基质金属蛋白酶14通过促进CD100脱落增强急性B淋巴细胞白血病患者单核细胞功能

目的 检测不同活性形式的CD100在急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者中的表达,观察基质金属蛋白酶14(MMP14)对CD100的表达调控及对B-ALL患者单核细胞功能的影响。方法 入组44例B-ALL患者和22例对照者,采集外周血并分离血浆和外周血单个核细胞(PBMCs),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆MMP14和可溶型CD100(sCD100)水平,流式细胞术检测CD14+单核细胞中膜结合型CD100(m CD100)水平。使用磁珠分离法分选CD14+单核细胞,使用脂多糖刺激培养;反转录实时定量PCR法检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)和Fas配体(FasL)mRNA相对表达量;ELISA法检测颗粒酶A、颗粒酶B、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6水平;比较B-ALL患者和对照者单核细胞功能差异。使用重组人MMP14刺激B-ALL患者纯化的单核细胞,加入抗CD72抗体,通过检测TRAIL和FasL mRNA相对表达量以及颗粒酶A、颗粒酶B、IFN-γ、IL-1β、IL-6水平变化评估MMP14对单核细胞功能影响。结果 B-ALL患者MMP14水平低于对照者(P<0.05),sCD100水平亦显著低于对照者(P<0.05);B-ALL患者单核细胞中mCD100阳性的比例高于对照者(P<0.05),mCD100平均荧光强度(MFI)亦高于对照者(P<0.0001);B-ALL患者单核细胞中TRAIL和FasL mRNA相对表达量均低于对照者(P<0.05),B-ALL患者单核细胞分泌颗粒酶A、颗粒酶B、IFN-γ、IL-1β、IL-6均低于对照者(P<0.05)。重组MMP14刺激培养可诱导B-ALL患者单核细胞培养上清中s CD100水平升高(P<0.005),而mCD100细胞比例和mCD100 MFI则降低(P<0.05)。重组MMP14刺激可促进B-ALL患者单核细胞中TRAIL和FasL m RNA表达(P<0.05),增加颗粒酶A和颗粒酶B分泌水平(P<0.05),但对IFN-γ、IL-1β和IL-6分泌无明显影响(P>0.05)。阻断CD72不影响MMP14介导B-ALL患者单核细胞分泌颗粒酶A、颗粒酶B水平升高(P>0.05)。结论 B-ALL患者中存在sCD100和mCD100表达失衡,单核细胞功能不全。MMP14可通过诱导mCD100脱落增强B-ALL患者单核细胞功能。

Notch-芳香烃受体-白细胞介素-22通路在急性特发性血小板减少性紫癜中的作用

目的观察Notch信号通路对特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)患者CD4+T淋巴细胞分泌白细胞介素(interleukin-22,IL-22)的影响,初步阐释Notch-IL-22通路在ITP发病中的作用。方法收集2015年11月至2018年1月在我科就诊的急性ITP患者31例和慢性ITP患者36例,另收集14例健康志愿者作为健康对照者。分离外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)和血浆,分选急性ITP患者CD4+T细胞,加入Notch信号通路抑制剂GSI刺激培养,应用实时定量PCR法检测Notch受体和Notch信号通路相关分子mRNA的相对表达量,应用流式细胞术检测CD3+CD4+IL-22+的Th22细胞比例,应用酶联免疫吸附试验检测血浆和培养上清中的IL-22水平,应用CCK-8法检测细胞增殖,应用Western blot检测Notch信号通路相关分子蛋白和磷酸化的水平。结果急性ITP患者Notch1、Notch2、Notch3 mRNA相对表达量显著高于健康对照者和慢性ITP患者(P<0.0001),但Notch受体mRNA在健康对照者和慢性ITP患者中的差异无统计学意义(P>0.05)。Th22细胞在健康对照者、急性ITP和慢性ITP患者中的比例分别为(2.00±0.15)%、(6.77±1.12)%、(2.27±0.24)%,急性和慢性ITP患者Th22细胞比例显著高于健康对照者(P<0.001),健康对照者、急性ITP和慢性ITP患者血浆IL-22的水平分别为(100.3±19.53)pg·ml^-1、(291.4±95.59)pg·ml^-1、(109.6±16.32)pg·ml^-1,急性ITP患者血浆IL-22水平显著高于健康对照者和慢性ITP患者。抑制Notch信号通路不影响CD4+T细胞增殖,但可降低急性ITP患者CD4+T细胞中Th22细胞的比例和IL-22的表达,这一过程伴随芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)m RNA表达抑制和核因子-κB的磷酸化水平降低。结论Notch信号通路可通过AhR调控急性ITP患者CD4^+T细胞分泌IL-22,Notch-AhR-IL-22通路可能参与了急性ITP的发病。

