生物型抗菌盆底修复材料的制备与性能

背景:哺乳动物细胞外基质组成的生物型修复材料,在盆底组织修复及功能重建方面表现出较大潜力,但细菌感染对生物型修复材料的功能破坏是其中的一个较大问题。目的:制备具备抗菌功能的生物型盆底修复材料。方法:以壳聚糖为基质材料,通过静电吸附和自凝聚纳米粒制备技术获得包载有不同质量浓度替加环素(25,50,100 g/L)的壳聚糖大分子纳米粒混合液,再通过表面涂层技术将其涂覆于细胞外基质材料表面,制得抗菌细胞外基质材料。结果与结论:红外光谱显示,抗菌细胞外基质材料出现壳聚糖的典型糖环骨架振动峰,并且在3 359 cm-1左右峰明显增宽,表明抗菌剂复合涂层修饰成功,由于替加环素的用量非常小,其红外图谱中未能显示其特征吸收峰。扫描电镜观察显示,抗菌细胞外基质材料保存了细胞外基质材料多层排列有序纤维丝构成的主体结构,并且在微丝表面和微丝之间还明显附着一层蓬松鳞片状涂层物质,材料微表面三维孔洞变小,但仍维持多孔连通特性。抑菌圈实验显示,抗菌细胞外基质材料对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有良好的抗菌性能,并且随着抗菌剂浓度的增大,抑菌圈直径显著增加。

脱细胞的细胞外基质材料植入小鼠腹腔不影响小鼠固有免疫应答

目的研究脱细胞的细胞外基质(ECM)材料植入小鼠后对其固有免疫(包括巨噬细胞和中性粒细胞)的影响,初步建立一套以小鼠为实验动物的动物源材料免疫原性去除效果的测试评价方法。方法将新鲜膜材料和新工艺制备的脱细胞和除DNA的ECM材料移植到小鼠腹腔中,7 d后,检测脾脏指数的变化,采用BD绝对计数管检测小鼠外周血中性粒细胞和腹腔液巨噬细胞的绝对数量,采用小鼠Th1、Th2、Th17细胞因子流式微球分析技术检测小鼠血浆和腹腔液白细胞介素2(IL-2)、IL-4、IL-6、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-17A和IL-10分泌。结果使用新鲜膜材料的小鼠体质量不增加、但脾脏指数增加,小鼠外周血中性粒细胞和腹腔液巨噬细胞的数量明显增加,IL-6和IFN-γ的分泌水平增加。而使用脱细胞的ECM材料小鼠以上参数仅有微弱的影响或无影响。结论脱细胞、除DNA的ECM材料对小鼠的固有免疫应答无明显影响。

脱细胞基质材料体外激活巨噬细胞的作用

背景:因巨噬细胞在机体炎症反应中有着举足轻重的作用,所以检测生物材料对巨噬细胞行为的影响,可评估材料的免疫原性。目的:分析脱细胞基质材料对巨噬细胞的激活作用。方法:获取BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞,分5组培养:对照组为单纯细胞培养组;实验1组为脱细胞基质膜材料与巨噬细胞直接接触培养,实验2组为新鲜心包膜材料与巨噬细胞直接接触培养,实验3组为脱细胞基质膜材料与巨噬细胞间接接触培养,实验4组为新鲜心包膜材料与巨噬细胞间接接触培养。培养48 h后,MTT法检测各组A值,判定毒性分级;培养24 h后,检测细胞培养上清中一氧化氮及细胞因子的分泌。结果与结论:实验1-4组毒性分别为2级、4级、0级及2级。实验1组、实验2组一氧化氮水平高于对照组(P<0.05),并且实验2组高于实验1组(P<0.05)。5组间白细胞介素2、白细胞介素4、干扰素γ、白细胞介素17A和白细胞介素10水平比较差异无显著性意义;实验2组白细胞介素6水平高于对照组(P<0.05);实验1组、实验2组、实验4组肿瘤坏死因子水平高于对照组(P<0.05),并且实验2组高于实验1组(P<0.05)、实验1组高于实验4组(P<0.05)。说明脱细胞基质材料可在直接接触时激活巨噬细胞。

聚合物颈椎椎间融合器研究进展

聚合物颈椎椎间融合器具有维持颈椎生理曲度和椎间隙高度、提供初始力学稳定性、促进椎体间融合的特点,在颈椎前路减压融合术中应用广泛。该文对常用聚合物颈椎椎间融合器(包括不可降解的聚醚醚酮、聚酰胺、聚乙烯、聚丙烯酸酯椎间融合器以及可降解的聚乳酸、氨基酸共聚物椎间融合器)的研究进展进行综述。

钴60γ射线灭活人工骨钉PRV病毒效果验证

目的:验证钴60辐照灭活猪源性人工骨钉中指示病毒PRV活性的有效性。方法:首先利用CPE法测定不同辐照剂量γ射线灭活样品后指示病毒的感染活性,初步确定有效辐照剂量;然后利用三批样品对该辐照剂量灭活效果进行验证,辐照前后人工骨钉中指示病毒的滴度采用96孔板CPE法滴定。结果:CPE法测定结果显示,经20kGy及以上辐照剂量处理的样品中指示病毒PRV不能使宿主细胞PK-15出现细胞病变;三批样品经20kGy辐照剂量处理后,指示病毒PRV滴度下降值⊿lgTCID50分别>4.06,>4.75,>4.28,⊿lgTCID50值均大于4。结论:辐照剂量为20kGy的钴60γ射线辐照猪源性人工骨钉可以作为灭活PRV的有效手段。

钴60-γ射线辐照对动物源性膜材指示病毒灭活效果的验证

目的验证钴60-γ射线辐照对动物源性膜材中模拟感染指示病毒的灭活效果。方法将3个连续批次的动物源性膜材中间品,按1∶10(m/V)加入预先测定滴度的CVB3、PRV、BVDV和PPV病毒。设立未经辐照的病毒为对照组,试验组经25 k Gy钴60-γ射线辐照后,提取浸提液,采用96孔板细胞病变(CPE)法观察各梯度稀释液的细胞病变情况,按照Reed-Muench法计算对照组和试验组中4种指示病毒的lg TCID50/0.1 ml,并对比辐照前后病毒滴度的变化情况。结果经25 k Gy钴60-γ射线辐照预先感染病毒的动物源性膜材后,实验结果显示4种指示病毒均不能使宿主细胞出现病变,各病毒滴度对数值变化均>4 logs,符合国家相关法规对动物源性材料病毒灭活效果的要求。结论25 k Gy钴60-γ射线辐照可以作为灭活动物源性膜材中潜在病毒的有效方法。