中华鳖IGF2和IGF2R基因克隆及其功能研究

【目的】探索胰岛素样生长因子2基因(IGF2)和胰岛素样生长因子2受体基因(IGF2R)在中华鳖生长过程中发挥的作用,为揭示IGFs系统在中华鳖异速生长及两性生长差异中的作用机制打下基础。【方法】采用RACE克隆中华鳖IGF2和IGF2R基因c DNA序列,利用BioEdit、ExPASy、TMHMM Server v2.0、SignalP及SMART等在线软件进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR分析IGF2和IGF2R基因在雌雄中华鳖不同组织、不同表型及不同性类固醇激素处理下的表达变化。【结果】中华鳖IGF2基因cDNA序列全长1180 bp,共编码222个氨基酸残基;IGF2蛋白相对分子量为24.84 kD,理论等电点(pI)为9.00,属于跨膜蛋白,含有1个IIGF结构域。中华鳖IGF2R基因cDNA序列全长8765bp,共编码2443个氨基酸残基;IGF2R蛋白相对分子量为271.92kD,pI为5.64,属于跨膜蛋白,含有14个重复的CIMR结构域和1个FN2结构域。基于IGF2和IGF2R氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树均显示,中华鳖与龟鳖类的亲缘关系最近,与鱼类和两栖动物的亲缘关系相对较远。IGF2和IGF2R基因在中华鳖体内具有广泛的组织表达谱,IGF2基因在精巢中的相对表达量显著高于卵巢(P<0.05,下同),IGF2R基因则恰好相反。IGF2基因在成年中华鳖生长快个体肝脏中的相对表达量显著高于生长慢个体,IGF2R基因的表达模式则相反。在雌二醇(E2)处理下,除雌性中华鳖肝脏中的IGF2R基因相对表达量在注射6 h时显著升高外,IGF2和IGF2R基因在雌雄个体肝脏中的相对表达量整体上呈下降趋势;MT处理对雄性个体肝脏中IGF2基因的表达无显著影响(P>0.05),但在注射48 h后显著提高雌性个体肝脏中的IGF2基因相对表达量,且显著下调雌性中华鳖肝脏中的IGF2R基因相对表达量。【结论】IGF2和IGF2R基因参与调控中华鳖性腺的发育及成熟,且IGF2R可能通过内化降解IGF2而对中华鳖的生长起负调控作用。此外,IGF2和IGF2R基因会通过下调表达量来响应外源激素的刺激,进而实现对中华鳖生长的调控。

中华草龟蛋营养成分及消化特性研究

对中华草龟蛋的一般营养成分、矿质元素、脂肪酸、氨基酸组成及体外模拟消化过程中抗氧化特性等进行测定分析。结果表明,中华草龟的受精蛋、无精蛋中水分含量分别为(77.82±0.54)%、(79.33±0.94)%,无显著差异。干基的受精蛋中灰分、总糖、粗脂肪及葡萄糖含量分别为(7.22±0.05)%、(12.60±0.02)%、(32.63±1.36)%、(0.114±0.006)%,显著高于无精蛋中对应成分含量(6.19±0.13)%、(11.09±0.05)%、(30.68±1.24)%、(0.036±0.005)%;二者粗蛋白含量均较高,分别为(52.68±0.38)%、(52.79±0.27)%,且无显著差异;在测定的8种矿物质元素中,磷含量最高(12900~14300 mg/kg),还含有少量硒元素(约为0.4835~0.4315 mg/kg),仅钠和钾元素含量受精蛋显著高于无精蛋。无精蛋的总脂肪酸含量为(279.43±0.94)mg/g显著高于受精蛋(213.41±3.74)mg/g,且人体必需脂肪酸含量也存在显著差异,但饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸含量占脂肪酸总量的比例无显著差别。中华草龟的受精蛋、无精蛋中的氨基酸总量(521.94~529.99 mg/g)及人体必需氨基酸比例(40.34%~40.58%)均无显著差别。体外模拟消化过程中,中华草龟的受精蛋与无精蛋的ABTS阳离子自由基清除能力、铁离子还原能力及可溶性蛋白均显著增强,且在肠消化阶段的ABTS阳离子自由基清除能力约提高4倍、铁离子还原能力约提高3倍,但二者间无显著区别;Tricine SDS-PAGE电泳图显示消化过程中,受精蛋与无精蛋在肠消化液中的蛋白分子质量集中于3.3 kDa以下,小分子肽的增多与抗氧化特性的变化趋势相符。这为中华草龟蛋的食用和开发利用提供科学依据。

