“以学生为中心”构建创新型病原生物学与免疫学实验教学体系

目的 研究适合培养医学本科生创新能力的实验教学体系。方法 围绕“以学生为中心”的宗旨,通过整合实验教学内容,优化实验教学方法和教学手段,完善实验考核体系,以学生成绩分析和问卷调查评估教学效果。结果 观察组学生成绩明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。问卷调查显示,70.00%以上学生认为该教学体系能激发自身的学习兴趣,有利于提高动手能力和培养创新思维能力,教学效果良好。结论 “以学生为中心”的实验教学模式能够创造有利于学生主动求知的学习环境,提高学生分析问题、解决问题的能力。

基于实际的临床微生物学检验实验教学改革探讨

临床微生物学检验实验课是临床微生物学检验教学计划中的重要环节。广东医科大学根据多年经验和临床实际,从根据学生专业及毕业后从事工作的特点针对性选择实验课内容,以临床实际为参照安排实验顺序和上课方式,尽可能多带学生到检验科见习以改变传统封闭性教学模式,加强学科之间的相关性和交叉性以达到培养学生临床思维能力的目的,培养学生的沟通能力和团队精神等方面进行改革,以满足临床科室用人需求和适应检验学科的发展。

案例教学法联合问题-探究式教学模式在医学微生物学实验课中的应用

目的探讨案例教学法联合问题-探究式教学模式在医学微生物学实验课中的应用及效果。方法选择该校2017级临床医学专业本科生8个小班,将其随机分为观察组和对照组,每组4个小班。观察组采用案例教学法联合问题-探究式教学模式进行微生物学实验课教学,对照组采用常规授课模式进行教学。同时采用该校自制的调查表调查上课的效果。结果观察组赞同上课方法、觉得学以致用、提升科研能力、提升团队合作能力、提升创新能力、促进学习主动性的构成比均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组实验操作分数、实验理论考试分数和总分数均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论案例教学法联合问题-探究式教学模式可提升医学微生物学实验课的授课效果。

降钙素原、D-二聚体、N-末端脑钠肽前体对重度慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者预后的意义

目的:探讨降钙素原、D-二聚体、N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)对重度慢性阻塞性肺疾病急性加重期(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease,AECOPD)患者预后的意义。方法:回顾性分析102例重度AECOPD的临床资料。根据患者预后情况分为预后不良组(36例)和预后良好组(66例),检测对比两组的降钙素原、D-二聚体和NT-proBNP,采用logistic回归分析进行多因素分析,并以ROC曲线评价预后预测价值。结果:预后不良组降钙素原、D-二聚体、NT-proBNP的浓度均明显高于预后良好组(P<0.01)。降钙素原、D-二聚体和NT-proBNP在logistic回归分析中的P值均<0.05。降钙素原、D-二聚体和NT-proBNP的AUC分别为0.743、0.778、0.708(P<0.01)。降钙素原联合D-二聚体、降钙素原联合NT-proBNP、D-二聚体联合NT-proBNP的AUC分别为0.847、0.815和0.798(P<0.01)。3项指标联合检测的AUC为0.862(P<0.01)。结论:降钙素原、D-二聚体和NT-proBNP均是重度AECOPD预后不良的独立危险因素,并在重度AECOPD预后预测中均有一定的价值,其中三者联合检测的预后预测效能最高。

