植物黄酮抗骨质疏松作用研究进展

黄酮类化合物广泛存在于自然界中,具有多方面的生理和药理活性。近年来,黄酮类化合物在骨质疏松方面的研究日益增多,并取得了一定进展,其部分作用机制已阐明,临床应用也得到认可。本文通过查阅国内外相关文献,对黄酮类化合物抗骨质疏松作用的基础与临床最新研究进展进行综述,为黄酮类化合物在骨骼肌肉领域的进一步研究和开发利用提供参考。植物黄酮是一类天然化合物,其作用机制可针对参与骨代谢的成骨细胞和破骨细胞多途径和多靶点进行调节骨的平衡,作用机制独特,临床上的观察也进一步证明了植物黄酮可有效防治骨质疏松。

液质联用对半边旗二萜类活性成分分离富集方法的研究

运用高效液相色谱 -质谱联用技术研究了以大孔吸附树脂富集分离 ,并以AgNO3-硅胶柱分离纯化半边旗二萜类活性成分的方法。采用[M -H]-为选择监测离子 ,以色谱保留时间和选择监测离子流峰面积跟踪监测目标成分 ,探讨最佳分离条件 ;以萃取产物的总离子流图 (TIC)和质谱图评价提取产物的纯度。研究表明 ,大孔吸附树脂对5F和4F具有一定的分离富集作用 ;AgNO3-硅胶柱可以分离纯化5F。本实验对复杂基体中化学结构上仅相差1个双键、相对分子质量相差2的5F和4F(无紫外吸收 )进行了分析鉴定 ,获得满意结果。

含笑化学成分分析

目的:分析含笑花、叶、根茎的挥发油成分。方法:水蒸气蒸馏法提取挥发油并采用气相色谱-质谱技术对挥发油成分进行分析鉴定。结果:分别鉴定出34,37,37种成分,应用峰面积归一化法确定了相关成分的含量。结论:含笑挥发油主要成分为β-榄香烯、[Z]-2-[3-环丙基-7-降蒈基]醋酸甲酯、γ-榄香烯、香桦烯等。

PI3K/Akt信号通路在骨质疏松病理过程中的作用

磷脂酰肌醇三激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路是调节细胞增殖、分化、存活、迁移和代谢过程的最为重要的一个信号通路。越来越多的证据表明,骨组织中的许多信号分子能够选择性激活PI3K/Akt信号通路的相关基因,通过调控成骨细胞和破骨细胞的活动,破坏骨重建过程中骨形成与骨吸收的动态平衡,在骨质疏松的发生和发展中扮演着非常重要的角色。

半边旗中二萜类化合物的超临界CO_2萃取及HPLC-MS分析

目的 建立一种高效准确的提取和分析半边旗中二萜类化合物的方法。方法 以超临界 CO2 与改性剂乙醇组成的复合流体萃取半边旗中二萜类化合物 ,采用正交设计法优化萃取条件 ;建立了 HPL C-大气压化学电离源(APCI) - MS联用的分析方法 ,以选择离子监测 (SIM)方式进行含量测定 ,以选择离子峰面积与总离子流峰面积的比值优选改性剂。主要的二萜类化合物 5 F的准分子离子为 [M- H]- 1。采用 [M- H]- 1为选择监测离子 ,以色谱保留时间和选择监测离子流峰面积定量。结果 超临界流体萃取最佳条件 :2 5 MPa、6 0℃、15 %甲醇、流量 3.0 m L /min;分析条件 :Diamonsil ODS色谱柱 (15 0 mm× 4 .6 mm,5 μm) ,流动相为 CH3CN- 2 mm ol/ L NH4 AC(35∶ 6 5 ) ,流速 1.0 m L / m in,进样 5μL ,线性范围为 0 .0 5～ 2 .5μg,检出限达 0 .4 ng。 5 F的加样回收率为 97.8% (n=3)。结论 本法提取效率高、检测灵敏度高、选择性好 ,可应用于半边旗中二萜类抗癌化合物的深入研究和质量标准的制定。

半边旗提取物6F抑制HL-6 0细胞蛋白激酶C活性(英文)