三叶木通果实成分、生物活性及保鲜加工研究进展

三叶木通是一种具有较高营养、药用和经济价值的植物,可全株入药,藤茎是中药材木通的主要来源,近成熟干燥果实是中药材“预知子”,果肉味道清香甘甜,口感爽滑细嫩,果实含有水分、碳水化合物、蛋白质、脂肪、矿物质、维生素等营养成分和黄酮类、多酚类、三萜及其皂苷、木脂素类、多糖、有机酸等活性成分,具有抗肿瘤、抗菌、抗炎、抗氧化、降血糖等生理功能。为此,本文对三叶木通果实营养及活性成分、生物活性及保鲜加工现状进行了综述,并对三叶木通果实未来的研究方向和应用前景进行了展望,以期为三叶木通果实的综合开发利用及功效成分的精准加工提供理论依据。

鱼腥藻毒素的生态毒性研究及展望

在全球水体富营养化和气候变暖不断加剧的背景下,蓝藻水华及其产生的蓝藻毒素给人类健康和生态环境带来的不利影响不容忽视。鱼腥藻毒素(anatoxins,ATXs)是由鱼腥藻、束丝藻和颤藻等淡水丝状蓝藻产生的一类具有神经毒性的毒素,直接饮用ATXs污染的水体或间接暴露于其中均可导致接触动物发生急性中毒事件。本文根据现有研究结果,综述介绍了ATXs的致毒机理、在水体的分布、生态毒性效应以及环境归趋,并对相关研究领域进行展望,以期为未来有效防控ATXs的污染提供科学参考。

芦苇的饲料利用研究进展

介绍了芦苇的饲用价值,从青贮、畜禽饲用、水产动物饲用等方面综述了芦苇的饲用研究进展,以期为芦苇饲料的开发与加工提供参考。

食品中免疫调节物质的研究进展

免疫调节是指机体依靠免疫系统识别和清除抗原性物质,维持身体的生理平衡与相对稳定的过程。随着生活方式的改变,大多数人都出现过因为免疫调节紊乱而产生的不良症状。因此,利用食品中的免疫调节物质调节人体的免疫系统成为一项重要的研究内容。在我国保健食品可以申报的18项功能中,有助于增强免疫力也成为了最受关注的功能之一。该文就食品中的免疫调节物质及其免疫调节机制的研究进展进行综述,对现有的具有免疫调节功能的食品进行介绍,以期为进一步开发利用免疫调节物质,研发具有增强免疫力的功能食品提供理论依据。

五株有机高分子化合物降解菌的生物安全性分析

以分离自环洞庭湖水系的3个淡水湖渔场表层底泥样品中的2株产几丁质酶菌株及3株产胶原蛋白酶菌株为研究对象,对其进行酶活分析及分子生物学鉴定,并通过药敏性、溶血性、氨基酸脱羧酶活性及硝酸还原酶活性实验对其安全性进行评价。结果表明,2株产几丁质酶菌株AL1、BM1分别被鉴定为芽孢杆菌(Bacillus sp.)和假单胞菌(Pseudomonas sp.);3株产胶原蛋白酶菌株ALJ1、BMJ1及DJ2分别被鉴定为Pseudomonas sp.、Pseudomonas sp.和微小杆菌(Exiguobacterium sp.)。安全性试验结果表明,菌株DJ2、BMJ1分别对6种和4种抗生素高度敏感,其余菌株仅对1种抗生素高度敏感;除菌株AL1外,其余4株菌均无溶血性;除菌株DJ2外,其余4株菌均有氨基酸脱羧酶活性;5株菌均无硝酸还原酶活性。综上,菌株BM1和DJ2是降解有机高分子化合物的较安全菌株,可将其应用于有机高分子化合物的降解。