湛江地区老年慢性化脓性中耳炎患者主要病原菌分布及耐药性

目的探讨湛江地区老年慢性化脓性中耳炎患者病原菌分布及药敏分析。方法选择378例老年慢性化脓性中耳炎患者,对耳分泌物进行病原菌分离培养和药敏试验,并对检测结果进行分析。结果 378例耳道分泌物标本中,371例培养出病原菌,其中细菌315例(84.91%),真菌48例(12.94%),无菌生长8例(2.16%)。363株病原菌中革兰阳性菌164株(45.18%),其中金黄色葡萄球菌最多(21.83%);革兰阴性菌151株(41.60%),主要为铜绿假单胞杆菌(18.33%);真菌48株(13.22%),其中黄曲霉菌最多(3.77%)。药物敏感试验发现金黄色葡萄球菌对喹若酮类药物、万古霉素、庆大霉素、苯唑青霉素敏感性较高;表皮葡萄球菌对万古霉素、庆大霉素敏感性较高。对铜绿假单胞菌与变形杆菌进行药物敏感试验发现,铜绿假单胞菌对美洛培南、哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素敏感性较高;变形杆菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟、美洛培南、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素敏感性较高。结论湛江地区老年慢性化脓性中耳炎耳分泌物病原菌以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌为主,且对抗菌药物敏感性不同,因此临床治疗应根据致病菌及药敏分析结果选择适当药物。

AECOPD患者呼吸道EC耐药性及感染MREC的危险因素

目的探讨慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者呼吸道的阴沟肠杆菌(EC)耐药性及感染多重耐药EC(MREC)危险因素。方法从AECOPD患者呼吸道中分离96株EC。采用全自动微生物分析仪测定EC药物敏感性,采用酶提取物三维试验法检测AmpC酶,统计总体EC、MREC、AmpC酶阳性EC在各级COPD中的分布情况,采用多因素Logistic回归分析感染MREC危险因素。结果MREC占33.3%(32株)。阿米卡星、头孢他啶、复方新诺明、左氧氟沙星、四环素、氯霉素在MREC组中的耐药率均明显高于耐药组(均P<0.05)。AmpC酶的检出率为29.2%(28株),AmpC酶阳性EC对头孢他啶、左氧氟沙星、氯霉素的耐药率均高于AmpC酶阴性EC(均P<0.05)。AmpC酶阳性EC、MREC、AmpC酶EC阳性+MREC在Ⅰ~Ⅱ级COPD的构成比明显低于Ⅲ~Ⅳ级COPD(均P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,"AmpC酶阳性"、"超广谱β-内酰胺酶阳性"和"COPD临床严重程度分级≥Ⅲ级"(均P<0.05)。结论感染AECOPD患者EC的耐药性严重,特别是MREC和AmpC酶阳性EC的耐药形势更是不容乐观。各种EC主要感染COPD临床严重程度分级≥Ⅲ级的患者。"AmpC酶阳性"和"超广谱β-内酰胺酶阳性"、"COPD临床严重程度分级≥Ⅲ级"是AECOPD患者感染MREC的独立危险因素。

临床路径联合动态监测降钙素原水平在慢性阻塞性肺疾病急性加重患者中的应用

目的探讨临床路径联合动态检测降钙素原在慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)中的应用价值。方法120例AECOPD患者随机分为对照组和观察组,分别采用临床路径治疗或临床路径联合动态监测降钙素原水平进行治疗。比较两组疗效、抗菌药物使用、住院时间、住院费用、临床路径变异情况。结果与对照组比较,观察组近期疗效较好,抗菌药物使用及疗程、住院时间、住院总费用较少(P<0.05或0.01)。结论临床路径联合动态监测降钙素原可提高AECOPD近期疗效,优化抗菌药物使用,缩短住院时间,降低住院费用。

纤维支气管镜肺泡灌洗联合局部抗生素治疗机械通气卒中相关性肺炎的效果观察

目的探讨纤维支气管镜肺泡灌洗联合局部抗生素在机械通气卒中相关性肺炎(SAP)中的应用价值。方法选择2018年9月至2020年9月廉江市人民医院收治的机械通气SAP患者108例为研究对象,采用随机数字表法分为对照组和观察组。对照组采用纤维支气管镜肺泡灌洗治疗,观察组采用纤维支气管镜肺泡灌洗联合局部抗生素治疗。统计比较两组的炎症指标、呼吸功能指标和不良反应。结果两组治疗3 d后的CRP、PCT、TNF-α浓度均明显低于治疗前(P<0.05)。观察组治疗3 d后的CRP、PCT、TNF-α浓度均明显低于对照组(P<0.05)。与治疗前比较,两组治疗7 d后的氧合指数明显高,PaCO2和Raw均明显低(P<0.05)。与对照组比较,观察组治疗7 d后的氧合指数明显高,PaCO2和Raw均明显低(P<0.05)。两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论纤维支气管镜肺泡灌洗联合局部抗生素治疗机械通气SAP可提高抗炎效果,加快呼吸功能恢复。