目的 探讨半边旗提取物 6F的细胞毒作用及诱导DNA片段化与蛋白激酶C(PKC)信号转导途径的关系 ,检测 6F对PKC活性的影响。方法 受试对象为HL 6 0细胞 ,超速离心法获得的胞液 (可溶部分 )及颗粒 (不可溶部分 ,包括细胞膜系统及胞核 )部分用作PKC活性测定。经 0 .4g·L- 1磷脂酰丝氨酸 ,0 .0 4g·L- 1甘油二油酸酯激动剂作用酶粗提物后 ,用液体闪烁计数仪计数 [γ 32 P]ATP参入外源底物的量以测定PKC活性。MTT法测定HL 6 0细胞的活力 ,二苯胺法测定 6F诱导DNA片段化程度。结果 在所测试的浓度范围内 (0 .5～ 312 μmol·L- 1) ,化合物 6F显著抑制胞液及颗粒部分PKC活性 ,最大抑制率达 88.6 % ,呈浓度依赖关系 (胞液部分r =0 .781,P <0 .0 5 ,颗粒部分r =0 .931,P <0 .0 1)。 6F诱导HL 6 0细胞DNA片段化及对细胞的毒性作用可被具有致癌作用的PKC激活剂肉豆蔻酸酯 (PMA ,浓度为 6 5nmol·L- 1)拮抗 ,抑制率分别是 30 %和 4 4% (P <0 .0 1)。PMA单独用使HL 6 0细胞线粒体将MTT还原为甲月赞的能力增强 14 % (P <0 .0 1) ,即增强细胞活力。结论化合物 6F是PKC的抑制剂。 6F对HL 6

不同剂量糖皮质激素对大鼠骨密度和生物力学性能的影响

目的通过双能X射线骨密度仪(dual energy X-ray absorptiometry,DXA)、骨生物力学测试及骨组织计量学等方法研究不同剂量糖皮质激素摄入对正常3月龄大鼠骨骼的影响。方法 31只SPF级3月龄SD雌性大鼠,随机分为正常对照组、地塞米松(Dex)1、2.5、5 mg/kg组,每周尾静脉注射给药2次,共8周,对照组给予生理盐水对照。给药结束后,离体股骨和第3腰椎通过DXA进行骨矿含量(bone mineral content,BMC)、骨矿密度(bone mineral density,BMD)测定,全股骨和第5腰椎分别进行三点弯曲和压缩力学实验,并通过骨组织病理切片观察胫骨近端骨小梁的显微结构并定量分析。结果与正常组相比,所有激素组大鼠体重均明显降低,腰椎BMC、BMD及最大压缩载荷均未明显下降,全股骨BMC均有所降低,但只有Dex 1 mg组全股骨和股骨远端、近端BMD降低;Dex 1 mg组三点弯曲实验断裂载荷、最大载荷和弹性载荷都明显降低,而Dex 2.5 mg、Dex 5 mg组只有弹性载荷仍低于正常对照组。激素组骨小梁有空间密度分布不均现象,骨代谢处于低转换。结论应用糖皮质激素8周对3月龄大鼠骨骼的不利影响股骨较腰椎明显,股骨骨量丢失,力学性能下降,两者均无剂量依赖性。更高剂量Dex并没有增加骨量丢失和力学性能改变。力学性能特别是弹性载荷下降以及骨小梁密度分布不均,提示糖皮质激素更多的是引起骨质量下降。临床上应用糖皮质激素时,应使用多种方法评价其对骨骼的副作用。

辛辣组分对高良姜提取物抗菌活性的影响

采用减压硅胶柱层析(VLC)法分离提取出高良姜中的辛辣组分,对分离前后各部分的抗菌作用进行评价和比较,探讨辛辣组分的分离对高良姜抗菌活性的影响。结果表明,高良姜提取物中辣味成分得到较好的分离,经薄层色谱(TLC)和高效液相色谱分析,分离出的辣味成分主要为二苯基庚烷A;以抑菌圈直径、最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)评价提取分离前后各部位的抗菌活性,辛辣组分非高良姜提取物抗菌活性的主要成分。该项研究为高良姜依其辣味风味和抗菌药效分别开发、综合利用提供了科学依据。