预制食品保藏技术研究进展

近年来,预制食品迎来快速发展阶段,各类预制食品纷纷走向国内外市场。为探究延长预制食品保质期的有效方法,通过文献调研,分别从杀菌技术和包装技术进行综述。介绍了热杀菌技术、非热杀菌技术、真空包装、气调包装及抗菌包装等预制食品保藏方式的原理与应用,为预制食品的保藏技术研究提供一些理论指导和新思路。

淡水虾腥味脱除技术研究进展

淡水虾味道鲜美、营养价值高,但目前淡水虾深加工技术无法解决虾类及其制品中存在的腥味问题,阻碍了淡水虾加工产业的发展和新产品开发。综述了淡水虾异味脱除的物理、化学、生物及复合方法,总结了淡水虾脱腥技术的优缺点及未来的发展方向,为提高淡水虾制品风味及高品质虾类制品开发提供技术参考。

野生多花兰组培苗的驯化研究

多花兰是国家Ⅱ级保护野生植物,具有观赏、药用和物种杂交等价值,但种子自然萌发率极低,分株繁殖速度慢,大量的野地采挖,造成多花兰资源的巨大破坏和浪费。本研究以野生多花兰组培苗为材料,研究不同营养液和不同基质对组培苗驯化成活和生长的影响,旨在研究出简易便于推广的多花兰组培苗驯化方案。结果表明,多花兰组培苗置于稀释500倍的1/2MS营养液中培养60 d的成活率达99%,再将该营养液培养的驯化苗转移至林下腐殖土:风化石=3:1(v/v)培养60 d,成活率高达99%;既可采用营养液单独驯化,也可采用营养液结合基质驯化,整个驯化过程可在2-4个月内完成。该驯化方案简易便于推广,有利于多花兰野生资源的保护和回归,对建立多花兰种苗工厂化、多花兰无土农业或发展多花兰都市农业均具有重要意义。

饲粮添加黄芪复方中草药对育肥猪血清免疫指标及肉品质的影响

试验旨在研究黄芪复方中草药对育肥猪血清免疫指标、肉品质及肌肉营养成分的影响。选取250头170日龄,体况、体重相近的育肥猪,随机分为5组,每组5个重复,每个重复10头育肥猪。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂添加0.6%、0.8%、1.0%和1.2%黄芪复方中草药(ACM)的饲粮,试验期60 d。结果显示,0.8%ACM组和1.0%ACM组育肥猪血清免疫球蛋白与补体蛋白含量显著高于对照组(P<0.05)。与对照组相比,各试验组肌肉失水率显著降低(P<0.05),肉色红度值显著提高(P<0.05),黄度值显著降低(P<0.05)。与对照组相比,试验组肉中水分含量显著降低(P<0.05),1.0%ACM组肉中粗脂肪含量显著提高(P<0.05),0.8%ACM组和1.2%ACM组肉中粗蛋白含量显著提高(P<0.05)。添加1.2%ACM显著提高了肉中总氨基酸及必需氨基酸的含量(P<0.05),添加0.8%ACM可显著提高肉中多不饱和脂肪酸含量(P<0.05)。研究表明,饲粮添加0.8%~1.0%ACM能够提高育肥猪血清免疫功能,改善猪肉品质。

