2010-2018年组织学与胚胎学教学研究论文发表情况分析

对2010-2018年组织学与胚胎学教学研究论文进行抽样,从研究方法、研究内容和研究质量三个方面进行文献分析,发现经验总结法仍然是当然主流的研究方法,其他定量研究方法的应用也在逐步增加。当前研究内容的热点集中在教学资源建设与现代教育技术应用领域,总体上教学研究质量仍然不高,今后应进一步把握研究方向,提高研究的科学性和创新性。

制作高质量小鼠胃组织石蜡切片的方法优化

目的:探讨胃组织石蜡切片制作方法及质量改进。方法:取30只健康小鼠,小鼠随机分为对照组1,实验组2和常规组,每组各10只,进行胃组织石蜡切片制作。实验组采用Heidenhain Susa固定液固定、四氢呋喃透明和蜡带展片法,对照组采用传统石蜡切片制作方法。结果:实验组A、B,优质片84张(70%)、中等片36张(30%)、没有次等片和不合格片;对照组无优良等级切片,中等级切片12张(20.04%),次等级切片28张(46.71%),不合格切片20张(33.33%)。实验组切片,结构完整,着色优于对照组。结论:改良后的石蜡切片质量有所提高,最大限度保持与活体组织结构相近完整。缩短实验时间,避免人为因素和其他因素,提高了石蜡切片的质量稳定性,值得推广应用。

白细胞介素37对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感性的增强作用

目的:通过将白细胞介素37(IL-37)基因转染到宫颈癌HeLa细胞中,探讨IL-37对宫颈癌细胞的杀伤作用及其对宫颈癌细胞化疗敏感性的增强作用。方法:将重组pIRES2-EGFP/IL-37质粒(IL-37组)和pIRES2-EGFP质粒(NC组)分别转染到HeLa细胞。Q-PCR和Western blotting法检测IL-37基因和蛋白表达水平;CCK8法检测NC组、IL-37组、顺铂(DDP)组及IL-37+DDP组细胞活性,计算细胞抑制率;RT-PCR法检测信号转导和转录激活因子3(STAT3)及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA表达水平。结果:与NC组比较,IL-37组IL-37mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。给药后24~72h,5~15mg·L-1 DDP组HeLa细胞活性受到明显抑制(P<0.01);与DDP组比较,IL-37+DDP组HeLa细胞抑制率在处理后48h内明显升高(P<0.05);与IL-37组比较,IL-37+DDP组HeLa细胞抑制率在处理后96h内均有升高(P<0.05)。与NC组比较,IL-37组STAT3和Cyclin D1mRNA表达水平明显下降(P<0.01)。结论:IL-37高表达可抑制宫颈癌细胞的增殖,并能增强DDP对宫颈癌细胞的放疗效果,这种效应的发挥可能与IL-37使STAT3和Cyclin D1表达下调有关。

酵母细胞自噬检测方法的研究进展

自噬可以在动物细胞的溶酶体或酵母和植物细胞的液泡中对细胞质成分进行降解,降解产生的小分子物质被再利用,维持细胞基本生理活动。以酵母为研究对象,细胞自噬启动的分子机制已被完整阐述,且检测细胞自噬活性的方法也得以精进。但相对于动物细胞自噬活性检测的方法而言,酵母细胞自噬检测方法有其优势和不足。本文旨在对几种酵母细胞自噬活性常用检测手段作一综述。

心脏转录因子NKX2.5与先天性心脏病的关系

先天性心脏病(congenital heart disease, CHD)是胎儿时期心脏血管发育异常所致的心血管畸形,也是最常见的新生儿畸形之一,其发病率约占出生活产婴儿的约1%。先天性心脏病也是儿童死亡的主要原因之一。已有的研究发现遗传因素在CHD发病中具有很重要的作用。NKX2.5是一个重要的心脏转录因子,在心脏的早期发育和成体心脏的维护中均起很重要的作用。已有较多研究报道NKX2.5基因突变导致房间隔缺损(atrial septal defect, ASD)、室间隔缺损(ventricular septal defect, VSD)和房室传导阻滞(atrioventricular block, AVB)等CHD表型产生。突变的NKX2.5的转录活性、DNA结合活性和核定位等功能发生改变,并影响NKX2.5下游基因的表达。我们将主要论述NKX2.5和CHD的关系,讨论NKX2.5突变引起CHD发生的可能机制。

