“八五”广东兽研所兽医生物技术研究进展

广东省农科院兽医研究所在“八五”期间,对猪O型口蹄疫病毒单克隆抗体(McAb),抗鸡、抗鸭I_gG McAb及用DNA探针鉴别牛巴贝西焦虫进行了研究,取得了较好的进展。 一、猪O型口蹄疫病毒McAb的研究 为选择培育分泌口蹄疫特异性抗体效价高的杂交瘤细胞,分别用灭活鼠化抗原、活毒鼠抗原和细胞活毒抗原三种不同的O型口蹄疫病毒抗原免疫BALB/C鼠脾细胞,与SP2/0骨髓瘤细胞融合成功,获得三株不同特性的能分泌抗O型口蹄疫抗体杂交瘤细胞。各杂交瘤细胞经计数。

免疫增强剂促进鸡球虫细胞免疫的研究

艾维茵雏鸡分别于 7日龄和 1 4日龄时以 1 0 0 0、5 0 0 0个E .Tenella卵囊 /只免疫 2次 ,并于首免时注射卡介苗 (BCG)或黄芪多糖 (APS) 1次 ,2 1日龄以 5万和 2 5万卵囊攻击。试验鸡采血时间为 7、1 4、2 1和 2 8日龄。细胞免疫测定指标为淋巴细胞转化水平、E_玫瑰花环形成率、血清溶菌酶含量。结果表明 :BCG和APS能显著提高球虫免疫鸡的淋巴细胞转化水平和E_玫瑰花环形成率

非洲猪瘟的研究进展

非洲猪瘟是猪的一种急性、高度接触性传染性疾病,其特征是发病过程短,死亡率高达100%,临床表现为发热,皮肤发绀,淋巴结、肾及胃肠黏膜明显出血。科学有效的检测诊断方法是阻止非洲猪瘟大范围暴发流行的有效手段。为了进一步了解该病,对非洲猪瘟的流行病学、病原学、临床症状以及诊断检测技术进行了综述,从而为我国诊断、预防和控制非洲猪瘟提供理论依据。

白头翁汤的药理作用研究进展

近年来,白头翁汤临床应用非常广泛,随着对白头翁汤药理作用的系统研究,发现其具有显著的药理活性。对近年来白头翁汤药理作用的研究文献进行了分析整理,重点综述其化学成分与药理活性的关系及相关临床药理作用的研究进展,并提出进一步深入研究的建议。

聚醚类抗生素抗球虫药交叉抗药性研究

从广东分离的４个Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ野外株ＧＤ、ＪＭ、ＹＦ、ＭＺ株，分别对４种聚醚类抗生素———马杜拉霉素、盐霉素、拉萨洛素、森杜拉霉素进行了药物敏感性试验。结果表明，敏感对照虫株ＧＤ株除对盐霉素轻微抗药外，对其他３种聚醚类抗生素均表现敏感；而ＪＭ、ＹＦ、ＭＺ株则对４种聚醚类抗生素表现强抗药性。并对４种聚醚类抗生素之间的交叉抗药性进行了分析，提出一价离子载体药物的轻微抗药性不引起同价或异价药物产生抗药性，但聚醚类抗球虫药强抗药虫株将会引起一价之间或一价与二价之间出现交叉抗药性。

细胞培养筛选抗球虫剂程序的研究

本文作者在Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ细胞培养模型上研究了评价抗球虫剂的程序，包括投药时间、效果评定指标、药物有效浓度及毒性浓度、细胞培养有效浓度及鸡体中使用浓度之相关性等内容。试验结果表明药物溶剂影响药物效能的发挥。投药于球虫培养全期比其他几种投药时间更能准确地评价各种药物的效果。药物评价的指标，除子孢子的活力及裂殖体形成数量之外，卵囊形成数量更能显示出药物的作用效果。本试验确定的药物筛选程序为，用鸡肾原代细胞培养Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ，使药物充分溶解后与子孢子一起接入细胞，培养至试验结束。

