厚中厚皮片游离移植修复下肢慢性溃疡创面

目的:探讨厚中厚皮片游离移植治疗下肢慢性溃疡创面的临床效果。方法:2016年1月-2018年12月,收治20例下肢慢性溃疡创面患者,切除肉芽创面基底纤维板层后,进行厚中厚皮片游离移植修复手术。结果:17例患者皮片完全成活,2例患者皮片出现少量水疱,1例患者皮片出现局部感染、坏死。术后随访6~12个月,下肢外观及功能恢复良好。结论:去除肉芽创面基底纤维板层,应用厚中厚皮片游离移植修复下肢慢性溃疡创面,可获得良好临床效果。

胆总管结扎诱导胆汁淤积性肝病促进肠道菌群的改变

目的观察胆总管结扎诱导胆汁淤积性肝病对小鼠肠道菌群的影响。方法体重18~22 g雄性C57BL/6J小鼠16只,采用简单随机分组方法,随机分为假手术组(n=8)和胆汁淤积性肝病组(CLD组,n=8)。术后两周取材,通过血清肝功能酶和肝脏组织染色评价肝脏功能。采用16S rRNA基因测序检测小鼠肠道菌群。样本数据采用未配对t检验。结果与假手术组比较,胆汁淤积性肝病组小鼠血清肝功能酶高于假手术组[ALT:(889.9±485.1)U/L比(42.4±15.3)U/L,t=4.885,P<0.01;AST:(1044.0±588.0)U/L比(117.4±17.1)U/L,t=4.406,P<0.01;ALP:(1228.0±540.8)U/L比(171.2±24.8)U/L,t=5.464,P<0.01;TBIL:(59.17±12.28)μmol/L比(14.51±4.60)μmol/L,t=9.892,P<0.01],且肝脏出现显著病理改变;小鼠肠道菌群ɑ多样性高于假手术组(Chao1指数:1819.0±172.6比1498.0±170.8,t=4.388,P<0.01),肠道菌群组成发生明显改变,厚壁菌门/拟杆菌门比率高于假手术组(0.542±0.321比0.093±0.057,t=5.866,P<0.01),差异主要包括毛螺杆菌科(0.198±0.099比0.056±0.039,t=4.574,P<0.01),瘤胃球菌科(0.076±0.057比0.018±0.011,t=4.102,P<0.05),乳酸杆菌科(0.041±0.023比0.003±0.003,t=4.574,P<0.01),理研菌科(0.027±0.014比0.004±0.004,t=4.597,P<0.01)的富集。结论胆汁淤积性肝病导致肠道菌群出现特征性变化。

高尔基体磷蛋白3通过整合素信号通路调控肝内胆管癌干细胞特性

目的探究高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)对肝内胆管癌干细胞特性的影响及其机制。方法利用TCGA数据库(35例胆管癌组织和9例正常组织)分析GOLPH3在胆管癌中的表达。免疫组织化学分析25例胆管癌根治手术患者癌组织和癌旁组织中GOLPH3的表达模式。将GOLPH3敲低质粒和对照质粒转入肝内胆管癌细胞系(HuCCT1),荧光显微镜和蛋白质印迹法(Western blot)验证转染效率。集落形成实验检测细胞增殖能力。肿瘤球形成实验和Western blot检测干细胞样特性。样本数据采用非配对t检验。结果TCGA数据库中胆管癌组织的GOLPH3表达高于正常组织(P<0.001)。敲低GOLPH3抑制了HuCCT1细胞的增殖能力和干细胞特性,对照组的细胞克隆数目高于敲低组[(175.72±16.04)个比(67.33±5.69)个,t=11.024,P<0.01];对照组的肿瘤球平均直径高于敲低组[(244.43±38.82)μm比(131.32±19.86)μm,t=4.593,P<0.01];单层细胞中对照组的SOX2蛋白表达水平高于敲低组(0.75±0.07比0.39±0.08,t=4.304,P<0.05);单层细胞中对照组的CD44蛋白表达水平与敲低组比较,差异无统计学意义(0.31±0.11比0.23±0.09,t=0.916,P>0.05);球形细胞中对照组的SOX2蛋白表达水平高于敲低组(0.85±0.04比0.54±0.02,t=12.357,P<0.01);球形细胞中对照组的CD44蛋白表达水平高于敲低组(0.81±0.09比0.57±0.06,t=7.841,P<0.05)。京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析和基因本体论(GO)注释提示GOLPH3的致癌作用与整合素通路激活有关。GOLPH3敲低后整合素(ITG)/局部黏着斑激酶(FAK)通路活性下降,单层细胞中对照组的ITGA2蛋白表达水平高于敲低组(0.70±0.07比0.42±0.09,t=30.404,P<0.01);单层细胞中对照组的ITGB1蛋白表达水平高于敲低组(0.68±0.10比0.42±0.04,t=6.735,P<0.05);单层细胞中对照组的p-FAK蛋白表达水平高于敲低组(0.61±0.04比0.39±0.04,t=22.084,P<0.01);球形细胞中对照组的ITGA2蛋白表达水平高于敲低组(0.82±0.08比0.56±0.05,t=13.485,P<0.01);球形细胞中对照组的ITGB1蛋白表达水平高于敲低组(0.85±0.06比0.64±0.03,t=6.672,P<0.05);球形细胞中对照组的p-FAK蛋白表达水平高于敲低组(0.77±0.11比0.51±0.08,t=9.019,P<0.05)。结论GOLPH3在肝内胆管癌中高表达,其致癌机制可能与整合素通路激活有关。