慢病毒介导Wnt蛋白5a基因过表达对骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死大鼠的影响

目的探讨Wnt信号通路蛋白5a(Wnt5a)基因过表达对骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗心肌梗死的影响及分子机制。方法结扎雄性SD大鼠冠脉前降支制备心肌梗死动物模型,按数字表法分为实验组(40只)和假手术组(20只),4周后超声检测大鼠血流动力学指标变化;分离大鼠BMSC并在体外培养纯化,建立Wnt5a稳定沉默(sh-Wnt5a)和过表达的(oe-Wnt5a)BMSC细胞株,采用划痕实验检测Wnt5a沉默和过表达对细胞迁移能力的影响;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)技术检测心肌梗死大鼠模型组血清中胰岛素样生长因子1(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、干细胞因子(SCF)和肝细胞生长因子(HGF)的含量;BMSC移植治疗心肌梗死大鼠,实验共分4组:心肌梗死对照组,生理盐水组、BMSC组和oe-Wnt5a组。移植治疗4周后,超声检测血流动力学变化后取材大鼠心肌,冰冻切片、苏木精-伊红(HE)染色后检测大鼠心肌梗死的面积;采用蛋白质印迹法(Western blot)技术检测移植后大鼠心肌组织中Wnt5a、桩蛋白(Paxillin)、干细胞因子受体(C-KIT)、Ca2+依赖的蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)和钙敏感受体(CaSR)蛋白的表达,两组和多组间比较分别采用t检验和单因素方差分析。结果 (1)成功建立Wnt5a稳定沉默和过表达的BMSC细胞模型。sh-Wnt5a组细胞迁移率显著低于对照组(6.67±1.02比18.71±3.02,t=6.542,P<0.01),oe-Wnt5a组细胞迁移率显著高于对照组(43.33±7.95比18.71±3.02,t=5.014,P<0.01)。(2)ELISA结果显示,BMSC组及oe-Wnt5a组的血清中IGF-1、VEGF、SCF和HGF的浓度明显高于心肌梗死组[(5 473.20±474.55)、(1 237.85±173.90)、(548.09±77.06)、(136.14±37.41) pg/ml比(3 799.20±384.99)、(652.32±95.34)、(352.78±65.89)、(62.92±12.93) pg/ml,t=4.745、5.114、3.337、3.204,P<0.05];oe-Wnt5a组的血清中IGF-1、VEGF、SCF和HGF的浓度明显高于BMSC组[(6 264.31±498.87)、(1 445.75±179.58)、(663.22±79.71)、(238.15±62.09) pg/ml比(5 473.20±474.55)、(1 237.85±173.90)、(548.09±77.06)、(136.14±37.41) pg/ml,t=3.990、5.441、3.799、3.437,P<0.05]。(3)移植治疗4周,大鼠心功能血流动力学有所改善。BMSC组的Wnt5a、Paxillin、C-KIT、和CaSR蛋白显著高于心肌梗死组(33.37±7.34、86.71±13.12、57.67±11.23、96.45±11.45比14.19±5.26、61.62±10.76、26.81±7.89、64.01±7.75,t=3.679、3.561、3.895、4.064,P<0.05);oe-Wnt5a组的Wnt5a、Paxillin、C-KIT、CAMKⅡ和CaSR蛋白表达显著高于心肌梗死组(60.33±10.12、90.22±15.42、86.44±12.45、73.30±11.34、108.69±14.43比14.19±5.26、61.62±10.76、26.81±7.89、47.66±9.87、64.01±7.75,t=7.007、2.635、7.007、2.954、4.725,P<0.05)。Wnt5a和C-KIT蛋白表达显著高于BMSC组(60.33±10.12、86.44±12.45比33.37±7.34、57.67±11.23,t=3.735、2.972,P<0.05)BMSC组和Oe-Wnt5a的心梗面积小于心肌梗死组(20.98±1.46、14.14±3.11比32.79±3.96,t=4.825、6.415,P<0.05),Oe-Wnt5a组的梗死面积小于BMSC组(14.14±3.11比20.98±1.46,t=3.448,P<0.05)。结论 Wnt5α基因过表达能有效促进BMSC的迁移及细胞因子的表达,过表达Wnt5a的BMSC移植治疗心肌梗死大鼠比单独移植BMSC疗效更显著。

低氧对小鼠成纤维细胞糖酵解11个关键酶基因的表达影响

目的:检测低氧诱导24h后小鼠成纤维细胞L929中糖酵解过程中11个关键酶基因(Pgk1,Hmox1,Hk2,Gpi1,Pfkl,Pfkp,Aldoa,Gapdh,Pgam1,Eno1和Ldha)mRNA的表达变化。方法:L929细胞分别在20%O2和1%O2浓度下培养24h后收集细胞,提取总RNA,安捷伦mRNA芯片检测表达基因表达,分析以上11个关键酶基因的表达情况。结果:与对照组相比,低氧诱导后糖酵解关键酶基因的表达均上调,倍数改变在1.20-5.85之间,其中显著改变的基因有4个(Hmox1,Pfkl,Ldha和Hk2)。结论:低氧条件下小鼠成纤维细胞的糖酵解关键基因表达上调。