肉桂等八种中药对小鼠肾脏三种主要有机阴离子转运体的影响

目的:检测8种具有肾毒性的中药对小鼠肾脏有机阴离子转运体(OATs)中3个主要亚型(Oat1,Oat2,Oat3)的影响。方法:肉桂等8种中药水煎剂(以高、低两个剂量)及纯水、丙磺舒(阳性对照)及羧甲基纤维素钠(CMC,丙磺舒溶媒)分别灌胃给NIH小鼠(每组雌雄各半),2次/d,连续5 d。最后一次给予供试品后1 h所有受试鼠逐一经尾静脉注入对氨基马尿酸(para-aminohippuric acid,PAH,30 mg/kg),然后在1、2.5、5、7.5、10、15和20 min时从各组分别取10只鼠安乐处死收集全血并迅速摘取双肾。匀浆各左肾(以Folin-酚法定量蛋白浓度)后以文献法定量其中及血清中的PAH浓度,以药动学软件(DAS2.0)分析血中PAH的主要药动学参数:消除半衰期(t1/2β)、分布容积(Vd)、总清除率(CL)及药时曲线下面积(AUC0-20 min);比较全部采血点中5个时间点(1、5、10、15、20 min)各组肾组织中的PAH蓄积量;从1 min采血点时的各组右肾提取总mRNA,以实时荧光定量PCR法比较各组小鼠肾脏中Oat1、Oat2、Oat3 mRNA的表达量。结果:与纯水组相比,益母草高剂量组,蜈蚣高、低剂量组的t1/2β显著延长(P<0.05,P<0.01),其余各组无明显改变(P>0.05)。除细辛低剂量组和益母草低剂量组外所有其他供试物组的Vd、CL和AUC0-20 min均发生显著变化:Vd变小(P<0.01),CL变慢(P<0.01),AUC0-20 min增大(P<0.01)。与纯水对照组相比,肾组织中的PAH蓄积量除冬虫夏草低剂量组、蜈蚣低剂量组外其余各组均显著升高(P<0.05,P<0.01)。与CMC组相比,丙磺舒组的mRNA表达量在Oat1、Oat3被显著上调(P<0.05,P<0.01),而在Oat2被显著下调(P<0.05);与纯水组相比,Oat1的mRNA表达水平在细辛、冬虫夏草、益母草、番泻叶、厚朴等各组被显著上调(P<0.05,P<0.01),而在蜈蚣组则被显著下调(P<0.05);肉桂、冬虫夏草、益母草、番泻叶、厚朴等各组的Oat2的mRNA表达量被显著上调(P<0.01);肉桂、厚朴两组的Oat3的mRNA表达水平被显著上调(P<0.01),而细辛、益母草、蜈蚣、苦参等组的Oat3的mRNA表达水平被显著下调(P<0.05,P<0.01)。结论:肉桂、细辛、益母草、番泻叶、苦参、厚朴、蜈蚣、冬虫夏草等8种肾毒性中药可能通过抑制有机阴离子转运体中的3个主要成员OAT1、OAT2、OAT3而导致肾损伤。