慢性鼻-鼻窦炎伴或不伴鼻息肉患者中金黄色葡萄球菌的耐药特点及MRSA感染的危险因素分析

目的探讨慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)或不伴鼻息肉(CRSsNP)患者中金黄色葡萄球菌(SA)的耐药特点及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染的危险因素。方法收集CRSwNP和CRSsNP分离的SA各100株,用全自动微生物分析仪测定SA药物敏感性,多因素Logistic回归分析MRSA感染的危险因素。结果MRSA在CRSwNP和CRSsNP中分离率的差异无统计学意义(P>0.05)。CRSwNP中MRSA对环丙沙星和左氧氟沙星耐药率明显高于CRSsNP(P<0.05),而克林霉素低于CRSsNP(P<0.05)。CRSwNP感染MRSA的独立危险因素是鼻部解剖变异、抗菌药物使用时间>14d、手术次数>1次和男性,而CRSsNP为鼻部解剖变异、抗菌药物使用时间>14d、变应性鼻炎和男性(P<0.05或0.01)。结论CRSwNP和CRSsNP中MRSA对环丙沙星、左氧氟沙星和克林霉素耐药性存在明显差异;鼻部解剖变异、抗菌药物使用时间>14d和男性均是两者感染MRSA的独立危险因素。

深圳地区急性上吸呼道感染住院患儿人偏肺病毒感染现状及基因分析

目的了解深圳地区急性上呼吸道感染(acute upper respiratory tract infection,AURTI)住院患儿人偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)的感染现状及hMPV优势亚型的流行情况。方法收集2015年6月～2016年6月在深圳市龙华区人民医院和福田人民医院因ALRTI住院的患儿鼻咽吸取物或咽拭子标本1720份,同时收集同期健康儿童呼吸道标本6 0份,采用Qiagen One-step RT-PCR法对标本中的hMPV进行筛检,并随机选取6例hMPV阳性标本采用CEQ8800测序仪对扩增产物进行正反测序,采用BLAST软件将测序所得的基因序列与GenBank中的代表株进行序列比对分析。结果 1 720例AURTI住院患儿的鼻咽吸取物或咽拭子标本共检出hMPV阳性标本362例,阳性率为21.05%(362/1720),其中男童阳性率为10.06%(173/1720),女童阳性率为10.99%(189/1720),不同性别患儿阳性率的差异无统计学意义(χ~2=0.917,P>0.05),而健康儿童hMPV全为阴性;<1岁组AURTI住院患儿hMPV感染阳性率为3 1.4 6%,明显高于其他组,差异有统计学意义(χ~2=6.105～11.97 3,P(0.05～0.01);1～3月AURTI住院患儿感染hMPV阳性率最高为4 9.7 4%,明显高于其他月份,差异有统计学意义(χ~2=7.927～1 5.038,P<0.05～0.01);6株hMPV阳性毒株的病毒核苷酸与代表株同源性为91.0%～100.0%;6株hMPV阳性毒株分别属于A2b和B1及B2亚型。结论 hMPV是引起深圳地区AURTI住院患儿感染的主要病原之一,好发于冬春季节和1岁以下儿童,且同时存在A和B两个基因型流行。