Pre-miR172及miR172调控油菜AP2基因表达的规律分析

为探究油菜miR172前体(pre-miR172)及成熟体(miR172)对AP2基因的调控功能,该研究通过生物信息学方法对miR172和AP2启动子进行调控元件预测,分析6条油菜AP2基因的进化关系及miR172与AP2的靶向关系;通过qRT-PCR方法检测AP2、miR172和pre-miR172在早熟和晚熟油菜不同组织的表达规律;比较分析miR172丰度和AP2表达量间的相关关系,以及比较分析pre-miR172和miR172在表达水平上的相关关系;通过过表达pre-miR172,再次验证pre-miR172对成熟体miR172及AP2的作用。结果表明:(1)miR172和AP2启动子区均存在调控花发育的顺式元件。(2)6条AP2序列均经历了强烈的纯化选择,均具备miR172的结合位点,属miR172的靶基因。(3)miR172家族成员均可促进早熟油菜AP2表达,但miR172d作用不明显。在晚熟油菜中,miR172a和miR172c作用微弱,miR172b和miR172d二者共同发挥作用降低AP2的表达水平。(4)pre-miR172家族对于早熟油菜中miR172家族的表达水平均有促进作用;在晚熟油菜中pre-miR172a和pre-miR172b对其成熟序列的形成发挥正调控作用,pre-miR172c和pre-miR172d则对于其成熟序列的形成发挥负调控作用。过表达pre-miR172后,miR172和AP2表达规律与上述结果保持一致,证实pre-miR172对miR172及AP2的调控功能。该研究结果丰富了油菜AP2基因的功能调控路径,为基因的调控功能研究提供了新的思路。

沅水光泽黄颡鱼和鲫的临界游泳速度和最大游泳速度比较

为了分析洞庭水系鱼类趋流特性的生态适应性及为水域渔业资源保护提供基本数据,在水温(20.0±1.5)℃和自然光周期下,用实验室自制的鱼类运动测试水槽和递增流速法测定了沅水中游常德河洑江段体长(13.94±1.85)cm光泽黄颡鱼(Pelteobagrus nitidus)和体长(12.28±1.42)cm鲫(Carassius auratus)的临界游泳速度及最大游泳速度等参数,分析两种鱼这两个参数与体长等因素的关联及差异。外置变频器调节电机功率改变螺旋桨的转速而呈不同流速。1 BL·s^(-1)时开始实验,每15 s提高流速2 cm·s^(-1),直到鱼变疲劳在拦网处停止游泳20 s时的水流速度就是该鱼的最大游泳速度(U_(max),单位cm·s^(-1))和相对最大游泳速度(U_(max)^(r))[(=U_(max)/BL(体长),单位BL·s^(-1))]。流速慢慢增至60%U_(crit)估计值下,实验鱼持续游动15 min后,将增加15%U_(crit)估计值,之后继续以这种方式不断提升流速,至实验鱼达到运动力竭状态不能继续游泳为止。记录此时电机频率并把实验鱼从观察区移出来放入休息区,记录实验鱼的形态参数和达到力竭状态的前一档游泳时间,计算临界游泳速度U_(crit)和相对临界游泳速度(U_(crit)^(r),单位为BL·s^(-1))。结果表明:光泽黄颡鱼的U_(crit)和U_(crit)^(r)分别为(39.21±3.41)cm·s^(-1)和(2.83±0.15)BL·s^(-1),其U_(max)和U_(max)^(r)分别为(28.96±3.44)cm·s^(-1)和(2.08±0.04)BL·s^(-1);鲫的U_(crit)和U_(crit)^(r)分别为(40.78±2.15)cm·s^(-1)和(3.34±0.23)BL·s^(-1),其U_(max)和U_(max)^(r)分别为(39.67±3.14)cm·s^(-1)和(3.24±0.14)BL·s^(-1)。依据结果,取得不同鱼类临界游泳速度、最大游泳速度与体长的线性和非线性函数显著相关模型(P<0.05)。光泽黄颡鱼和鲫的绝对临界游泳速度差异不显著(P>0.05),但绝对最大游泳速度、相对临界游泳速度和相对最大游泳速度差异极显著(P<0.01)。鲫的U_(max)^(r)和U_(crit)^(r)都显著高于光泽黄颡鱼。本实验结果可为不同鱼类运动生理生态的适应机制及过鱼设施的设计提供相应支持。

微生物发酵秸秆在动物生产中的应用

我国农作物秸秆资源丰富,但利用率较低。秸秆通常被焚烧、抛弃或填埋,这不仅使秸秆中的营养物质不能有效利用,还会造成大气污染等问题。利用微生物发酵秸秆可以有效分解秸秆中的木质纤维素,改善秸秆的营养价值,提高秸秆资源的利用率。文章综述了微生物发酵秸秆技术及秸秆发酵所需的微生物,并总结了发酵秸秆对动物的生长性能、消化吸收及肉品质的影响,以期为微生物发酵秸秆在动物生产中的规模化应用提供参考。