柔嫩艾美尔球虫裂殖子免疫原性的研究

本文评价了柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子的免疫原性。试验采用弗氏完全佐剂乳化的裂殖子抗原及从组织中分离得的活游离裂殖子，以不同剂量在不同时间接种健康小鸡，随后用同源球虫进行攻击。效果评价指标为：（１）比较各抗原组的鸡只死亡率及盲肠病变记分；（２）各抗原组鸡只的增重差异。结果表明，柔嫩艾美尔球虫第二代裂殖子抗原不能刺激鸡体产生保护性免疫力；具有活力的裂殖子接种于健康鸡盲肠能诱发部分免疫力，但较自然感染者为弱。本研究揭示了柔嫩艾美尔球虫裂殖子的免疫原性，为进一步研制疫苗提供了依据。

禽致病性大肠杆菌对氟喹诺酮类药物交叉耐药性研究

以广东省野外分离的 15 8株禽致病性大肠杆菌为样本 ,采用纸片扩散法敏感试验标准方法 ,测定氟喹诺酮类药物诺氟沙星、环丙沙星、左氟沙星、氧氟沙星、氟罗沙星、恩诺沙星在临床上的交叉耐药程度。结果显示 ,氟喹诺酮类药物之间存在不同程度的交叉耐药性 ,氟罗沙星对其他 5种试验药物的交叉耐药率为 96%～ 10 0 % ,而左氟沙星对其他药物的交叉耐药率最低 ,平均只有 42 .7% ;两种药物之间的交叉耐药率有的相同 ,但有的差异很大 ,说明交叉耐药性的产生可以是双向 ,也可以是单向或半单向 。

猪圆环病毒病(PCVD)研究进展

猪圆环病毒病是由猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)引起的一大类猪病的统称,该病对我国的养猪业造成了极大的危害。就猪圆环病毒病在病原学、流行病学、染毒症状及综合防控措施对其进行了阐述,以期为其后续研究提供参考。

柔嫩艾美耳球虫广东株微线蛋白-2基因的克隆与序列分析

根据柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)微线蛋白-2基因的cDNA序列设计-对特异性引物,以E.tenella广东株(EtGD)子孢子总RNA为模板,用RT—PCR方法成功扩增出EtGD微线蛋白-2(EtMic-2,GD)的cDNA序列。PCR产物连接到质粒pGEM—T—easy后,转化大肠杆菌DH5α。重组质粒经测序并与E.tenella北京株和豪顿株的MIC-2比较,开放阅读框架(ORF)核苷酸序列的同源性分别为99.70％(1023/1026)和99.61％(1022/1026),推导的氨基酸序列间分别有两个氨基酸不同,同源性为99.41％(340/342),经DNA sisst 1.02分析,这种差异可影响EtMic-2的抗原性。

金荞麦根提取物对鸡脾淋巴细胞活性影响的血清药理学研究

应用中药血清药理学的方法探讨了金荞麦根乙醇提取物药物血清对鸡脾T、B淋巴细胞增殖活性影响的时效及量效关系。首先通过预试验确定含药血清制备方案,包括给药剂量、给药方案和采血时间点的确定。根据预试验结果,设立4个试验组即高(40g生药/kg.d)、中(24g生药/kg.d)、低剂量组(6g生药/kg.d)和空白对照组(灌胃等体积的生理盐水),每天灌服2次,连续14d,末次灌服后40、80、120、180min分别翅下静脉采血,无菌分离血清,经56℃、30min灭活备用。同时,通过体外试验系统中的血清不同添加量试验,确定以2.5%的金荞麦根含药血清为体外细胞培养体系中含药血清的添加量,采用MTT法来探讨金荞麦根各含药血清对鸡脾淋巴细胞增殖活性的影响。结果表明,金荞麦根含药血清对鸡脾淋巴细胞的增殖活性呈明显的时-效及量-效关系,其中以中剂量组120min时相含药血清对鸡脾淋巴细胞的增殖活性为最强(P<0.05)。