临床路径联合监测降钙素原在成人社区获得性肺炎中的运用研究

目的探讨临床路径(CP)联合监测降钙素原(PCT)在成人社区获得性肺炎(CAP)中的运用价值。方法采用随机数字表法把100例成人CAP患者分为观察组和对照组,各50例。对照组采用CP治疗,观察组采用CP联合监测PCT治疗。统计比较两组的疗效、主要症状体征消失时间、抗生素使用指标、主要住院费用、住院时间和满意度。结果观察组的疗效明显好于对照组(P<0.05)。观察组主要症状体征消失所需要的时间、使用抗生素比例、抗生素疗程和抗生素费用等均明显少于对照组(P<0.05)。观察组的药费和总住院费等明显低于对照组(P<0.05)。观察组的住院时间明显短于对照组(P<0.05)。观察组的患者、家属和医生满意度均明显高于对照组(P<0.05)。结论 CP联合监测PCT可提高成人CAP的疗效,同时可优化抗生素的使用,降低住院费用和提高满意度。

根除幽门螺杆菌对帕金森病患者的运动功能、认知功能及日常生活活动能力的影响

目的探讨根除幽门螺杆菌(Hp)对帕金森病(PD)患者的运动功能、认知功能及日常生活活动能力的影响。方法选择2015年1月至2016年8月湛江市第二人民医院神经内科收治的Hp阳性患者88例,采用随机数表法将患者分为观察组和对照组,每组44例。对照组仅给予左旋多巴/苄丝肼片治疗,疗程为3个月。观察组给予左旋多巴/苄丝肼片联合根除Hp治疗,疗程为14 d。根除Hp疗程结束1个月后统计Hp根除成功率。采用帕金森病统一评分量表(UPDRS)、UPDRSⅢ、Hoehn-Yahr(H-Y)分级表、UPDRSⅣ、蒙特利尔认知评估量表、Barthel指数分别评估两组患者的疗效、运动功能、治疗并发症、认知功能和日常生活活动能力。结果 Hp根除率为84.09%。观察组患者的治疗总有效率为86.49%,明显高于对照组的63.64%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者的UPDRSⅢ评分、H-Y分级和UPDRSⅣ评分分别为(22.36±8.67)分、(2.30±0.54)级和(2.62±0.61)分,均明显低于对照组的(26.55±9.16)分、(2.59±0.49)级和(3.19±0.63)分,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗1年后,观察组患者的视空间与执行功能、命名、注意力、语言、抽象能力和延迟回忆的评分分别为(4.08±0.26)分、(2.55±0.17)分、(4.12±0.72)分、(2.58±0.66)分、(1.68±0.15)分和(3.49±1.14)分,均明显高于对照组的(3.91±0.32)分、(2.36±0.15)分、(3.74±0.68)分、(2.22±0.75)分、(1.60±0.13)分和(2.95±1.06)分,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者的临床满意率为78.38%,明显高于对照组的54.55%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论根除Hp可提高帕金森病的疗效、运动功能、认知功能和日常生活活动能力,同时可减少治疗并发症。

降钙素原在儿童社区获得性肺炎使用抗生素中的应用价值

目的探讨降钙素原(PCT)在儿童社区获得性肺炎(CAP)使用抗生素中的应用价值。方法选取收入住院治疗的儿童CAP 84例,采用随机数字表法把患儿分为观察组和对照组各42例。观察组依据PCT的浓度使用抗生素;对照组依据《抗菌药物临床应用指导原则(2015年版)》,和经验使用抗生素。统计两组的抗生素使用情况,抗生素处方使用率、治疗后情况、住院时间、住院费用和疗效。采用卡方检验和t检验分析数据。结果观察组使用抗生素构成比、抗生素使用天数、两种抗生素联合构成比、抗生素不良反应构成比、抗生素费用、住院时间和住院费用均明显少于对照组(P<0.05);在治疗第1、3、5天时,观察组的抗生素处方使用率均明显低于对照组(P<0.05)。在观察组中,治疗第5天后的抗生素处方使用率出现明显下降,而在对照组中是治疗后第7天;两组疗效和临床症状消失时间的差异均没有统计学意义(P>0.05)。结论以PCT指导儿童CAP抗生素使用的策略既不影响疗效,又可以有效减少抗生素使用率、抗生素不良反应、抗生素费用、抗生素疗程、住院时间和住院总费用。