青鲫qRT-PCR内参基因的筛选及评价

为筛选出青鲫不同组织中的最适内参基因,本研究利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)技术检测β肌动蛋白(β-actin)、甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)、18S核糖体RNA(18S r RNA)和核糖体蛋白L13(RPL13)4个候选内参基因在青鲫脑、鳃、性腺、肾脏、肝脏、肌肉和脾脏7个组织中的表达情况,并利用ge Norm、NormFinder和BestKeeper等程序分析候选基因的表达稳定性。结果显示,4个内参基因在各组织的Ct值高低顺序依次为:β-actin>GAPDH>18S r RNA>RPL13;4个内参基因在不同组织的稳定性有所不同,综合评价分析显示其稳定性排序为RPL13>18S r RNA>β-actin>GAPDH,RPL13适合作为青鲫不同组织qRT-PCR分析的内参基因。本研究结果可为后续青鲫功能基因表达特征的研究提供技术支撑。

稻田适养品种呆鲤的遗传多样性分析

为探明湘黔山区稻田养殖呆鲤群体的遗传多样性现状,采用14对微卫星引物对湘西永顺、怀化藕团、黔东南锦屏县的呆鲤养殖群体与湘江野鲤自然群体、兴国红鲤养殖群体的遗传多样性及群体间的遗传分化水平进行研究。结果显示:14个微卫星位点平均等位基因数为16.571~19.214,平均有效等位基因数为9.420~11.143,各群体的平均遗传观测杂合度为0.705~0.778,平均期望杂合度为0.884~0.893,平均多态信息含量为0.883~0.891;各位点群体间的遗传分化系数平均值为0.017,基因流为3.088~27.730,5%的遗传变异来自于群体间,而95%的变异来源于群体内个体间和个体内。试验结果表明,本次采集的5个群体均具有较高的遗传多样性,群体间存在一定的基因流动且遗传分化较弱,在长期的稻田养殖条件下,呆鲤群体遗传多样性未下降,未与湘江野鲤产生明显分化,但藕团呆鲤与湘江野鲤产生了一定的遗传分化。

饲料不同脂肪源对鳙鱼生长性能及肉品质的影响

本试验旨在研究饲料不同脂肪源对鳙鱼(Aristichthys nobilis)生长性能及肉品质的影响。将300尾健康活泼、体重[(42.65±0.26)g]一致、大小均匀的鳙鱼随机分成5组,每组3个重复,每个重复20尾。各组分别饲喂饲料中添加3%大豆油(SO组)、菜籽油(RO组)、花生油(PO组)、葵花油(SU组)、玉米油(CO组)为脂肪源配制成的5种等氮等脂试验饲料。试验期35 d。结果表明:1)SO组的终末体重显著高于其他各组(P<0.05),增重率和特定增长率(SGR)显著高于PO组和CO组(P<0.05)。PO组的终末体重、增重率和SGR显著低于SO组、RO组和SU组(P<0.05)。2)PO组和SU组的肌肉粗蛋白质含量显著低于其他各组(P<0.05),SO组和CO组的肌肉粗灰分含量显著高于其他各组(P<0.05)。3)RO组的肌肉滴水损失和蒸煮损失均显著低于CO组(P<0.05),SO组的肌肉蒸煮损失和离心损失均显著低于CO组(P<0.05)。SO组的肌肉硬度和咀嚼性显著高于其他各组(P<0.05)。4)SO组和SU组的肌肉铁含量显著高于PO组和CO组(P<0.05),PO组和CO组的肌肉镁含量显著高于其他各组(P<0.05),SU组的肌肉锌含量显著高于其他各组(P<0.05)。5)SO组的肌肉二十碳五烯酸(EPA)含量显著高于PO组(P<0.05),RO组、PO组的肌肉二十二碳六烯酸(DHA)含量显著高于SU组和CO组(P<0.05),SU组的肌肉多不饱和脂肪酸(PUFA)含量显著高于SO组、RO组和PO组(P<0.05),RO组的肌肉饱和脂肪酸(SFA)含量显著低于其他各组(P<0.05),RO组的肌肉n-3 PUFA含量显著高于SU组和CO组(P<0.05),RO组的肌肉n-3/n-6 PUFA显著高于其他各组(P<0.05)。6)RO组的肌肉非必需氨基酸、鲜味氨基酸含量显著高于其他各组(P<0.05),RO组的肌肉总氨基酸、必需氨基酸、半必需氨基酸含量显著高于SO组、SU组和CO组(P<0.05)。RO组的肌肉必需氨基酸指数(EAAI)最高,CO组最低。综上所述,从生长性能方面来看,SO组的鳙鱼生长性能最好,PO组和CO组的生长性能较差。从肉品质方面来看,SO组、RO组的鳙鱼具有较好的肌肉持水力、质构特性及脂肪酸组成,RO组的鳙鱼具有较好的氨基酸品质。

