南京医科大学第一附属医院2014年临床常见革兰阴性菌分布及耐药分析

目的分析南京医科大学第一附属医院2014年临床分离革兰阴性菌的分布及其对常用抗菌药物的耐药性。方法细菌鉴定采用API系统或VITEK-2 Compact自动鉴定仪;细菌药物敏感试验采用纸片扩散法(K-B法)或稀释法;数据统计分析用WHONET 5.6软件。结果 2014年共分离出各类细菌共7 931株,其中革兰阴性菌5 088株,占64.2%,排名前3位的是大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌和肺炎克雷伯菌。共分离耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌195株,占肠杆菌科的6.9%;多重耐药鲍曼不动杆菌613株,占鲍曼不动杆菌的66.5%;多重耐药铜绿假单胞菌197株,占铜绿假单胞菌的28.7%。结论 2014年该院革兰阴性菌耐药主要为耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌、多重耐药鲍曼不动杆菌和多重耐药铜绿假单胞菌,进行细菌耐药监测有利于指导临床合理用药。

两所医院铜绿假单胞菌连续分离株16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因研究

目的了解江浙地区两所医院铜绿假单胞菌(PAE)连续分离株的耐药性和16S rRNA甲基化酶、氨基糖苷类修饰酶基因存在情况。方法K-B法检测PAE连续分离株的耐药性,PCR方法检测5种16S rRNA甲基化酶(rmtAr、mtB、rmtC、rmtD、armA)和6种氨基糖苷类修饰酶基因(aac(3)-Ⅰ、aac(3)-Ⅱ、aac(6′)-Ⅰb、aac(6′)-Ⅱ、ant(3″)-Ⅰ、ant(2″)-Ⅰ)。结果两所医院PAE对头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南、美罗培南与阿米卡星药物敏感性A院为74.2%、80.0%、82.9%、68.5%,B院为90.0%、50.0%、50.0%、95.0%;β-内酰胺类药物、环丙沙星、复方新诺明耐药率极高,两所医院PAE均未检出16S rRNA甲基化酶。结论不同医院PAE氨基糖苷类修饰酶基因检出率可不同。

血液透析液检验分析

目的了解医院透析用水、透析液的细菌污染状况。方法对医院反渗水及透析液标本进行细菌培养和菌落计数。结论反渗水12份样品中有3份细菌总数超标,透析液细菌污染较严重。透析液细菌污染主要来源是浓缩B液,由于配制容器消毒不及时导致污染。应定期监测反渗水和透析液的污染情况,并定期消毒。

2008－2010年常州二院临床常见病原菌的分离及细菌耐药性分析

目的对临床标本连续分离细菌进行耐药性监测，为临床用药提供依据。方法采用梅里埃VITEK32进行细菌鉴定和药敏试验，同时采用K—B法补做部分药敏试验，针对3年的细菌进行统计及耐药率分析。结果1181株非重复菌中，革兰阳性菌495株，排列前三位的分别是金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和肠球菌。MRSA（耐甲氧西林金黄色葡萄球菌）和MRCNS（耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌）检出率分别为60．7％，60％，未见万古霉素耐药菌株。革兰阴性菌686株，排列前三位的分别是大肠埃希菌，铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌。大肠埃希菌和克雷伯菌产ESBL阳性率分别为66．9％，37．1％。对革兰阴性菌敏感性较高的为亚安培南（93％）、头孢吡肟（58．6％）、阿米卡星（74．2％）。结论耐甲氧西林葡萄球菌和产ESBL菌检出率较高，定期进行耐药性监测对指导临床用药具有积极意义。