常见可药/食用植物及其所含化学成分明显抑制小鼠肾脏主要有机阴离子转运体

目的检测市售主要草（凉）茶、植物瘦身产品、热带水果、热门中药等是否影响小鼠肾脏有机阴离子转运体（OAT）中3个主要亚型Oat1,Oat2和Oat3,以预测对患者的药物排泄是否产生可能的干扰.方法王老吉等5种凉茶、碧生源等4种减肥产品、清开灵等4种清瘟解毒复方中药以及上述产品的主要组成植物和它们所含有的部分化学成分的水溶液、以及荔枝等9种热带水果榨汁,分别以两种剂量经口投与NIH小鼠,每天2次连续5天.同时设丙磺舒阳性对照组和两种溶媒（纯水和05%羧甲基纤维素钠水溶液）对照组及糊精加蔗糖添加剂组.最后1次投与供试物后实施对-氨基马尿酸（PAH）清除试验：在静脉注射PAH后1.0、2.5、5.0、7.5、10.0及20.0min时从每组分别各取10只小鼠（♀♂对半）,安乐处死收集全血并迅速摘取双肾（右肾供匀浆后测定其PAH蓄积量,左肾供提取总mRNA）.另取NIH小鼠（♀♂对半,10只/组,供试物投与同前）,按Nakakariya法做肾切片摄取PAH试验.用Kiguchi法测定来自上述血清及肾匀浆液中的PAH浓度（以Folin酚法定量其蛋白含量）;以药动学软件（DAS20）计算血中PAH的主要药动参数;以实时定量PCR法定量小鼠肾脏Oat1,Oat2及Oat3的mRNA表达.结果与相应对照组比较,大部分供试物组（高剂量更明显）的消除半衰期（T1/2β）明显延长（P〈0.05～0.01）,且其分布容积（Vd）和清除率（CL）均明显减少（P〈0.05～0.01）而曲线下面积（AUC0→20min）则均明显增加（P〈0.05～0.01）.肾组织中的PAH蓄积量在所查时间段（ivPAH后1～20min）大部分供试物组（高剂量更明显）均明显高于相应对照组（P〈0.05～0.01）.肾切片摄取PAH的结果在大部分供试物组（高剂量更明显）均明显低于相应对照组（P〈0.05～0.01）.与对照组相比,大部分供试物组小鼠的Oat1、Oat2及Oat3的mRNA表达均明显异常（P〈0.05～0.01）.结论大部分供试物（高剂量更明显）在本实验条件下对小鼠肾脏Oat1、Oat2及Oat3均有明显抑制作用,提示上述供试物对患者的药物排泄过程可能产生明显干扰,故服药期间需谨慎食用它们.

缩泉丸和真武汤对小鼠肾脏有机阴离子转运体Oat1和Oat3的影响

目的初步检测缩泉丸和真武汤对小鼠肾脏有机阴离子转运体（Oats）中的2个主要亚型（Oat1,Oat3）的影响。方法以缩泉丸和真武汤及方中各药水煎剂、丙磺舒、氢氯噻嗪给NIH小鼠灌胃,每天2次,连续5 d,另设纯水对照组。末次给药后所有受试鼠逐一经尾静脉注入对氨基马尿酸（para-aminohippuric acid,PAH）30mg·kg^-1,然后在1,2.5,5,7.5,10,15,20 min时分别从各组各取10只小鼠处死收集全血,并迅速摘取双肾,测定血清及肾匀浆液中的PAH浓度,以药动学软件（DAS2.0）求出血清及肾组织匀浆液中PAH的主要药动学参数：消除半衰期（t1/2β）,分布容积（Vd）,清除率（CL）和药-时曲线下面积（AUC0-20 min）;从各组右肾提取总mRNA,以实时荧光定量PCR法比较小鼠肾脏中Oat1、Oat3 mRNA的表达量。另从各组各取10只小鼠,末次给药后1 h,断头处死后,取右肾做肾切片摄取PAH试验。结果与纯水对照组比较,真武汤组、茯苓组t1/2β显著延长（P〈0.01）,缩泉丸、乌药、附子各组t1/2β显著缩短（P〈0.05,P〈0.01）;缩泉丸、益智仁、山药、真武汤、白芍、生姜、茯苓各组Vd显著降低（P〈0.05,P〈0.01）,附子组Vd升高（P〈0.01）;缩泉丸、山药、真武汤、白术、生姜、茯苓各组CL均显著降低（P〈0.05,P〈0.01）;除益智仁、白芍、茯苓各组AUC0-20 min无显著变化外（P〉0.05）,其他供试物组均显著增大（P〈0.01）。各供试物组肾脏与血清AUC0-20 min比值均在0.247~0.475之间,与纯水对照组相似;肾切片摄取PAH试验显示,与纯水对照组比较,缩泉丸、乌药、山药、真武汤、白术、白芍、附子、生姜、茯苓各组摄取PAH量明显降低（P〈0.05,P〈0.01）。与纯水对照组比较,益智仁组、附子组小鼠肾脏Oat1 mRNA表达水平显著上调（P〈0.01）,而缩泉丸组、真武汤组Oat1 mRNA表达水平则显著下调（P〈0.01）;缩泉丸、益智仁、附子各组小鼠肾脏Oat3 mRNA表达水平显著上调（P〈0.01）,而真武汤组Oat3 mRNA表达水平则显著下调（P〈0.01）。结论缩泉丸及其君药益智仁、真武汤及其君药附子可能通过影响有机阴离子转运体的2个主要成员Oat1,Oat3的表达导致肾脏损伤。