死亡抑制剂Fer-1后细胞的死亡率下降,4组间比较差异无统计学意义(F=0.256,P=0.855)。结论在CD24高表达的三阴性乳腺癌细胞中敲除NF2联合过表达YAP会抑制FSP1表达,促进细胞铁死亡。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 铁死亡 成纤维细胞特异蛋白1 NF2 YAP
原文传递
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部