影响临床免疫检验结果的因素

目的分析影响临床免疫检验结果的各种因素，为提高检验结果提供依据。方法选择做临床免疫检验患者100名，根据临床检验过程中有无采用质量控制对策分为实验组和对照组，每组50例。对照组采取常规方法，实验组在检验过程中采取质量控制对策，将两组最终免疫检验结果进行对比分析。结果影响临床免疫检验质量的主要因素包括标本质量、检验环境中的温度和湿度、检验仪器的准确度、检验人员的素质等；检验质量各项指标实验组均好于对照组，差异具有统计学意义（P〈0．01或〈0．05）。结论临床免疫检验过程采取质量控制能够有效地降低多种因素对检验结果造成的影响，从而提高检验质量，为医生的诊治提供有价值的依据。

25-羟维生素D和糖化血红蛋白水平与2型糖尿病外周血管病变的相关性分析

目的探讨25-羟维生素D[25(OH)D]和糖化血红蛋白(Hb A1c)水平与2型糖尿病患者外周血管病变的相关性。方法收集常州市第二人民医院2019年确诊的2型糖尿病患者201例,外周血管病变事件阴性患者77例,外周血管病变事件阳性患者124例。收集患者的一般临床资料,检测患者的Hb A1c、25(OH)D、C肽、血脂、血钙、血磷、尿酸和肌酐等指标,并对患者进行双下肢超声检查。采用Pearson直线相关分析Hb A1c与25(OH)D的相关性;采用独立样本t检验和χ2检验比较两组数据的差异;采用Logistic回归分析外周血管病变的独立危险因素。结果外周血管病变事件阳性组患者的年龄、病程、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和Hb A1c水平高于外周血管病变事件阴性组患者,而C肽、60 min C肽和25(OH)D水平低于外周血管病变事件阴性组患者,差异均有统计学意义(P均<0.05);Pearson分析显示25(OH)D与Hb A1c呈负相关(r=-0.261,P<0.01),与apo AⅠ呈正相关(r=0.146,P<0.05);2型糖尿病患者Hb A1c控制不佳(Hb A1c≥7%),25(OH)D水平越低,越易发生外周血管病变;Logistic回归结果示,年龄、病程、LDL-C和Hb A1c为外周血管病变事件的危险因素。结论2型糖尿病患者年龄、病程、LDL-C、25(OH)D和Hb A1c与外周血管病变事件发生的风险显著相关,患者Hb A1c控制不佳时,维生素D缺乏的患者易发生外周血管病变事件。

血浆D-二聚体与内毒素水平对判断非小细胞肺癌患者预后的意义

目的检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血浆D-二聚体及内毒素水平,探讨其对判断患者预后的意义。方法用胶乳免疫比浊法及动态浊度法分别检测NSCLC患者治疗前后、肺部其他疾病患者和健康人血浆D-二聚体与内毒素水平。对肺癌患者进行随访,分析血浆D-二聚体及内毒素水平与患者预后的关系。结果肺癌患者、肺部其他疾病患者血浆D-二聚体及内毒素含量显著高于健康人(U分别为640.00、789.00与696.50、121.50,P均<0.01),Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者血浆D-二聚体含量显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者(U分别为34.00、60.50,P均<0.01);肺癌患者血浆D-二聚体与内毒素含量呈正相关(r=0.370,P<0.01);肺癌治疗后完全缓解和部分缓解的患者血浆D-二聚体含量较治疗前显著降低(Z分别为-2.58、-2.17,P均<0.05);病情进展的肺癌患者治疗后血浆D-二聚体与内毒素含量明显升高(Z分别为-2.48、-2.19,P均<0.05)。治疗后血浆D-二聚体与内毒素双阳性的患者一年内肿瘤转移或复发的概率显著高于其他(单阳性+双阴性)患者(χ2=5.88,P<0.05);双阳性患者与其他患者的中位生存时间分别是9.25个月与22.39个月,双阳性患者两年生存率显著低于其他患者(χ2=39.64,P<0.01)。结论联合检测NSCLC患者血浆D-二聚体与内毒素含量对评价患者疗效,评估患者预后有一定的意义。