破伤风梭菌芽孢玻片标本制作的改进及体会

目的:探讨破伤风梭菌芽孢玻片标本制作的改进及体会。方法:采用2种方法制作破伤风梭菌芽孢玻片标本,传统方法:采用疱肉汤培养基培养破伤风梭菌48h后进行芽孢染色;改进方法:采用自制的血清葡萄糖培养基和圆底立式厌氧培养袋培养破伤风梭菌48h后生理盐水浸泡细菌,随后采用结晶紫、卢戈碘和95%酒精染色。结果:传统方法制得的标本背景脏,芽孢结构不清晰,在一个视野里细菌芽孢极少。改进方法制得的标本背景清洁,形态结构完整清晰,在一个视野里几乎所有细菌都有芽孢形成,芽孢经过染色后芽孢内部为无色空泡,呈典型鼓槌状。结论:改进方法制作的标本片背影清晰,芽孢形态结构完整,易于观察,效果较好。

荧光免疫法、ELISA法与PCR在婴幼儿腹泻常见病毒检测中的价值

目的探讨荧光免疫法、酶联免疫吸附试验(ELISA)法与聚合酶链式反应(PCR)检测婴幼儿腹泻常见病毒的结果与一致性。方法对急性腹泻婴幼儿61例分别用荧光免疫法、ELISA法、PCR技术对患儿粪便标本中肠道腺病毒、轮状病毒、星状病毒及诺如病毒抗原进行检测。结果荧光免疫法肠道腺病毒、轮状病毒、星状病毒及诺如病毒抗原阳性检出率分别为11.48%、11.48%、6.56%及13.11%;ELISA法上述病毒抗原阳性检出率分别为1.64%、27.87%、13.11%及29.51%,PCR上述病毒抗原阳性检出率分别为26.23%、1.64%、1.64%、1.64%。荧光免疫法与ELISA法对比,轮状病毒、诺如病毒抗原阳性检出率差异均有统计学意义(P<0.05),对于轮状病毒两种方法检测结果有较好一致性;荧光免疫法同PCR对比,肠道腺病毒、诺如病毒抗原阳性检出率差异有统计学意义(P<0.05),对于轮状病毒及肠道腺病毒,两种方法检测结果有较好一致性;ELISA法与PCR对比,4种病毒抗原阳性检出率差异均有统计学意义(P<0.05),对于4种病毒,两种方法检测结果有较好一致性。结论 ELISA法与PCR对婴幼儿腹泻常见病毒检测一致性较高,在临床诊断中,可采用ELISA法进行初筛,再通过PCR进行确认,以提高诊断效率及准确性。

人偏肺病毒基因芯片检测方法的建立及初步应用

目的建立深圳地区人偏肺病毒(human metapneumovirus,hMPV)核苷酸的快速、特异和敏感的基因芯片检测方法,为hMPV检测和诊断提供有效的诊疗手段。方法针对hMPV病毒高度保守区域基因序列,应用引物设计软件Primer5设计hMPV的荧光PCR引物;应用探针设计软件Array Designer4.20设计hMPV的寡核苷酸检测探针,将寡核苷酸探针点样至醛基玻片上制备hMPV基因芯片,并与常规反转录酶-聚合酶链锁反应(RT-PCR)平行比较,对其灵敏度、特异度和重复性,以及用于临床样本的适用性等进行评价。结果 hMPV基因芯片法检测hMPV的特异度为96.23%(230/239),灵敏度可达2.0×10~1个/μl,线性范围为2.0×101~2.0×10~7个/μl,且重复性好;初步检测深圳地区300份临床鼻咽拭子标本,基因芯片法检出率为20.3%(61/300),明显高于常规RT-PCR法的9.7%(29/300),两方法检测的灵敏度之间差异有统计学意义(χ~2=39.205,P<0.05);两种方法检测结果一致性一般(kappa=0.360 7)。结论建立了hMPV基因芯片检测法,基因芯片法检测hMPV具有很高的特异度和灵敏度,且检测线性范围广,为实验室开展hMPV的流行监测和早期诊断提供了新的检测技术。

