T315I基因突变的慢性髓性白血病临床特征及泊那替尼疗效

目的分析伴T315I突变的慢性髓系白血病(CML)的临床特征及不同治疗方法的疗效。方法回顾性分析19例行BCRABL KD突变检测T315I突变的CML患者的临床资料及不同治疗的预后,通过直接测序分析获得用于RTQ-PCR样品的BCRABL KD突变。用Sanger测序法对BCR-ABL KD突变进行测序。复发标准包括血液学复发、细胞遗传学复发和分子生物学复发。结果 19例CML-T315I患者,初诊时73.7%(14/19例)患者处于慢性期(CP),Sokal评分中高危患者占81.2%(13/16例)。19例患者初诊后均行酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗,病程中78.9%(15/19例)患者有附加染色体畸变,52.6%(10/19例)患者存在多重突变。68.4%(13/19例)的患者在疾病进展后(加速期/急变期)检测出T315I突变,从初诊到检测出T315I突变的中位期为40 m(5～120 m)。突变后12例行泊那替尼治疗(A组),7例选择传统化疗方案(B组)。A、B两组3年总生存率分别是83.3%和14.2%(P=0.001)。结论小样本回顾性研究发现对TKI耐药的CML患者易检出T315I突变,进展期检出率明显高于慢性期。此类患者往往合并附加染色体和多重基因突变,预后较差,即行异基因造血干细胞移植,复发率仍较高。泊纳替尼长期维持治疗,可能会改善预后,延长生存期。

成人急性B淋巴细胞白血病全基因组miRNA表达谱及其染色体分布

目的研究成人急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的miRNA表达谱及其基因在染色体上的分布特征。方法应用Illumina测序技术对15例成人B-ALL患者与10例非恶性血液病对照者骨髓样本的miRNA表达丰度进行对比分析,确定其表达差异及其基因在染色体上的分布情况,并通过q-PCR对部分测序结果进行验证。结果两组样本间差异表达的miRNA共291种,168种miRNA在B-ALL组呈表达上调,123种miRNA呈表达下调。两组miRNA基因在染色体上的分布趋于一致,但其表达丰度的分布却有明显的差异:B-ALL组主要分布于1、2、5和9号染色体,而对照组则主要分布于3、7、9、17和X号染色体。结论多种在成人B-ALL骨髓样本中呈异常表达的miRNA。

FISH技术检测骨髓异常综合征四种常见染色体异常

目的评估荧光原位杂交(FISH)技术在检测骨髓增生异常综合征(MDS)常见染色体异常中的价值。方法FISH方法检测47例新诊断MDS患者-5/5q-、-7/7q-、+8、-20/20q-染色体异常,并与15例染色体核型结果比较。结果 47例患者中,-5/5q-、-7/7q-、+8、-20/20q-染色体异常FISH方法总检出率44.7%,其中5q-最常见,其次是+8、-7/7q-,-20/20q-最少见。中期分裂相不足10个时,FISH法可提高染色体异常检出率;分裂相达10个以上,两种方法对上述染色体异常检测结果基本一致。结论本室FISH方法检测MDS患者-5/5q-、-7/7q-、+8、-20/20q-染色体异常总检出率与文献报道基本一致;染色体核型和FISH同时做,可提高MDS患者染色体异常检出率。

湛江地区3157例地中海贫血基因诊断结果分析

目的研究湛江地区地中海贫血(简称地贫)基因携带率、突变类型及分布频率。方法用多重Gap-PCR法结合低密度基因芯片-反向斑点杂交法检测常见α基因缺失,用PCR结合低密度基因芯片-反向斑点杂交法检测3种α点突变和17种β点突变。结果地中海贫血基因总检出率为42.41%,其中α、β、αβ复合型地中海贫血基因突变率分别为28.35%12.64%1.39%1 0.03%)SEA SEA、、,东南亚型缺失--合并稀有基因缺失检出例(。α地中海贫血基因分型主要为--、-βCD41-42 IVS-II-654αβ/αα3.7 4.2SEAα、-α;地中海贫血基因基因分型主要为、;复合型地中海贫血基因分型主要为--与41-42 3.7 41-42 SEAβ/β、-α/αα与β/β。结论本地区α、β地贫最常见基因突变分别为--、CD41-42。

