利奈唑胺耐药粪肠球菌感染患者临床分离株与定植株同源性分析

目的研究1例患者体内利奈唑胺(LZD)耐药粪肠球菌临床分离株与定植株同源性特点。方法对1例肺部感染患者分离的10株粪肠球菌(其中2株分离自尿标本,8株分离自粪便标本)进行细菌耐药分析,并通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)确定粪肠球菌之间的同源性。结果患者进行LZD治疗前后,尿标本分离出的2株粪肠球菌均为LZD耐药株(MIC值分别为8 mg/mL,16 mg/mL),粪便中培养挑取的8株(治疗前6株,治疗后2株),其中LZD敏感4株,中介2株,耐药2株(MIC值波动在0.25~12 mg/mL)。通过PFGE分型检测提示10株粪肠球菌具有同源性。结论该例患者泌尿道和肠道检出的粪肠球菌具有同源性,提示LZD耐药肠球菌可能长期定植于患者体内,并可能发生移位导致耐药细菌感染。

利奈唑胺治疗反复发作脊柱术后植入物感染1例

脊柱术后植入物感染（spinal implant infection）属于难治性感染，需在系统分析患者基础状况、临床症状、影像学及实验室检查、病原菌类型及病原菌耐药谱的基础上，综合应用内外科治疗手段给予患者个体化治疗，治疗相对困难。治疗方法通常需要在静脉使用抗菌药物的基础上，联合外科清创、持续引流和内固定取出等外科治疗措施。部分患者可能造成内固定失败、局部愈合不良、神经功能障碍、假关节形成，甚至死亡等严重后果。本院于2014年10月—2015年2月诊治1例脊柱术后植入物感染反复发作患者，现将其诊断和治疗情况总结分析如下。

SAA与hs-CRP联合检测在孕妇呼吸道感染性疾病中的应用

目的探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)与超敏C反应蛋白(hs-CRP)联合检测在孕妇呼吸道感染性疾病诊疗中的临床应用价值。方法选取广东医科大学附属深圳南山区人民医院2015年4月至2016年4月258例呼吸道感染孕妇,按感染病因分为:细菌组84例、病毒组174例,31例孕期常规体检正常的孕妇作为健康对照组。胶体金法测定SAA的浓度,免疫层析法测定hs-CRP的浓度。结果三组全血中的SAA、hs-CRP水平比较有显著性差异(F值分别为62.93、241.30,均P<0.05),进一步每两组间比较,结果发现细菌组全血SAA和hs-CRP的增高程度明显比健康对照组高(t值分别为10.46、8.79,均P<0.05),病毒组全血SAA的浓度明显比健康对照组高(t=8.18,P<0.05),但全血hs-CRP浓度与健康对照组比较无明显差别(t=1.00,P>0.05);三组SAA、hs-CRP单独检测及联合检测阳性率比较有显著性差异(χ2值分别为132.30、202.46、229.62,均P<0.05),在细菌组中,SAA、hs-CRP两项联合检测阳性率最高(98.81%)。在病毒组中,SAA单项检测与两项联合检测阳性率比较无显著性差异(χ2=2.25,P>0.05),而hs-CRP单项与SAA单项检测阳性率比较,以及其两项联合检测阳性率比较有显著性差异(χ2值分别为150.01、154.01,均P<0.05);SAA、hs-CRP联合检测对细菌性感染诊断的敏感度为98.80%,特异度为100.00%。结论在鉴别孕妇呼吸道感染性疾病中,运用SAA、hs-CRP两项联合检测可作为一项重要手段之一,具有重要的临床意义。