肺癌患者血浆及外周血单个核细胞Lunx mRNA检测的临床意义

目的检测肺癌患者血浆及外周血单个核细胞肺特异性X基因(Lunx)mRNA,探讨两者对肺癌辅助诊断的临床意义。方法采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测肺癌患者、肺良性疾病患者、肺外肿瘤患者及健康人血浆及外周血单个核细胞Lunx mRNA。结果肺癌组患者血浆Lunx mRNA阳性率显著高于肺良性疾病组(χ2=113.10,P<0.01)、肺外肿瘤组(χ2=125.34,P<0.01)和健康组(χ2=100.33,P<0.01);Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者血浆Lunx mRNA阳性率高于Ⅰ、Ⅱ期肺癌患者(χ2=7.07,P<0.05)。肺癌组患者外周血单个核细胞LunxmRNA阳性率显著高于肺良性疾病组(χ2=32.79,P<0.01)、肺外肿瘤组(χ2=44.44,P<0.01)和健康组(χ2=44.44,P<0.01);Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者外周血单个核细胞Lunx mRNA阳性率显著高于Ⅰ、Ⅱ期肺癌患者(χ2=24.52,P<0.01)。血浆Lunx mRNA检测对肺癌辅助诊断的敏感性高于单个核细胞检测的敏感性(χ2=36.46,P<0.01),血浆检测的阴性预测值高于外周血单个核细胞检测的阴性预测值(χ2=16.37,P<0.01)。结论血浆与外周血单个核细胞Lunx mRNA检测均可用于肺癌的辅助诊断,前者敏感性较后者高。

80株大肠埃希菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶基因分析

目的：了解临床分离的80株大肠埃希菌耐药性及氨基糖苷类修饰酶（AMEs）基因的存在状况。方法：采用MH平板法测试14种抗菌药物的敏感性，采用PCR技术检测氨基糖苷类修饰酶基因。结果：80株大肠埃希菌呈现多重耐药，对氨基糖苷类抗生素的耐药率在57．5％-80％之间，氨基糖苷类修饰酶基因aac（3）-I、aac（3）-Ⅱ、aac（6’）-I、ant（3”）-I基因的阳性率分别为20％、30％、32．5％、20％。携带1种或1种以上基因的菌株有65株（81．25％）。结论：临床分离的大肠埃希菌多重耐药严重，氨基糖苷类修饰酶基因携带率较高。

血小板输注无效与抗HLA抗体相关性

目的研究抗HLA抗体与血小板输注无效的关系。方法用流式细胞术检测患者抗HLA抗体,并通过检测输注血小板前后的血小板数量计算出血小板增加校正值(CCI)来分析抗HLA抗体与血小板输注无效的关系。结果25名患者中抗HLA抗体阳性16例,占64%;血小板输注无效16例中,抗HLA抗体阳性15例,阴性1例。抗HLA抗体阳性患者血小板输注无效率显著高于抗HLA抗体阴性患者。结论多次输血患者体内易产生抗血小板抗体,导致血小板输注无效,其中抗HLA抗体是引起血小板输注无效的重要原因之一。

鲍曼不动杆菌的基因分型及其应用

目的运用重复片段引物PCR对鲍曼不动杆菌进行基因分型，了解鲍曼不动杆菌的基因同源性。方法选用肠杆菌科基因问的重复序列（ERIC）为引物进行PCR扩增，对24株鲍曼不动杆菌进行分型，并与药敏结果进行比较。结果用ERIC-PCR方法将鲍曼不动杆菌分为10种基因型，抗生素表型有4种。结论该方法简便易行，且重复性好。适合于医院流行病学研究。

