孕妇阴道乳酸杆菌种属鉴别及过氧化氢产量与妊娠结局的关系

目的探讨孕妇阴道乳酸杆菌种属鉴别及过氧化氢产量与羊膜炎及早产的相关性。方法用16S rRNA基因序列法鉴别分离自100例20周孕龄妇女阴道拭子的乳酸杆菌种属。通过Merckoquant过氧化物试验半定量法测定各分离群的过氧化氢产量。结果77%L.jensenii L.crispatus(31%)及L.gasseri(29%)60%L.vaginalis分离群同样可产生高水平过氧化氢。乳酸杆菌分离群的过氧化氢产量越高,取样当时患者细菌性阴道病(BV)的可能性越小,分娩时羊膜炎及早产的可能性越小。结论阴道中产高水平过氧化氢乳酸杆菌的存在与孕妇BV及后来的羊膜炎及早产的风险有负相关性。可能产过氧化氢的乳酸杆菌能减少子宫上行性感染的发生率,在羊膜炎及早产发病机制中是重要的促炎症分子。

液相芯片技术及其临床应用

液相芯片技术是一种利用混悬在液相中的分类编码微球作为反应及信号检测载体的检测技术,它充分利用发展成熟的流式细胞术检测原理,对临床大多数生物分子(如核酸、蛋白质等)进行高通量分析,目前已在研究和临床检测中得到了广泛的应用,现就其技术原理、特点及临床应用作简要介绍。

多重RT—PCR技术检测儿童呼吸道标本中的常见病毒

目的建立多重RT—PCR技术检测儿科呼吸道标本中常见病毒的方法。方法参照病毒核酸序列设计多重RT—PCR引物，并检索NCBI数据库初步验证其特异性，以实验室阳性株验证引物特异性，优化多重RT—PCR反应条件。并对2008年61份儿童呼吸道标本进行检测，阳性片段测序验证扩增片段特异性。结果采用多重RT—PCR引物对流感病毒A型（IVA）、流感病毒B型（IVB）、副流感病毒1型（PIVl）、副流感病毒3型（PIV3）、呼吸道合胞病毒（RSV）和鼻病毒（RHV）等6种病毒进行扩增，均无非特异性扩增条带，分剐获得171，489，307，585，155，501bp片段，与设计相符；对引物的相关性实验结果表明引物之间不会因相互干扰而出现假阳性结果，61份儿童呼吸道标本多重RT—PCR扩增，阳性率为50．82％（31／61），核酸序列与经NCBI数据库Blast比对同源性高。结论实验证明，所建立的多重RT—PCR技术检测儿童呼吸道标本中常见病毒的方法，敏感度、特异度和可重复性均较好，为常见呼吸道病毒检测提供了一种方便易行的方法。

多重PCR技术在呼吸系统感染疾病诊断中的应用

多重PCR技术能同时扩增几个不同的DNA片段,具有快速、准确、高通量的优点。现就多重PCR在呼吸系统感染疾病诊断上的临床应用及相关技术综述如下。

多重PCR荧光微球检测支气管肺洗液非典型病原体和病毒的临床意义

目的了解下呼吸道感染患者非典型病原体和病毒感染情况。方法采集92例肺炎和急性支气管炎患者支气管肺洗液(BALF),采用多重PCR技术与LuminexxMAP多重分析技术平台相结合,以荧光微球为载体检测非典型病原体和多种病毒。结果10种(14个亚型)病原体阳性检出率为50%(46/92)。其中病毒阳性检出率为33.69%(31/92),以流感病毒A为主,其占病毒阳性检出的67.74%(21/31);非典型病原体阳性检出率为16.30%(15/92),以MP为多,其占非典型病原体阳性检出的73.33%(11/15)。MP、病毒和细菌混合感染率为13.04%(12/92)。结论流感病毒A和肺炎支原体是本地区社区获得性肺炎和急性气管-支气管炎重要的病原体,并有相互混合感染或与细菌混合感染,临床应予重视。

儿童呼吸道感染常见病毒的检测分析

呼吸道感染是临床常见病症，可由多种病原体引起。目前已证明，急性呼吸道感染90％以上是非细菌性的，其中大部分由病毒引起，许多病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急、病后免疫力不能持久等特点，常导致较高的发病率和死亡率，造成疾病的大流行[1]。

检测艰难梭菌感染的五种方法比较

目的 比较分析用于美国医院临床微生物实验室的5种艰难梭菌感染检测方法 ,从中选择1种适于早期诊断艰难梭菌感染的灵敏、特异、简单、快速及经济的实验方案.方法 对174份临床送检的腹泻患者粪便标本同时用TGC、Premier Toxin A＆B EIA（A/B-EIA）、C.Diff Quick Chek Complete（D-EIA）、BD GeneOhm Cdiff assay（BD-PCR）和实验室发展的PCR（LD-PCR）方法 进行艰难梭菌的检测.以金标准TGC法作为参比标准,评价各种检测方法 的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值.结果 TGC法检测174份腹泻患者大便标本,艰难梭菌感染的阳性率为13.8%（24/174）.与TGC法比较,4种检测方法 的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为：A/B-EIA 62.5%、99.3%、93.8%、94.3%;D-EIA 66.7%、98.7%、88.9%、94.9%;BD-PCR 83.3%、98.7%、90.9%、97.4%;LD-PCR 79.2%、93.3%、65.5%、96.6%.所有标本中,至少1种方法 检测为阳性的标本共计34份,其中15份标本5种方法 检测结果 均为阳性.D-EIA法检测结果 中,18份标本GDH及毒素A/B均为阳性,23份仅GDH阳性,133份GDH及毒素A/B均为阴性.18份D-EIA检测阳性标本全部与BD-PCR检测结果 一致,16份与TGC法检测结果 一致.24份TGC阳性标本中,有22份包括在41份GDH抗原呈阳性的标本中.D-EIA检测为假阴性的8份标本中,4份BD-PCR检测为阳性.根据本实验结果 ,D-EIA与BD-PCR相结合的二步法检测方案灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为83.3%、98.7%、90.9%、97.4%.结论 从技术角度评价,以BD-PCR法为最优.结合D-EIA与BD-PCR的二步法检测方案,是对临床送检标本进行艰难梭菌感染检测的灵敏、特异、简便、快速、经济的检测方案.

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术及其在临床微生物鉴定中的应用

为满足临床日益增长的微生物鉴定需要，在不断提高微生物鉴定仪器的机械化与自动化的同时，微生物学家也试图寻找新的分离鉴定方法以满足临床需求。虽然这种探求从未停止，但目前在世界各地临床微生物实验室，传统的鉴定方法仍占绝对主导地位。