组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用

目的探讨组织薄片法在人原代肝癌细胞培养中的应用。方法分别运用组织薄片法和组织块法从人肝癌组织标本中分离培养原代肝癌细胞,分析两种方法培养成功率、细胞爬出时间、形态及GPC3的表达。结果薄片法培养成功率为66.67%,爬出细胞时间为(7.89±0.78)d,在培养第一代就能观察到形态规则的细胞且周围培养环境洁净;组织块法培养成功率为61.11%,爬出细胞时间为(7.56±0.73)d,在培养第二代能观察到形态规则的细胞。同时原代肝癌细胞和HepG2均能稳定表达GPC3。结论两种方法均能成功培养出原代肝癌细胞,但薄片法培养的细胞在形态及洁净程度上较组织块好,同时能稳定表达GPC3。

细胞因子信号转导抑制因子SOCS基因甲基化与肿瘤

细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)基因的异常甲基化与多种人类肿瘤的发生、发展有明显的相关性。SOCS基因的甲基化沉默导致JAK/STAT途径的结构激活,从而造成了致癌基因和增殖相关基因的激活并最终导致了肿瘤的形成。

胚胎造血干Sca-1^+细胞向肝细胞分化的研究

目的探讨胚胎造血干细胞抗原阳性(Sca-1^+)细胞亚群在合适的体外诱导体系下向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性。方法免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞,相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR法检测细胞白蛋白(ALB)、转甲状腺蛋白mRNA水平表达,免疫组织化学法检测AFP和CK8/18蛋白水平的表达,以及检测细胞糖原染色和尿素合成功能。结果免疫磁性分离法分离Sca-1^+细胞能达到(85.57±1.66)%的纯度(P<0.01),对分离前后细胞活力的影响小(P<0.05)。随着诱导分化时间延长,细胞形态明显向肝细胞变化,AFP表达消失、CK8/18蛋白表达升高,ALB、转甲状腺蛋白mRNA表达升高,且细胞糖原染色和尿素合成功能增强,逐渐向成熟肝细胞转化。结论免疫磁性分离法能够分离出较高纯度的胚胎造血干Sca-1^+细胞,并能够向肝脏细胞分化。

原发性肝癌并脾功能亢进双介入治疗现状

经肝动脉化疗栓塞术联合部分性脾栓塞可降低门静脉压力、消除脾功能亢进,减少出血、感染等并发症,而且创伤小、痛苦少,在临床上已越来越多地应用于不能手术切除的原发性肝癌并脾亢的患者,现对其治疗现状作一综述。

头孢曲松钠相关性胆囊结石豚鼠胆汁和血清总胆汁酸的变化

建立豚鼠头孢曲松钠相关性胆囊结石模型,观察胆汁和血清总胆汁酸(TBA)的变化。实验组14只豚鼠予头孢曲松钠(罗氏芬)100 mg/(kg·d)臀部肌肉注射;对照组14只豚鼠注射同剂量生理盐水;用药10 d后,观察两组胆囊结石情况,检测胆汁和血清TBA。对照组豚鼠未出现胆囊结石,实验组共9只豚鼠出现胆囊结石,成石率为64.29%;实验组胆汁TBA的含量低于对照组;实验组血清TBA平均水平明显高于对照组。头孢曲松钠致豚鼠胆囊结石机制中,胆汁及血清的总胆汁酸代谢可能起到重要作用。

原发性肝癌患者介入治疗前后、手术前后血清高尔基体糖蛋白73水平的变化

目的 观察原发性肝癌（PLC）患者介入治疗前后、手术前后血清高尔基体糖蛋白73（sGP73）表达水平的变化.方法 酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测33例正常人以及65例PLC患者sGP73水平,并比较24例Ⅱ期PLC患者介入治疗前后以及22例Ⅰ期PLC患者手术前后sGP73水平的变化.结果 PLC患者sGP73水平[（212.19±18.10）μg/L]明显高于正常对照组[（52.60±3.74） μg/L,P＜0.01],sGP73水平与PLC患者性别、年龄无明显相关,与临床分期明显相关;Ⅲ期[（228.79±11.99） μg/L]明显高于Ⅱ期[（216.21 ±8.10） μg/L],Ⅱ期明显高于Ⅰ期[（192.03±8.26） μg/L],Ⅰ期明显高于正常对照组、两者差异有统计学意义（P＜0.01）;介入治疗后PLC患者sGP73水平[（211.07 ±8.22） μg/L]明显低于介入治疗前[（216.21 ±8.10）μg/L],手术后PLC患者sGP73水平[（183.50±8.49）μg/L]明显低于手术前[（192.03±8.26） μg/L],两者差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 sGP73水平检测有助于PLC疗效的评估及预后预测.

胆道梗阻后炎症反应发生的过程及机制

胆道梗阻(biliary obstruction)的病因非常复杂,但胆道梗阻后产生的一系列病理生理变化却大致相同,炎症反应作为其中的主要变化在胆道梗阻后造成的肝脏及机体损伤中起着十分重要的作用。了解并理清炎症反应在胆道梗阻后的病理生理变化中的作用及影响对认识这个疾病有着特别的意义。笔者就胆道梗阻后炎症反应产生的过程及机制予以综述。

肝细胞生长因子与酸性成纤维细胞生长因子体外诱导胚胎肝干细胞抗原阳性细胞向肝细胞定向分化的研究

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）与酸性成纤维细胞生长因子（aFGF）体外诱导胚胎肝干细胞抗原阳性（Sca-1^＋）细胞向肝细胞或肝细胞前体分化的可行性。方法免疫磁珠分离法分离Sca-1^＋细胞，相差显微镜观察细胞形态，（RT-PCR半定量逆转录聚合酶链反应）法检测细胞自蛋白（ALB）、转甲状腺蛋白mRNA水平表达；免疫组织化学法检测ALB、AFP和CKS／18蛋白水平的表达，以及检测细胞糖原染色和尿素合成功能。结果分离后Sca-1^＋细胞活力为（94．24±1．04）％，纯度为（85．57±1．66）％，回收率为（62．31±1．85）％。Sca-1^＋细胞经HGF和aFGF诱导分化后，细胞形态变成不规则，明显向肝细胞变化，AFP蛋白表达消失、ALB和CK8／18蛋白表达升高，ALB、转甲状腺蛋白mRNA表达升高，且细胞糖原染色和尿素合成功能增强，逐渐向成熟肝细胞转化。结论HGF与aFGF可在体外诱导胚胎肝Sca-1^＋细胞向肝细胞或肝细胞前体分化。