血浆肺特异性X基因mRNA检测对诊断肺癌的意义

目的探讨肺特异性X基因(lung-specific X gene,LUNX)mRNA检测在肺癌辅助诊断中的意义。方法荧光定量PCR法检测肺癌患者、肺良性疾病患者、肺外肿瘤特异性对照患者及体检健康者血浆LUNX mRNA,评估循环LUNX mRNA对肺癌的诊断意义。结果肺癌患者血浆LUNX mRNA相对含量(0.287±0.106)显著高于健康组(0.045±0.018)(q=30.34,P<0.01)、肺良性疾病组(0.064±0.041)(q=24.33,P<0.01)和特异性对照组(0.032±0.024)(q=30.44,P<0.01)。肺癌组血浆LUNX mRNA相对含量在不同性别、年龄段及病理类型的患者中无显著性差异(P>0.05),Ⅲ～Ⅳ期患者该基因含量(0.334±0.096)显著高于Ⅰ期(0.253±0.081)(q=4.09,P<0.05)和Ⅱ期(0.271±0.083)(q=3.49,P<0.05)患者。结论血浆LUNX mRNA检测对肺癌有特异的辅助诊断价值。

胆道感染患者胆汁需氧培养及病原菌药物敏感性分析

目的了解胆道感染患者胆汁需氧培养病原菌分布及药物敏感性。方法对264例胆道感染患者胆汁标本进行需氧培养,对病原菌进行鉴定和药敏试验分析。结果病原菌检出率为43.9%(116/264),其中革兰阴性杆菌占52.6%(61/116),包括大肠埃希菌33株,革兰阳性球菌占44.8%(52/116),包括肠球菌属37株,真菌占2.6%(3/116),均为白色念珠菌。革兰阴性杆菌对亚胺培南、阿米卡星、哌拉西林/他唑巴坦较为敏感,革兰阳性球菌对万古霉素、利奈唑胺较为敏感,真菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素较为敏感。结论本地区胆道感染多由肠球菌属和大肠埃希菌所致,临床抗感染经验治疗需有所兼顾。

人胃癌组织中PDCD4和DNMT1的表达及其临床意义

目的研究程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)和DNA甲基转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)在胃癌中的表达及其关系。方法用免疫组化技术检测20例胃癌组织及相应癌旁组织中PDCD4和DNMT1蛋白质的表达,用RT-PCR法检测DNMT1、PDCD4 mRNA的表达。结果 DNMTl和PDCD4蛋白在胃癌及癌旁组织的阳性表达率分别为75%、30%和35%、75%,差异均有统计学意义(P<0.01和0.05);DNMT1 mRNA在胃癌及癌旁组织中的相对表达量分别为0.76±0.11和0.45±0.14;PDCD4 mRNA分别为0.25±0.04和0.63±0.02;PDCD4与DNMT1 mRNA呈负相关(r=-0.773,P<0.05)。结论胃癌组织中PDCD4表达降低,DNMT1表达增高,可能参与了胃癌的发生、发展。

三阴性乳腺癌中COX-2、NF-κB及VEGF表达的临床研究

目的研究环氧酶(COX-2)、核因子-κB(NF-κB)及血管内皮生长因子(VEGF)在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义。方法选取2010年1月至2014年12月于该院进行乳腺癌治疗的100例患者为研究对象,其中三阴性乳腺癌50例,非三阴性乳腺癌50例,采用免疫组织化学法检测100例患者乳腺癌组织中COX-2、NF-κB及VEGF的表达,并应用D2-40标记检测淋巴管浸润和淋巴管密度,对相关的临床病理资料进行统计分析。结果 COX-2在三阴性与非三阴性乳腺癌中的表达分别为76%、70%,差异无统计学意义(P>0.05),VEGF在三阴性乳腺癌病变和非三阴性乳腺癌病变中阳性表达率分别为60%和36%,差异有统计意义(P<0.05)。NF-κB在三阴性乳腺癌病变和非三阴性乳腺癌病变中阳性表达率分别为66%和32%,差异有统计意义(P<0.05)。三阴性乳腺癌组织中乳腺癌中NF-κB与VEGF,COX-2与VEGF表达呈正相关。结论放化疗是三阴性乳腺癌术后治疗的主要手段,而抑制NF-κB、VEGF和COX-2的表达有望成为治疗三阴性乳腺癌的新靶点,值得研究探索。