钙离子在半边旗提取物6F的细胞毒及诱导HL-60细胞DNA片段化中的作用

目的 :研究蕨类植物半边旗提取物 6F对HL - 6 0细胞内游离钙浓度 ([Ca2 + ]i)及Bcl- 2蛋白表达的影响 ,Ca2 + 与 6F细胞毒作用及诱导细胞DNA片段化的关系。方法 :用荧光探针Fura - 2 /AM标记细胞内游离Ca2 + ,在荧光分光光度计上测 [Ca2 + ]i;流式细胞仪检测Bcl- 2的表达 ;噻唑蓝 (MTT)法测定细胞成活率 ;二苯胺法测DNA片段化形成率。结果 :6F作用后 ,HL - 6 0细胞内 [Ca2 + ]i 显著升高 ,呈明显的时间剂量效应关系 ;6F降低Bcl- 2的表达 ;于培养基中加 2mmol/LCa2 + 、或加 1mmol/LEDTA络合细胞外钙 ,或加 4 μmol/L钙通道A2 3 187升高细胞内钙浓度 ,均可增强 6F的细胞毒作用 ,但均不影响 6F诱导细胞DNA片段化程度。加入 2 5 0 μmol/LZn2 + 可显著降低 6F所致DNA片段化率 ,并可增强 6F的细胞毒作用。结论 :化合物 6F可显著升高HL - 6 0细胞 [Ca2 + ]i,推测与 6F降低Bcl- 2的表达有关 ;6F诱导HL - 6 0细胞DNA片段化可能是通过Ca2 + -非依赖性DNA酶的作用所致。

高良姜提取物高效液相色谱分析方法的优化

目的针对高良姜提取物的复杂体系,建立起高良姜提取物的高效液相色谱分析方法。方法以液相色谱-质谱联用(LC-MS)的多离子色谱图(MIC)数据进行色谱条件优化。结果获得优化的色谱分离条件:Shim-pack VP-ODS柱(2.0 mm×250 mm,5μm),流动相A为0.1%HAC水溶液,流动相B为15%乙腈+40%甲醇+45%四氢呋喃,梯度洗脱程序为0～20 min、39%～61%B;20～30 min、61%～100%B;流速0.2 ml·min-1,柱温35℃,检测波长280 nm。在优化的色谱分离条件下,高良姜提取物中8个主要色谱峰的分离度均大于1.5,色谱峰相对保留时间比值的RSD(n=5)均小于3.0%,色谱峰峰面积比值的RSD(n=5)均小于5.0%。结论该方法精密度高、专属性好,能够充分展现高良姜提取物的化学组成特性,可为成分复杂且含量相差悬殊的天然产物分析提供借鉴。

氟化钠对大鼠血清微量元素的影响

为探讨氟化钠(NaF)对大鼠血清四种微量元素含量的影响,将80只2月龄SPF级SD大鼠,雌雄各半,随机分成8组:对照组[幼年(CS)、成年(AS)]和用药组[幼年高氟(CHS)、成年高氟(AHS)和幼年低氟(CLS)、成年低氟(ALS)组,长期高氟(HS)和低氟(LS)组];对照组灌胃生理盐水,用药组分别按相应时间给予不同剂量的NaF灌胃。结果表明,与CS组相比,CHS组和CLS组的P分别增加100%(P<0.05)和193.8%(P<0.05);与AS组相比,HS组的Ca、Zn分别下降了20.5%(P<0.05)和40%(P<0.05),而P则增加了74%(P<0.05),LS组的Zn也下降了33.3%(P<0.05)。提示:长期使用氟化钠可导致幼年大鼠血中化学元素代谢紊乱。

高良姜不同活性部位对兔离体肠管平滑肌的影响

目的研究高良姜不同活性部位对兔离体肠管运动的影响和作用机制。方法采用减压硅胶柱层析法,对高良姜乙醇提取物进行分离;借助薄层色谱法及高效液相指纹图谱,对各活性部位进行归属与鉴别;观察高良姜活性组分对离体兔正常肠肌和乙酰胆碱诱导肠管痉挛的作用。结果高良姜提取物中活性组分均可剂量依赖性地抑制肠肌自发性运动,其中黄酮类、二苯基庚烷类最明显(P<0.05),比山莨菪碱作用更强(P<0.05),各活性组分能抑制乙酰胆碱诱导肠管痉挛。结论高良姜各活性组分均可直接抑制离体肠肌张力和非竞争性拮抗乙酰胆碱的作用,其中黄酮类效果最强。