鲍曼不动杆菌临床流行病学特点及耐亚胺培南鲍曼不动杆菌感染的危险因素研究

目的:探讨鲍曼不动杆菌(AB)临床流行病学特点及耐亚胺培南鲍曼不动杆菌(IRAB)感染的危险因素。方法:收集2016-01-2017-08期间的非重复AB 100株。根据亚胺培南的药物敏感性结果,把AB分为IRAB组和亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌(ISAB)组。统计两组的临床科室分布、标本类型和危险因素,采用卡方检验和多因素Logistic回归分析数据。结果:61.00%(61株)的AB是IRAB。IRAB组对哌拉西林、头孢他啶、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、环丙沙星、左氧氟沙星、阿米卡星和庆大霉素的耐药率明显高于ISAB组(P<0.05)。62.30%(38株)的IRAB和35.90%(14株)的ISAB来源于ICU,78.69%(48株)的IRAB和56.41%(22株)的ISAB来源于痰液标本。住ICU>7d、侵入性操作、抗菌药物使用>7d、住院时间>30d和使用碳青霉烯类抗菌药物均是IRAB感染的独立危险因素。结论:AB的耐药形势严峻,IRAB更为严重。AB和IRAB主要来源于ICU和痰液标本。IRAB感染的独立危险因素众多。

粤西部分地区淋病奈瑟菌耐药性及mtrR基因突变特点研究

目的探讨粤西部分地区淋病奈瑟菌(NG)耐药性及mtrR基因突变特点。方法收集180株来源于粤西部分地区的NG。运用琼脂稀释法检测抗生素的最小抑菌浓度;采用荧光定量聚合酶链反应和测序分析对比两组mtrR基因的突变点。结果大观霉素(SP)和环丙沙星的敏感率分别100.00%和0。mtrR基因总突变率为48.33%(87株),其中A缺失占3.89%(7株)、H14R占11.67%(21株)、G45D占19.44%(35株)、F51V占8.89%(16株)和H105Y占4.44%(8株)。mtrR基因突变株的头孢曲松、四环素(TC)和阿奇霉素敏感率均明显低于mtrR基因正常株(P<0.05)。青霉素(P)耐药株mtrR基因的总突变率明显高于P中介株(P<0.05)。与TC耐药株相比,TC中介株G45D的发生率明显低,F51V的发生率明显高,mtrR基因的总突变率明显低(P<0.05)。结论在粤西部分地区,SP可作为治疗NG感染的首选药物。mtrR基因突变的NG容易产生耐药性,其中mtrR基因突变以G45D最为常见。

东莞1例牛带绦虫感染病例的诊治分析

目的对东莞1例本地感染带绦虫病例进行诊断和治疗。方法通过对患者排出的虫体样本进行形态学鉴定,结合患者临床表现及流行病学史调查进行诊断。结果2020年6月,广东医科大学病原生物学实验室接诊1例东莞市本地感染的带绦虫病患者(男,30岁),采用槟榔-南瓜子辅以硫酸镁进行驱虫治疗,排出一条长约5 m虫体,经实验室检查,鉴定为牛带绦虫。驱虫后5个月内3次随访复查,患者身体状况良好,无发现虫体或节体排出视为治愈。结论本例牛带绦虫感染病例是因生食或半生食含有囊尾蚴的牛肉所致。改变人群不良的卫生习惯和生活方式,加强肉制品检疫工作等综合治理措施,可有效阻断牛带绦虫的传播途径。