尿液内毒素定量检测对泌尿系统革兰阴性菌感染的诊断价值研究

目的评估尿液内毒素定量检测对泌尿系统革兰阴性菌感染的诊断意义。方法采用鲎试剂动态浊度法对100份来自不同病区的尿液标本进行内毒素浓度检测,并同时进行尿液细菌培养检测。分析内毒素水平与泌尿系统革兰阴性菌感染的关系。结果尿液细菌培养检出革兰阴性菌阳性标本18份,其内毒素水平显著高于检出革兰阳性菌、真菌及培养阴性的尿液标本(P<0.05)。统计学分析显示,尿液内毒素检测结果与尿液细菌培养检测结果的一致性较好,前者对革兰阴性菌感染的诊断灵敏度为88.9%、特异度为85.4%。随着泌尿系统革兰阴性菌感染患者经治疗后症状好转,尿液内毒素水平亦显著降低(P<0.05)。结论尿液内毒素定量检测对泌尿系统革兰阴性菌感染的诊断及患者疗效评价方面有重要意义。

脑外伤和脑梗死患者血清可溶性P-选择素测定的临床价值

目的定期测定脑外伤、脑梗死患者血清中可溶性P-选择素含量,了解脑外伤、脑梗死血清可溶性P-选择素的动态变化,探讨其临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附试验测定可溶性P-选择素。结果脑外伤患者血清中可溶性P-选择素在12 h左右达高峰,以后逐渐下降至正常水平,重型脑外伤组与轻、中型脑外伤组及对照组血清可溶性P-选择素在12、24、48、72 h差异有统计学意义,4 d后各组间没有明显差异。脑梗死患者血清可溶性P-选择素水平都明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),且都与梗死体积呈显著正相关。结论可溶性P-选择素可以作为评估脑外伤轻重及脑梗死的一个指标,与临床预后相关。

荧光原位杂交技术在骨髓增生异常综合征预后因素分析中的应用

目的探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者年龄、遗传学核型及是否转化为白血病等因素对预后的影响。方法对50例骨髓增生异常综合征患者进行常规细胞遗传学核型分析并对5、7、8号染色体进行荧光原位杂交(FISH)检测,运用单因素Cox回归模型分析年龄、遗传学核型及是否转化为白血病等因素对患者生存率的影响。结果 50例MDS患者中19例常规细胞遗传学核型分析法检出异常,30例患者经FISH检出异常,FISH法检出阳性率高于常规方法,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归模型分析显示65岁以上患者、遗传学核型异常者、转化为白血病的患者死亡风险分别高于65岁以下患者、遗传学核型正常者、未转化为白血病的患者(P均小于0.05)。结论 FISH技术能敏感地检测出小克隆异常,运用常规细胞遗传学技术结合多种探针进行分析,能对MDS患者的诊断、转归及预后进行更为准确的判断。MDS患者的细胞遗传学核型异常及转归是影响患者预后的重要危险因素。

239株铜绿假单胞菌的耐药性分析

目的研究铜绿假单胞菌对目前常用20种抗生素的耐药性,以利于临床合理选用抗菌药物。方法对从患者标本中分离出来的239株铜绿假单胞菌结合临床相关资料进行分析。细菌菌种鉴定及药敏实验采用法国BioMerieux公司的VITEK32全自动微生物分析仪。部分药敏用KB法进行。结果239株铜绿假单胞菌对20种常用抗生素的平均敏感率为3624%,平均耐药率为6376%。三重以上耐药者占7635%。敏感率最高的是亚胺培南8904%,其他依次为舒普深8897%,阿米卡星8402%,特治星8235%等。结论铜绿假单胞菌是临床感染性疾病中常见致病菌之一,且耐药问题已经十分严重。通过耐药性分析,可以优化治疗方案,提高临床治疗效果,降低多重耐药菌株的产生。