黄尾鲴溃疡综合征的病原菌分离鉴定及病理学观察

近年来,湖南株洲某苗种场的黄尾鲴亲鱼在繁殖期间暴发溃疡综合征,其典型症状为病鱼体表不同部位出现大面积溃疡。为探究该病的发病原因及防控方法,采用传统细菌分离和鉴定方法确定致病菌,使用KB纸片法筛选敏感药物,并通过组织切片法观察病理变化。试验结果显示,从患有典型溃疡综合征的濒死黄尾鲴亲鱼肝脏中分离到优势菌株HZ0416,人工感染黄颡鱼能引起溃疡综合征,并具有强致死性。Biolog全自动微生物鉴定系统和16S rDNA序列分析显示,菌株HZ0416为舒氏气单胞菌。药敏试验显示,舒氏气单胞菌HZ0416对庆大霉素、氟苯尼考和五倍子高度敏感;对环丙沙星、鱼腥草、穿心莲等8种药物敏感;对卡那霉素、多黏菌素B、秦皮、艾叶等22种药物呈低度敏感或不敏感。组织病理观察显示,患病鱼多器官组织充血、出血,并伴随有炎性细胞浸润、实质性细胞空泡化坏死等现象。舒氏气单胞菌是黄尾鲴溃疡综合征的潜在病原菌,同时五倍子、氟苯尼考等可作为候选药物防治湖南株洲地区的黄尾鲴溃疡综合征。

黄羽肉鸡对五种饲料原料养分利用率比较

为测定黄羽肉鸡对玉米蛋白粉、酶力肽、菌体蛋白、菊花粉粕和红薯淀粉渣5种饲料原料的养分利用率,试验选用体质量和体况近似的黄羽肉鸡35只,分为7个处理,每个处理设5个重复,每个重复1羽,设5个试验组,试验组分别投喂1种饲料日粮(30%待测饲料原料和70%基础日粮组成),收集的粪便样品待测。结果显示:黄羽肉鸡对酶力肽的表观代谢能、氮校正代谢能、蛋白质表观利用率和蛋白质真利用率均为最高,其次是菌体蛋白或玉米蛋白粉,而菊花粉粕最低;5种原料的氨基酸表观利用率为-130.42%~96.64%,氨基酸表观利用率的最高值均出现在酶力肽中,其次为玉米蛋白粉,最低的为菊花粉粕;氨基酸真利用率总体趋势和表观利用率一致,黄羽肉鸡对酶力肽的氨基酸真利用率最高,为93.80%~99.05%,玉米蛋白粉次之,对菊花粉粕的氨基酸真利用率最低。由此可知,黄羽肉鸡对酶力肽和玉米蛋白粉的利用率较好,对菌体蛋白、菊花粉粕和红薯淀粉渣的利用率较低。

高致病性猪蓝耳病与猪圆环病毒2型混合感染的诊断

2020年11月湖南省常德市某规模化猪场暴发了一场以仔猪呼吸困难、消瘦、皮肤发绀,并有大量死亡为特征的传染病。根据送检4头仔猪的剖检变化和实验室荧光定量PCR检测,最终确诊为高致病性猪蓝耳病、猪圆环病毒2型混合感染。经过治疗并采取严格的预防免疫措施,该猪场的发病率得到有效控制。