联合化疗(FOLFOX4)方案治疗晚期结直肠癌患者的临床疗效

目的:联合化疗(FOLFOX4)方案,治疗晚期结直肠癌患者的疗效和毒副反应的观察。方法:21例晚期结直肠癌患者给予联合化疗方案,即:第1d给予,草酸铂(L-OHP)85 mg/m2静脉点滴3 h,亚叶酸钙(CF)200 mg/m2静脉点滴2 h,5-氟尿嘧啶(5-FU)400 mg/m2静脉推注,5-氟尿嘧啶600 mg/m2微泵持续22 h静滴。第2 d给予,亚叶酸钙200 mg/m2静脉点滴2 h,5-氟尿嘧啶400 mg/m2静脉推注,5-氟尿嘧啶600 mg/m2微泵持续22 h静滴。3周为1个周期,完成2个周期评价疗效和毒副反应。结果:21例患者中完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)8例,总有效率42.9%。毒副反应主要是末梢神经异常、胃肠道反应(恶心/呕吐、腹泻)和骨髓抑制等。结论:联合化疗(FOLFOX4)方案治疗晚期结直肠癌患者疗效好、毒副反应可以耐受。

A20对急性B淋巴细胞白血病患者T淋巴细胞增殖、分化和杀伤功能的调控作用

目的观察急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者A20水平,分析抑制A20表达对B-ALL患者T淋巴细胞活性的调控作用。方法收集2019年7月至2021年6月在我院就诊的B-ALL患者37例和健康对照者20例。分离外周血单个核细胞,分选CD4~+T细胞和CD8~+T细胞,流式细胞术和实时定量PCR检测A20表达。使用A20小干扰RNA(siRNA)转染B-ALL患者CD4~+T细胞和CD8~+T细胞,实时定量PCR检测CD4~+T细胞中转录因子表达,酶联斑点吸附试验检测CD8~+T细胞分泌穿孔素和颗粒酶B水平,酶联免疫吸附试验检测培养上清中细胞因子水平。组间比较使用t检验或单因素方差分析。结果B-ALL组CD4~+T细胞和CD8~+T细胞中A20~+细胞百分比、A20平均荧光强度、A20 mRNA表达均高于对照组(P<0.05);B-ALL患者CD4~+T细胞中Th1转录因子T-bet mRNA和CD8~+T细胞中穿孔素、颗粒酶BmRNA均低于对照组(P<0.05),与A20 mRNA表达呈显著正相关(P<0.05)。A20 siRNA转染不影响细胞增殖,但可增加核因子-κB p65磷酸化。A20 siRNA转染B-ALL患者CD4~+T细胞后,T-bet mRNA和分泌干扰素-γ(IFN-γ)、维甲酸相关孤独核受体γt和分泌白细胞介素-17A(IL-17A)、芳香烃受体和分泌IL-22水平较对照siRNA转染、未转染细胞均升高(P<0.05)。A20 siRNA转染B-ALL患者CD8~+T细胞后,穿孔素、颗粒酶B、IFN-γ、肿瘤坏死因子-α分泌水平较对照siRNA转染、未转染细胞均升高(P<0.05),但免疫检查点受体(PD-1、CTLA-4、TIM-3)mRNA在CD8~+T细胞中的表达水平在A20 siRNA转染、对照siRNA转染和未转染细胞中的差异无统计学意义(P>0.05)。结论B-ALL患者T细胞中A20水平升高,可能抑制T细胞活性,诱导B-ALL患者T细胞功能不全。

PBL教学法结合EBM思维在血液内科临床带教中的应用探讨

探究血液内科临床带教使用PBL教学法结合EBM思维的作用。方法:共计纳入 50例血液内科实习生进行分析,时间为2016年1月至2020年1月,采用随机数分组法将实习生分为观察组和对照组,各纳入50例学生,对照组仅采用常规带教模式,观察组给予PBL和EBM思维联合带教模式,统计对比组间学生的考试结果和各项学习能力评分。结果:观察组的考试评分明显高于对照组,差异显著(p<0.01);观察组在各项学习能力评分中明显高于对照组,差异显著(p<0.01)。结论:通过PBL教学和EBM思维的联合带教模式进行教学,可显著提升学生对临床理论和操作的理解,同时作用于学生的各项学习能力中,效果显著,值得广泛推广。

多元化教学方法在血液内科临床实习带教中的应用效果分析

分析血液内科实习带教中采用多元化教学的效果。方法:纳入共计60例血液内科实习生进行分析,时间为2016年1月至2020年1月,采用随机数分组法将所有实习生分为对照和观察组,对照组(30例)使用传统带教模式,观察组(30例)使用多元化带教模式,统计对比组间实习生的考试分数以及实习生对带教模式的满意度。结果:观察组实习生的考试分数明显高于对照组,差异显著(p<0.05);观察组实习生的满意度明显高于对照组,差异有统计学意义(p<0.05)。结论:采用多元化带教模式对血液内科实习生进行培训,可促使学生在理论以及操作方面取得进一步提升,掌握科室知识。该模式可显著提升科室人才的素质培养,值得广泛推广。

骨髓受累且无皮损表现的母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤1例治疗体会

原发性骨髓母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤(lastic lasmacytoid endritic ell eoplasm,BPDCN)是一种罕见的有高度侵袭性的血液系统恶性肿瘤,典型BPDCN常以皮损为首发症状,常常累及淋巴结、骨髓、中枢神经系统和其他软组织等,对化学治疗和放射治疗均不敏感,预后极差。2020年8月28日巴彦淖尔市医院收治1例以腹痛、贫血、肝脾肿大为首发表现,缺乏典型皮损症状的患者,经过骨髓形态、流式细胞免疫分型及骨髓活检检查,最终诊断BPDCN。通过对呈现无皮损表现的罕见BPDCN病例的临床资料分析,为临床医师对该病的识别及治疗提供参考。