蜘蛛香不同提取物抗轮状病毒的作用研究

目的研究蜘蛛香不同提取物抗轮状病毒(Rotavirus,RV)的作用。方法采用RV-Wa株感染MA104细胞模型,MTT染色法测定病毒抑制率,考察蜘蛛香水提物、70%乙醇提取物(ZZX-1)及90%乙醇提取后经大孔吸附树脂法纯化所得提取物(ZZX-2)体外抗RV的作用;采用免疫荧光和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测RV结构蛋白VP6的表达变化,验证蜘蛛香抗RV作用;采用RV-Wa株感染Caco-2细胞,qRT-PCR检测蜘蛛香对神经营养因子GDNF、紧密连接蛋白ZO-1和促炎因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)]的影响。结果蜘蛛香水提物无抗RV的作用;蜘蛛香醇提物ZZX-1和ZZX-2具有抗RV生物合成作用。免疫荧光和qRT-PCR实验结果表明,ZZX-1和ZZX-2均能够抑制VP6蛋白的合成以及降低VP6 mRNA的表达,抑制RV的合成。与RV组相比,ZZX-1和ZZX-2能够显著提高GDNF、ZO-1 mRNA的相对表达量(P<0.001或0.01),降低TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA的相对表达量(P<0.0001或0.001)。结论蜘蛛香醇提物ZZX-1和ZZX-2具有抗RV生物合成作用,可能通过提高GDNF、ZO-1基因表达,降低炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的基因表达发挥抗RV感染作用。

积雪草酸对小鼠骨折愈合的影响研究

目的:探讨高低2种剂量积雪草酸对小鼠骨折愈合的影响。方法:对36只12周龄C57小鼠麻醉后行右侧股骨骨折术。骨折术后实验分为3组,每组12只,分别是:空白对照组,给予生理盐水(0.2 mL)每周2次皮下注射;低剂量积雪草酸组,给予低剂量积雪草酸水溶液(5μg/g,0.2 mL)每周2次皮下注射;高剂量积雪草酸组,给予高剂量积雪草酸水溶液(15μg/g,0.2 m L)每周2次皮下注射。术后给药前和给药后8周行右下肢X线摄像。给药后8周进行取材,行微型计算机断层扫描分析、三点弯曲力学测试和脱钙骨组织形态学分析。结果:经过8周治疗后,各组均呈现不同程度愈合。X线影像结果提示,空白对照组和低剂量积雪草酸治疗组骨痂生长不完全,高剂量积雪草酸治疗组骨痂形成较完整,骨小梁密度均匀;微型计算机断层扫描分析定量结果显示,与空白对照组相比,低剂量积雪草酸治疗组骨组织体积百分数和骨密度分别升高13.0%(P=0.264)或7.6%(P=0.215),而高剂量积雪草酸组骨组织体积百分数和骨密度分别升高28.3%(P=0.020)或15.8%(P=0.009)。股骨生物力学结果提示,与空白对照组相比,积雪草酸治疗有助于提高股骨生物力学性能,低剂量组最大载荷和杨氏模量分别增加26.37%(P=0.025)和10.00%(P=0.183),高剂量组最大载荷和杨氏模量分别增加42.89%(P=0.007)和25.19%(P=0.035)。形态学结果提示,空白对照组骨折端未完全愈合且矿化不完全,接受高低2种剂量积雪草酸治疗的骨折区矿化完全,高剂量组骨组织修复效果较为理想。结论:高剂量积雪草酸有助于加速小鼠股骨骨折骨化和愈合,并提高其生物力学性能。

