微生物菌种选育中的基因组改组技术及其应用进展

该文论述了基因组改组技术的产生和原理、方法和特点,以及该技术的应用、意义及其发展前景。基因组改组技术是首先对微生物菌株进行诱变,筛选出正向突变的菌株,然后通过原生质体"递推式融合"使这些正向突变的若干个菌株进行基因组重组,从中筛选出符合育种要求的重组子,从而在短时间内获得性状得到大幅度提高的菌株。

微生物燃料电池阳极材料对微生物胞外电子传递效率的影响

微生物燃料电池(microbial fuel cell,简称MFC)是以阳极的微生物为催化剂,直接将化学能转化为电能的生物反应器装置。该文对影响微生物燃料电池产电效率的胞外电子传递、内阻,以及阳极材料改性进行了概述,并提出MFC应用中存在的问题和研究方向。

青霉素酰化酶表达调控的研究进展

青霉素酰化酶(penicillin acylase,PAC)是抗生素工业的重要酶。它在大肠杆菌中需经过复杂的转录、翻译和后翻译才能成熟,且后翻译过程对活性酶的最终形成影响很大。在阐述PAC的苯乙酸诱导机制的基础上,详细论述了PAC的后翻译过程,并对几种主要的影响因素进行了分析。

液体静置发酵生产茯苓多糖条件的研究

茯苓是我国一种具有悠久药用历史的传统中药,茯苓多糖具有免疫调节及抗肿瘤等多种药理功能。本实验探究一种新的液体深层培养与静置培养相结合的液体静置发酵法生产茯苓多糖,对最适液体培养时间和静置培养时间进行研究。发现最适静置前液体培养时间为3 d,最适静置培养时间为10 d,胞内多糖含量达到9.8 g/100gCDW,产量达到1.28 g/L,可见液体静置发酵是一种生产茯苓多糖的理想方法。

细菌芳香聚酮研究进展

鉴于芳香聚酮化合物在抗菌、抗肿瘤、抗病毒等方面具有重要的临床药用价值,该文综述了细菌芳香聚酮化合物及其生物合成研究的主要进展,重点讨论了四类芳香聚酮的生物活性和化学结构以及芳香聚酮生物合成机理研究的基础理论意义。在此基础上对组合生物合成新的具有一定生物活性化合物的研究前景进行了展望。

新型微生物脂肪酶资源开发

微生物脂肪酶是一类重要的工业生物催化剂,广泛应用于工农业生产的诸多领域。筛选、挖掘和开发出具有新型催化活性或高稳定性的微生物脂肪酶一直是脂肪酶研究的重点。本文从极端微生物、宏基因组技术、基因组数据库挖掘、定向进化技术、固定化技术和化学修饰技术等方面介绍了当前新型脂肪酶开发的途径和方法。

耐有机溶剂极端微生物的耐受机制及应用

耐有机溶剂微生物是一类新颖的极端微生物,直到20世纪80年代才被系统地研究。它们通过各种耐受机制,有效抵御或降低有机溶剂对其细胞产生的毒害作用。因此,在全细胞催化、环境污染治理等领域,耐有机溶剂极端微生物具有广阔的工业应用前景。此外,深入透彻地了解耐有机溶剂极端微生物的各种耐受机制,有助于利用基因工程技术改造和优化现有耐有机溶剂极端微生物的各种性能,进一步拓展其工业应用领域。本文将从囊泡外排、改变细胞膜磷脂结构和组成等4个方面概述近年来耐有机溶剂极端微生物的耐受机制研究新进展,并介绍它们在全细胞催化等领域的应用。

灰黄霉素高产变株与出发菌株18S rRNA基因序列的比较分析

根据真菌18S rDNA的保守序列设计引物,对灰黄霉素高产突变菌Penicillium griseofulvum F208与出发菌株Penicillium griseofulvum 3.5190的18S rRNA进行克隆测序及对比分析,并登录GenBank(序列号为EF608151和EF607282).依据18S rDNA建立的系统进化树表明突变株F208与出发菌株3.5190的遗传距离较远,而与Penicillium urticae亲缘关系最近.出发菌株3.5190与Penicillium commune亲缘关系最近.18SrDNA作为分子标记可有效地鉴别灰黄霉素产生菌(Penicillium griseofulvum)高产与低产菌株.

环孢菌素A产生菌的分子鉴定及其原生质体制备

环孢菌素A高产菌株No.421502经形态学特征和分子标记鉴定,确认为镰孢菌属,命名为Fusariumsp.No.421502.收集Fusarium sp.No.421502孢子刚萌发的幼嫩菌丝体,以0.7 mol/L KCl为渗透压稳定剂,用质量浓度为20 mg/mL的蜗牛酶,30℃80 r/min处理5 h制备原生质体.原生质体为7×105/mL,原生质体形成率为62.8%.制备的原生质体稀释后接入再生培养基,再生率为29.6%.