猪葡萄球菌感染裸鼠及BALB/c小鼠模型的研究

用一株本室分离鉴定能够引起猪渗出性皮炎的猪葡萄球菌(S.hyicus GZ1)经肌肉注射裸鼠和BALB/C小鼠,意图研究裸鼠和BALB/C小鼠对猪葡萄球菌的易感性及猪葡萄球菌对裸鼠和BALB/C小鼠的致病性。结果表明裸鼠和BALB/C小鼠均可被感染,并表现各自的临床症状。裸鼠在感染后2到3d背部和面部皮肤开始出现大量小的红色囊泡,4到5d后部分囊泡消失,部分形成结痂。一些裸鼠眼睛还会有较多脓性分泌物渗出,感染两周后相继死亡。BALB/C小鼠感染该菌后多表现急性临床症状,感染后2到3d就相继死亡,因此表现不出明显的眼观病变,只有很少一部分小鼠皮肤上会出现炎性渗出,导致该处皮肤脱落。研究表明:BALB/C小鼠比裸鼠对猪葡萄球菌更易感,裸鼠感染后产生清晰可见的临床症状,而BALB/C小鼠在感染后往往还来不及表现明显的临床症状就相继死亡。可见,猪葡萄球菌不仅对猪有致病性,对裸鼠和BALB/C小鼠也都表现出不同程度的致病性。

Eimeria tenella第二代裂殖子在细胞中继续发育的研究

从E .tenella球虫细胞培养中分离出第二代裂殖子 ,接入新培养的鸡肾原代胞 ,结果显示 ,培养至第五天 ,可见大量裂殖体和裂殖子 ,且延续至第九天。由于该球虫每代裂殖阶段仅需 2天 。

新型畜禽消毒剂研究进展

新型畜禽消毒剂研究进展彭新宇吴惠贤谢明权魏文康谢宏料（广东省农科院兽医研究所广州５１０６４０）应用化学消毒剂消灭畜禽饲养环境中的病原体具有重要意义。随着集约化养殖业的迅速发展，对各种疫病的预防显得日益重要，人们对畜禽消毒剂的要求也愈来愈高，常用的消毒...

猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究

以猪附红细胞体和多种血营养菌16S rRNA基因的保守区设计合成引物HM-f/HM-r,在反向引物的5′端用生物素标记,以猪附红细胞体广东株16S rRNA基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针,探针的5′端用地高辛标记,成功地建立了猪附红细胞体PCR-微孔板杂交-酶免疫检测方法。通过测定不同浓度PCR产物对应的微孔板杂交-酶反应显色OD值,用SPSS统计软件进行回归分析,得到回归方程为y=2.1012-0.4492×logx,其相关系数R为0.977,显示对未知样品可进行定量检测。该方法与猪的多种细菌性病原、猫血巴尔通氏体CA株和E.wenyonii无交叉反应,其敏感性比常规PCR琼脂糖电泳检测提高了近100倍。用建立的方法对38份临床样品进行检测,结果有12份检测结果为阳性。

广东鸡致病性大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的敏感性分析

以广东省21个地级市为单位,从鸡场病死鸡分离细菌,选取经生化和动物试验证明的鸡致病性大肠杆菌共115株,采用药敏纸片法测定其对氟喹诺酮类药物的敏感性。结果显示,72.2%的试验菌对氟喹诺酮类药物产生抗药性;氟喹诺酮类药物之间交叉耐药严重,恩诺沙星与氟罗沙星交叉耐药率高达99%。

鸡球虫Etp28基因在球虫不同生活阶段转录活性的研究

本文采用体外转录技术和RNase保护法进行Etp2 8基因转录活性的研究。结果表明在未孢子化卵囊和孢子化 12h的卵囊中均未发现Etp2 8基因的转录活动 ,从孢子化 36h后Etp2 8基因的转录渐趋活跃 ,至孢子化后 12 0h达到最高峰。

血清药理学在抗微生物中药研究上的应用

随着血清药理学与现代化学、微生物学、分子生物学、临床药理学等学科结合,中药血清药理学取得了新的进展。对抗微生物中药的血清药理学的研究意义、研究方法、研究概况等方面进行综述,为抗微生物中药的血清药理学研究提供参考。

消毒剂在不同季节的消毒效果研究

用消毒灵（复合酚）、长效清（复方甲醛）、消毒劲（碘制剂）、菌毒净（氯制剂）等４种不同类型的消毒剂进行不同季节的消毒效果试验。结果表明，菌毒净在一年四季的有效期均不超过２４小时，消毒灵四季的有效期分别为９６、７２、９６、４８小时，长效清四季的有效期分别为１６８、１６８、１６８、９６小时，消毒劲四季的有效期分别为７２、７２、７２、１２０小时。并提出了不同季节使用消毒剂的方法和措施。