Survivin、Livin和NF-kB在大肠癌中的表达及影响探究

探讨大肠癌组织中Survivin,Livin和NF-kB的表达以及大肠癌细胞HT29增殖和凋亡受到siRNA沉默Survivin基因的影响。方法:回顾性选取2020年2月-2022年2月本院慢性肠炎组织50例、大肠癌(临床上无转移)组织50例,转移性大肠癌组织50例以上,共150例。统计分析慢性肠炎组织和大肠癌组织中Survivin,Livin和NF-kB表达,分析大肠癌组织中Survivin,Livin表达和临床病理特征的相关性,并统计分析Survivin-siRNA转染后1 d、2 d、3 d增殖抑制率及Survivin-siRNA转染后凋亡比例。结果 大肠癌组织中Survivin,Livin和NF-kB表达阳性率均高于慢性肠炎组织(P<0.05)。突破肌层患者大肠癌组织中Survivin,Livin表达阳性率高于未突破肌层患者(P<0.05),有淋巴结转移患者大肠癌组织中Survivin,Livin表达阳性率高于无淋巴结转移患者(P<0.05),Duke’s分期C+D期患者大肠癌组织中Survivin,Livin表达阳性率高于A+B期患者(P<0.05)。空白组、阴性对照组、Survivin-siRNA组、5-Fu 24 h组患者Survivin-siRNA转染后1 d、2 d、3 d增殖抑制率均逐渐升高(P<0.05),Survivin-siRNA转染后M1值逐渐升高(P<0.05)。结论 大肠癌组织中Survivin,Livin和NF-kB的表达阳性率高,大肠癌细胞HT29增殖和凋亡分别受到siRNA沉默Survivin基因的抑制和促进。

Pokemon调控Runx2表达促进大肠癌的侵袭转移机制研究

分析Pokemon调控Runx2表达在促进大肠癌侵袭转移方面的相关机制。方法 利用免疫组化、细胞培养、基因转染和敲减、qRT-PCR、WB、染色质免疫沉淀、分子克隆、双荧光素梅报告系统、动物实验及人体标本等实验研究Pokemon在大肠癌转移过程中对NF-kB/Snail通路的调控作用和机制。结果 空载对照组与Pokemon敲减组在侵袭活性之间存在明显的差异,组间比较两组穿过Matrigel胶及Transwell膜的细胞数,差异存在统计学意义。转染Runx2表达质粒后OR细胞中Runx2mRNA扩增水平与对照组之间存在明显差异,相应的水平明显高于对照组 (P<0.05)。在完成Runx2空载质粒转染之后,检测Runx2mRNA的相对表达水平,并与未经任何处理的KD细胞的表达情况进行组间比较,可得存在一定的差异,但差异不明显 (P>0.05)。最终的统计结果显示,空载质粒组与经瞬时转染Runx2质粒组在侵袭活性之间存在明显的差异(P<0.05)。OP细胞组与EEC细胞组在高表达Pokemon的细胞其侵袭活性方面存在明显差异,前者活明显增强,穿过Matrigel胶及Transwell膜的细胞数明显高于P.EC细胞组 (P<0.05)。观察并比较Western Blot检测瞬时敲减Runx2细胞Pokemon蛋白与Runx2蛋白的表达情况,结果显示,对两组细胞经同步化后培养,lovo-Runx2shRNA细胞中Runx2蛋白表达明显弱于NC组。经稳定敲减Rtmx2,统计Pokemon蛋白相对表达量,并与空载NC对照组实施组间对比,可得在Pokemon蛋白相对表达量方面的改变无明显差异(P>0.05),Runx2蛋白的相对表达量出现明显的下降 (P<0.05)。结论 Pokemon可以对Runx2的表达产生调控,激活Runx2表达促,进而促进大肠癌的侵袭转移。