宠物犬肠道可培养细菌耐药性种类及其分布

为探明宠物犬肠道微生物携带抗生素耐药性的流行病学及阐释饲养动物中微生物抗性与人病原微生物抗性基因的关系。采用细菌分离培养鉴定以及影印平板技术对宠物犬肠道可培养肠杆菌携带的耐药性及其种类、多样性和生态分布进行了调查。结果表明:宠物犬肠道可培养细菌具有较高的耐药性比例和多重耐药性。其中大肠杆菌对氨苄西林、磺胺类药物、氯霉素、链霉素和四环素等较早使用的药物耐药率较高,反而对进入临床时间较短的头孢菌素类药物相对较敏感。在调查的细菌中几乎所有的细菌至少有1种抗生素抗性,可分离的肠道细菌中一半以上具有5种以上的抗生素抗性。综上所述,肠道微生物抗性的产生与抗生素的使用时间紧密相关,并且宠物犬肠道可培养细菌的抗性广泛分布,表明宠物很可能成为耐药性基因在环境和人类病原细菌间传播的潜在途径。

碳源对卷枝毛霉EIM-10 γ-亚麻酸产量的影响

目的:研究碳源对卷枝毛霉脂肪酸产量的影响,为代谢调控卷枝毛霉生产γ-亚麻酸奠定基础。方法:测定卷枝毛霉在各种碳源、碳源浓度及碳氮比条件下生物量、油质产量及油脂中GLA含量。结果:卷枝毛霉EIM-10在以葡萄糖为碳源发酵时,油脂得率为2%,油脂中γ-亚麻酸含量为18%;以大豆油为碳源时,其生物量(干重)达到33g/L,油脂占菌丝体干重的35%,GLA的含量为3%。卷枝毛霉EIM-10不能利用醋酸和柠檬酸,可以利用醋酸钠和柠檬酸钠生长但不积累油脂。结论:卷枝毛霉EIM-10脂肪酸从头合成能力不强,能利用外界脂肪酸合成细胞内油脂。

脂肪酶降解马尾松TMP浆中的三酰甘油酯类物质

Burkholderiasp.ZYB002脂肪酶能有效降解马尾松TMP浆中的三酰甘油酯。实验优化了酶学降解工艺条件:浆浓6%,酶用量20 U/g绝干浆,纸浆pH值7.5,65℃下处理30 min。在此工艺条件下,TMP浆中39%的三酰甘油酯可以被分解。

不同地区森林土壤降解天然木质纤维素能力的分析评价

目的:分析不同地区森林土壤样品的木质纤维素分解能力,为分离和挖掘新的土壤木质纤维素分解酶系及微生物奠定基础。方法:测定来源于不同气候类型和植被的土壤样品的纤维素酶和木聚糖酶活性的变化以及对天然木质纤维素的降解能力。结果:土壤样品具有较高的初始木聚糖酶活,相反许多样品的纤维素酶活未测到。富集后,除个别样品酶活性稍有下降之外其余均明显提高,其中木聚糖酶活增长最多达118.58u.g-1,纤维素酶活涨幅最多达110.00u.g-1。各样品木质纤维素的降解量从24.4mg到93.1mg不等,降解效率最高55.35%。结论:来源于不同气候条件和不同类型土壤样品在天然木质纤维素降解能力以及相关的纤维素酶和木聚糖酶活性上表现出了广泛的多样性差异。

洋葱伯克霍尔德菌外膜蛋白双向电泳的建立与优化

目的:洋葱伯克霍尔德菌外膜蛋白的分离及双向电泳图谱的建立和优化。方法:用月桂酰基氨酸钠法提取外膜蛋白,以固相pH梯度为第一向和SDS-PAGE为第二向进行双向电泳,对裂解液成分,IPG胶条的pH和凝胶染色方法等进行优化。结果:获得外膜蛋白浓度为2.87μg/μl;最佳裂解液成分为:7mol/L尿素,2mol/L硫脲,4%Chaps,2%pharmalyte,65mmol/LDTT,0.5%TritonX-100,10mmol/LTris。结论:提取的外膜蛋白满足双向电泳条件;获得理想的外膜蛋白双向电泳图谱用于后续实验中。

半导体激光辐照对拟微绿球藻的生物学效应

目的:研究半导体激光对拟微绿球藻的生物学效应,进而利用激光诱变筛选高产优质藻株。方法:采用半导体激光辐照拟微绿球藻,辐照时间为10min、20min、30min。结果:诱变后藻的代谢物产量均有提高。结论:10min、20min、30min辐照条件下,对拟微绿球藻细胞生长及代谢产物均有不同程度的促进作用,其中10min辐照组有利于拟微绿球藻的生长及色素的积累,分别比对照组提高了45.06%、86.59%、56.06%;但在20min剂量下更有利于胞外多糖、总多糖、蛋白质及油脂含量的积累,分别比对照组提高了67.7%、51.89%、19.16%、69.78%。

古尼拟青霉液体发酵液有机粗提物产量的研究

目的:培养基成分对古尼拟青霉液体发酵液有机粗提物产量的影响。方法:采用正交设计方法,考察古尼拟青霉液体发酵培养基3种组分马铃薯、葡萄糖和蛋白胨对其菌丝体与发酵液有机粗提物量的影响。结果:在马铃薯300g/L,蛋白胨8g/L,葡萄糖30g/L时,古尼拟青霉液体发酵液有机粗提物产量可达到136.3mg/L。结论:培养基成分对古尼拟青霉液体发酵有机粗提物产量有显著影响,该文结果对指导古尼拟青霉液体的深层发酵具有参考价值。

提高蛋白质在米曲霉中表达量的策略

米曲霉是一种重要的微生物,在食品、酿造、商业酶和医用蛋白的生产中具有广泛的应用,该菌被美国食品与药品管理局(FDA)认定为GRAS(generally regarded as safe)级。讨论了提高同源和异源蛋白在米曲霉中表达量的几种策略,包括使用强启动子、多拷贝编码基因、优化培养基和超表达血红素结构域(HBD)等。异源蛋白容易被米曲霉蛋白酶降解,表达量往往较低,因此使用蛋白酶缺陷型宿主菌是非常必要的。另外将外源蛋白与米曲霉高分泌蛋白融合表达也是提高异源蛋白产量的有效途径。