目的探讨孤儿核因子受体(Nur77)在胃癌组织中表达及其与患者预后状况之间联系,研究Nur77在胃癌细胞侵袭与迁移进程中的作用机制。方法利用Oncomine数据库在线分析Nur77在胃癌及胃黏膜组织中mRNA表达情况;基于Human Protein Atlas网站数...目的探讨孤儿核因子受体(Nur77)在胃癌组织中表达及其与患者预后状况之间联系,研究Nur77在胃癌细胞侵袭与迁移进程中的作用机制。方法利用Oncomine数据库在线分析Nur77在胃癌及胃黏膜组织中mRNA表达情况;基于Human Protein Atlas网站数据对比胃癌及正常胃组织中Nur77蛋白表达分布特征;GEPIA2在线分析工具评估Nur77与患者总生存期之间联系;蛋白免疫印迹法(Westernblot)比较正常胃黏膜上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS、MKN-45中Nur77蛋白表达差异;分别通过siRNA靶向干扰以及质粒转染上调Nur77表达和靶向下调IL-6验证Nur-77与IL-6之间表达调控关系;运用划痕实验检测干扰Nur77表达前后胃癌细胞的迁移能力改变;将胃癌细胞分空载体组和过表达Nur77组以及空载体转染后干扰IL-6处理组,过表达Nur77结合干扰IL-6处理组(质粒转染24 h后siRNA继续处理24 h)经Transwell小室实验检测Nur-77及IL-6在胃癌细胞迁移和侵袭过程中作用;利用Westernblot检测Nur77表达对NF-κB/IL-6信号通路活化的影响。结果Oncomine数据库在线分析显示,与正常胃黏膜组织相比胃癌组织中Nur77的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);免疫组化结果显示,胃癌组织中Nur77多表达于胃癌细胞细胞核内;Nur77的高表达与胃癌患者不良预后相关(P<0.05);胃癌细胞中高表达的Nur77参与IL-6的表达调控;划痕实验和Transwell小室结果显示,Nur77可能通过IL-6参与胃癌细胞的迁移和侵袭进程(P<0.05);Westernblot结果显示,Nur77通过调控p-p65、p65、p-Stat3、Stat3的表达参与NF-κB/IL-6信号通路活化。结论胃癌中高表达Nur77与患者不良预后密切相关;Nur77可能通过调控NF-κB/IL-6信号途径活化参与胃癌细胞侵袭与迁移进程。展开更多
文摘目的探讨孤儿核因子受体(Nur77)在胃癌组织中表达及其与患者预后状况之间联系,研究Nur77在胃癌细胞侵袭与迁移进程中的作用机制。方法利用Oncomine数据库在线分析Nur77在胃癌及胃黏膜组织中mRNA表达情况;基于Human Protein Atlas网站数据对比胃癌及正常胃组织中Nur77蛋白表达分布特征;GEPIA2在线分析工具评估Nur77与患者总生存期之间联系;蛋白免疫印迹法(Westernblot)比较正常胃黏膜上皮细胞GES-1与胃癌细胞AGS、MKN-45中Nur77蛋白表达差异;分别通过siRNA靶向干扰以及质粒转染上调Nur77表达和靶向下调IL-6验证Nur-77与IL-6之间表达调控关系;运用划痕实验检测干扰Nur77表达前后胃癌细胞的迁移能力改变;将胃癌细胞分空载体组和过表达Nur77组以及空载体转染后干扰IL-6处理组,过表达Nur77结合干扰IL-6处理组(质粒转染24 h后siRNA继续处理24 h)经Transwell小室实验检测Nur-77及IL-6在胃癌细胞迁移和侵袭过程中作用;利用Westernblot检测Nur77表达对NF-κB/IL-6信号通路活化的影响。结果Oncomine数据库在线分析显示,与正常胃黏膜组织相比胃癌组织中Nur77的mRNA表达水平显著升高(P<0.05);免疫组化结果显示,胃癌组织中Nur77多表达于胃癌细胞细胞核内;Nur77的高表达与胃癌患者不良预后相关(P<0.05);胃癌细胞中高表达的Nur77参与IL-6的表达调控;划痕实验和Transwell小室结果显示,Nur77可能通过IL-6参与胃癌细胞的迁移和侵袭进程(P<0.05);Westernblot结果显示,Nur77通过调控p-p65、p65、p-Stat3、Stat3的表达参与NF-κB/IL-6信号通路活化。结论胃癌中高表达Nur77与患者不良预后密切相关;Nur77可能通过调控NF-κB/IL-6信号途径活化参与胃癌细胞侵袭与迁移进程。