急性单核细胞白血病全基因组微小RNA的表达谱分析

目的研究急性单核细胞白血病(AMo L)全基因组的微小RNA(mi RNA)表达谱。方法应用Illumina高通量测序技术对10例AMo L患者和10例非恶性血液病患者骨髓样本的mi RNA表达水平进行检测,分析两者的表达差异,并通过茎环引物实时荧光定量PCR(Stem-loop q PCR)技术对部分Illumina测序结果进行验证。结果两组样本共发现差异表达的mi RNA 285个,其中,199个mi RNA在AMo L组呈表达上调,86个mi RNA呈表达下调。6个mi RNA的Stem-loop q PCR验证结果与其测序结果具有相同的变化趋势。结论 mi R-126-3p和mi R-29b-3p可作为潜在的分子靶点用于AMo L发病机制的进一步研究。

棉酚肉桂酸酯的合成及抗白血病活性研究

棉酚8,8′-CHO是棉酚主要的毒性基团,棉酚醛基互变异构后,双醇酮式可与肉桂酸成酯,生成新的化合物细胞毒性作用减小,同时获得新的棉酚母核先导化合物.以棉酚与肉桂酸为原料,合成了未见报道的棉酚肉桂酸酯.通过1H-NMR、13C-NMR对合成的化合物进行了结构表征,并应用HL-60、Jurkat和K562这3种人类白血病细胞系,采用CCK-8法评价棉酚肉桂酸的体外抗白血病活性.CCK-8实验结果显示,棉酚肉桂酸酯对Jurkat细胞具有较强的抑制活性.棉酚双醇酮式能与肉桂酸反应生成新化合物棉酚肉桂酸酯,新化合物的细胞毒性作用减小,同时抗白血病活性较强,为进一步的药物设计与临床前研究提供了相应的理论和实验依据,为棉酚结构衍生化提供了新思路和新途径.

成人急性B淋巴细胞白血病微小RNA和转录因子的生物信息学分析

目的 构建成人急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)的miRNA-转录因子调控网络,发现新的核心调控因子。方法 综合运用miRNA测序、转录因子芯片结合生物信息学分析的系统生物学方法构建B-ALL的miRNA-转录因子调控网络,从中鉴定出调控模块和核心调控因子并对网络节点进行GO和Pathway分析。结果 在miRNA-转录因子调控网络中鉴定出535个调控模块(包括526个前馈环和9个反馈环)以及47个核心调控因子(包括28个核心miRNA和19个核心转录因子)。GO分析表明,网络节点主要参与了基因表达的正性调控、大分子代谢过程的正性调控、造血或淋巴样器官发育等10个生物学过程。Pathway分析表明,网络节点主要富集在癌症信号通路、癌症转录失调信号通路以及慢性髓性白血病信号通路等25个信号通路。结论 多种核心调控因子可能在B-ALL发病机制中起一定作用。

青少年股骨远端血管性血友病假瘤一例报告及文献复习

报告1例青少年股骨血管性血友病(von willebrand disease,VWD)3型假瘤。男,12岁,无明显外伤史下因右膝关节活动后乏力并疼痛2个月就诊。基因学检查在患者血管性血友病因子(von willebrand factor,VWF)基因发现两处复合杂合,关联疾病"VWD 3型"与患者临床表现吻合。实验室检查提示凝血因子Ⅷ(FⅧ)活性为2.8%,FⅧ抑制物检测阴性;进一步检测VWF活性为1%,去氨加压素输注试验(1 h和4 h)VWF<1%,VWF抗原<3%。影像学检查示右侧股骨远端干骺端有一个溶骨性病灶,股骨前方骨皮质吸收不连续,内、外侧及后方骨皮质变薄并可见明显的硬化带,远端瘤腔侵及股骨远端骨骺,未发现病变周围有骨膜反应。多学科会诊后诊断为青少年股骨VWD 3型假瘤。患者既往未规律补充凝血因子,膝关节无明显外伤史。术前通过输注冷沉淀维持VWF水平在80%以上,行病灶清理及自体腓骨、同种异体骨植骨术。术后随访至5个月,膝关节功能恢复良好。假瘤是遗传性出血性疾病一个罕见但严重的临床表现,多见于血友病患者。VWD的骨骼-肌系统假瘤罕见,以往仅有上、下颌骨假瘤的文献报道。MRI在血友病性假瘤诊断中有着非常重要的价值,增强扫描后显示周缘有强化而中央无强化,是血友病性假瘤的特征性表现。手术是治疗出血性疾病假瘤的首选,且是最彻底、有效的治疗方法。围手术期充分的准备是手术成功的前提,贯穿整个治疗过程的多学科会诊和制定个性化治疗方案具有重要作用。