15例艾滋病相关进行性多灶性白质脑病临床特点分析

目的探讨艾滋病相关进行性多灶性白质脑病(progressive multifocal leukoencephalopathy,PML)的临床特点。方法回顾性分析2021年5月—2022年5月贵阳市公共卫生救治中心感染科收治的15例通过宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing,mNGS)诊断为艾滋病相关PML患者临床资料,分析其临床特点。结果15例艾滋病相关PML患者中,男性12例,女性3例;年龄为(40.8±11.45)岁。CD4^(+)T淋巴细胞计数中位数为59(36.5,131.0)个/μl,CD4^(+)T/CD8^(+)T中位数为0.14(0.06,0.29)。HIV RNA最低小于监测值下限,最高为1.21×10^(6)拷贝/ml。脑脊液JCV DNA序列数为1—12950,中位数为94;格拉斯评分:9~15分。15例患者从HIV感染确诊到PML确诊中位时间为30(29.5,65.0)d;总体中位生存时间为195(59.5,330.0)d;死亡患者中位生存时间为21(19.0,46.0)d。使用基于多替拉韦的患者中位生存时间为237.5(39.75,309.75)d,使用其他抗反转录病毒治疗方案治疗的患者中位生存时间为189.0(120.0,387.0)d。表现为对侧肢体无力、运动障碍6例,共济失调3例,言语含混3例,视物模糊2例,记忆减退1例。磁共振表现:任何部位均可出现异常信号影。15例患者中1例失访,5例死亡,其余9例均存活,存活的患者其中4例症状好转,4例进展恶化,1例未见好转。结论艾滋病相关PML较为少见,在临床表现、脑脊液常规检测结果和影像学表现的基础上,应用脑脊液mNGS技术有助于诊断PML,且强效、早期、规律抗病毒治疗能改善患者预后。

Amorphigenin联合顺铂对人肺腺癌A549/DDP细胞的协同抗肿瘤作用

背景与目的 Amorphigenin是从紫穗槐属植物的种子中分离提取的鱼藤酮类化合物,研究发现amorphigenin对多种肿瘤细胞具有增殖抑制作用。本研究拟探讨amorphigenin对人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP的抗肿瘤作用及其可能的分子机制。方法采用CCK-8法测定A549/DDP细胞的增殖;克隆形成实验测定A549/DDP细胞的克隆形成;流式细胞术检测细胞的凋亡率;Western blot技术检测caspase-3、PARP和LRP蛋白的表达。结果 Amorphigenin可抑制A549/DDP细胞的增殖48 h[半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))]为(2.19±0.92)μmol/L、抑制克隆形成及诱导细胞凋亡。此外,Amorphigenin与顺铂联合可协同地抑制A549/DDP细胞生长和促进凋亡;降低耐药蛋白LRP蛋白的表达。结论 Amorphigenin可抑制A549/DDP细胞增殖和促进细胞凋亡;amorphigenin可能是通过抑制耐药蛋白LRP蛋白表达,进而与顺铂对A549/DDP细胞产生协同抑制作用。

异丁酰紫草素通过PI3K/Akt/m-TOR通路靶向抑制结肠癌细胞增殖的研究

探讨异丁酰紫草素对结肠癌细胞体外生长抑制作用及其对PI3K/Akt/m-TOR通路的影响。MTT法检测不同浓度（0,6.25,12.5,25,50,100 mg·L^（-1））异丁酰紫草素处理人结肠癌HT29细胞24,48 h的增殖抑制率;CCK-8法检测异丁酰紫草素作用人结肠癌细胞HT29,HCT116,DLD-1,Caco-2 48 h的增殖抑制率;Annexin V/PI双标记流式细胞术检测24,48 h异丁酰紫草素对HT29细胞凋亡的影响;细胞周期检测试剂盒检测48 h异丁酰紫草素对HT29细胞周期变化的影响;Western blot及RT-PCR法检测异丁酰紫草素对HT29细胞PI3K,p-PI3K,Akt,pAkt,m-TOR蛋白水平和mRNA水平的变化。结果显示,异丁酰紫草素可抑制人结肠癌细胞生长、增殖,抑制率呈浓度依赖性;异丁酰紫草素促进细胞凋亡,且主要集中在早期凋亡,阻滞细胞于G0/G1期或G2/M期;异丁酰紫草素浓度依赖性下调HT29细胞PI3K,p-PI3K,Akt,p-Akt,m-TOR蛋白及PI3K,Akt,m-TOR mRNA水平。结果表明,异丁酰紫草素能显著抑制人结肠癌细胞增殖,诱导早期凋亡,改变细胞的周期分布,这种生物学效应可能与PI3K/Akt/m-TOR信号通路受到抑制有关。