强光照致TgAPPswePS1转基因鼠视网膜功能障碍和结构损伤

目的初步研究在光照损伤作用下TgAPPswePS1转基因鼠视网膜结构和功能的改变情况。方法给予6月龄阿尔茨海默病转基因鼠(TgAPPswePS1鼠)10 000 lux光照处理,每天光照12 h,连续光照6个月,光照处理为实验组,设鼠龄匹配的转基因鼠为对照组,在光照6个月后(即小鼠12个月时)对实验组与对照组小鼠进行视网膜电图检测,取材并进行切片,行HE染色并观察视网膜各层结构改变,予以视网膜厚度测量并进行统计学分析。结果对照组Rod反应a、b波波幅分别为(18.33±3.53)μV、(107.58±14.72)μV,Max反应a、b波波幅分别为(64.80±7.57)μV、(178.76±14.47)μV;实验组光照6个月后小鼠视网膜电图Rod反应a、b波波幅分别为(17.92±4.89)μV、(21.83±5.51)μV,Max反应的a、b波波幅分别为(18.23±4.44)μV、(24.50±4.49)μV;与对照组比较,Rod反应的b波和Max反应的a、b波的波幅下降明显,差异均有统计学意义(均为P<0.05);在Rod和Max反应里a波和b波的潜伏期改变不明显。与对照组比较,经过光照处理后,实验组小鼠视网膜结构发生明显改变,以外核层与感光细胞外节明显,视网膜厚度明显变薄,为(102.34±9.38)μm,与对照组(181.32±13.47)μm比较差异有统计学意义(P=0.017)。结论高强度光照可以造成TgAPPswePS1鼠视网膜结构损伤和功能障碍。

高强度光照损伤致TgAPPswePS1转基因鼠脉络膜新生血管形成

目的研究在光照损伤作用下TgA PPsweP S1转基因鼠脉络膜新生血管形成情况。方法以20只6个月龄阿尔茨海默病转基因鼠(TgA PPsweP S1鼠)为研究对象,其中12只行10 000 lux光照处理,每天光照12 h、连续光照6个月为实验组,余8只不作处理为对照组,实验组与对照组小鼠在实验结束时进行取材,切片行HE染色及甲苯胺蓝染色观察视网膜各层结构改变,测量新生血管形成数量,同时检测实验组与对照组视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)铺片上β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)与血管内皮生长因子表达情况,予以定量并进行统计学分析。结果与对照组比较,光照6个月后,实验组小鼠视网膜发生明显改变,其中以外核层与光感受器层变化最明显;RPE细胞出现空泡、色素不均一、细胞间的连接断裂等改变,视网膜切片上可见脉络膜新生血管突破RPE进入视网膜内,对新生血管进行统计,发现脉络膜新生血管发生率为18.75%。光照损伤后,血管内皮生长因子在实验组RPE上呈阳性表达,可见细胞浆内弥散性表达和沿血管壁的阳性染色,较对照组表达量增加(6.59±1.14)倍,差异有统计学意义(P<0.05)。Aβ在实验组的RPE铺片上存在强阳性表达,通过Z-stack检测发现Aβ沉积类似Drusen状,位于RPE下;而对照组中未见此类免疫阳性反应,与对照组比较Aβ沉积增加(6.45±2.93)倍,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论强光光照损伤TgA PPsweP S1鼠后,视网膜存在明显变化,可发生脉络膜新生血管,提示阿尔茨海默病转基因鼠在光照损伤下可以作为脉络膜新生血管的一种动物研究模型。

TgAPPswePS1转基因鼠视网膜的功能损伤和Aβ斑块沉积

目的：初步研究TgAPPswePS1 转基因鼠眼内阿尔兹海默病（AD）相关的病理变化和视网膜功能改变，探讨淀粉样蛋白β（Aβ）对视网膜结构损伤的作用机制。方法：实验研究。选择月龄为24个月的老龄TgAPPswePS1 转基因小鼠为实验组，同月龄同种系野生型小鼠作为对照组，对2 组小鼠检测视网膜电图（ERG），再取眼球样本，制备切片。观察视网膜各层结构，用免疫组织化学法检测视网膜切片上的淀粉样前体蛋白（APP）和Aβ表达水平，并观察分布部位及分布形态特点，再测量视网膜厚度。各测量值比较采用Student＇s t检验进行统计学分析。结果：实验组的Rod的a波和b波波幅与对照组相比均存在下降，其中b波差异存在统计学意义（t=5.23，P=0.002）；实验组Max反应的a波和b波波幅与对照组相比均存在下降，差异均存在统计学意义（t=15.69、15.76，P＜0.001）。对照组和实验组视网膜切片各个层次均完整，未见明显缺失，实验组的厚度较对照组薄，但差异无统计学意义（t=1.85，P=0.087）。在对照组视网膜中，APP存在微弱的背景免疫阳性反应，在实验组视网膜神经节细胞及内颗粒层细胞内呈强阳性反应。Aβ在对照组视网膜中无免疫阳性反应，在实验组视网膜中存在强阳性表达，呈弥散性和斑块状沉积2种形态，斑块主要沉积在神经节细胞层、内丛状层、内核层以及光感受器层。结论：在老龄TgAPPswePS1 转基因小鼠视网膜上存在典型AD病理特征改变，视网膜厚度变薄，同时存在功能改变，提示视网膜上的病理改变可能是AD疾病视功能障碍的基础。