肉毒毒素A对神经病理性疼痛小鼠施旺细胞髓鞘形成的影响

目的:观察不同给药途径的肉毒毒素A(Botulinum neurotoxin type A,Bo NT/A)对慢性坐骨神经缩窄性损伤(Chronic constriction injury,CCI)疼痛模型小鼠的镇痛效果;研究Bo NT/A对施旺细胞髓鞘标志蛋白以及调控髓鞘形成的转录因子表达的影响。方法:通过CCI建立神经病理性疼痛模型小鼠,并随机平均分成4组:生理盐水皮下注射(intraplantar injection,i.pl.)组、Bo NT/A皮下注射组、生理盐水神经旁注射(peripheral nerve injection,i.pn.)组、Bo NT/A神经旁注射组,此外设置未造模的空白对照组。在造模后第5天给药,测量不同时间点各组小鼠机械缩足阈值和热缩足潜伏期的变化。在术后14天和28天分别对Bo NT/A皮下注射组、生理盐水皮下注射组及空白对照组小鼠进行坐骨神经采样,应用蛋白印迹检测坐骨神经髓鞘相关蛋白MBP、P0、Krox-20及C-jun表达量的变化,应用免疫荧光技术检测坐骨神经P0的表达情况。结果:皮下注射或神经旁注射Bo NT/A均可增加神经病理性疼痛模型小鼠的机械缩足阈值和热缩足潜伏期(P<0.05)。Bo NT/A皮下注射组坐骨神经MBP、P0、Krox-20及C-jun表达量与生理盐水皮下注射组对比无显著性差异。结论:皮下注射和神经旁注射Bo NT/A均可改善神经病理性疼痛小鼠的机械痛敏和热痛敏,但皮下注射Bo NT/A不能促进神经病理性疼痛小鼠坐骨神经施旺细胞髓鞘的形成,提示Bo NT/A并不是通过促进髓鞘形成这一机制来促进运动功能恢复以及缓解神经病理性疼痛。

2例利奈唑胺中介粪肠球菌血流感染的毒力及耐药机制

目的对血流感染患者临床分离的利奈唑胺中介粪肠球菌的毒力因子及耐药机制进行初步研究。方法从2例血流感染患者血标本中分离2株利奈唑胺中介粪肠球菌,分析患者治疗经过,2株分离菌编号为A、B,测定其对利奈唑胺和万古霉素的最低抑菌浓度(MIC),采用聚合酶链反应(PCR)扩增毒力基因(esp、asa1、gelE、ace、agg、efaA、cylA、hyl)和利奈唑胺耐药相关基因,包括23SrRNA V区基因、cfr、cfr(B)及optrA基因片段,其中23SrRNA V区基因扩增产物送测序并分析有无突变位点。结果 2例患者培养出利奈唑胺中介粪肠球菌后均使用利奈唑胺治疗控制了临床症状。菌株A、B对万古霉素、替考拉宁、氨苄西林、呋喃妥因敏感,对利奈唑胺中介(MIC均为4μg/mL),对万古霉素敏感(MIC分别为1μg/mL和4μg/mL)。2株菌均含有多种毒力因子,菌株A仅cylA、hyl为阴性,菌株B仅hyl、esp为阴性,其余毒力基因均为阳性。菌株A的23SrRNA V区存在G2621T突变,菌株B未发现突变位点。菌株A和B耐药基因cfr、cfr(B)、optrA均为阴性。结论此研究中血流感染患者分离的利奈唑胺中介粪肠球菌对万古霉素和氨苄西林敏感,虽治疗结果提示利奈唑胺仍有效,但临床中选用利奈唑胺治疗需谨慎。靶位突变是该类药物重要的耐药机制,临床中治疗该类药物不敏感粪肠球菌感染需足够重视,其治疗策略仍需进一步探讨。

IL-6及SAA在新生儿败血症早期诊断中的应用

新生儿败血症起病急,病情进展快,是新生儿死亡的主要原因。由于无特异性表现,病原菌培养耗时长,常易被漏诊和误诊,耽误患儿的早期诊断和治疗,外周血白细胞计数、C-反应蛋白及降钙素原等炎性标志物在临床上早已应用广泛。本文主要对白细胞介素-6及血清淀粉样蛋白A在新生儿败血症的早期诊断中的研究进行综述。

碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌的毒力及多位点序列研究

目的:对临床分离的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)毒力因子及其分子分型进行初步研究。方法:收集广东医科大学附属深圳市南山区人民医院300例临床药敏试验提示美罗培南或亚胺培南耐药以及产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的肺炎克雷伯菌临床菌株,利用微量肉汤稀释法测定其对美罗培南和亚胺培南最低抑菌浓度(MIC)筛选CRKP临床菌株,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增毒力基因(rmpA、wabG、μge、fimH、mrkD、ycf、wcaG、entB、iroN、hly、cnf、aerobactin)。利用多位点序列分型技术(MLST)对菌株进行分子遗传学分析。结果:共筛选出45株CRKP临床菌株,临床抗菌药物敏感试验提示所有菌株仅对阿米卡星敏感性好。所有菌株都至少携带1个毒力基因。45株CRKP可成功分成21个ST型别,无优势ST型别CRKP流行。结论:本地区CRKP都携带多个毒力基因,具有基因多态性,主要ST型别为ST15、ST37和ST273。

TCT联合高危型HPV DNA检测在不能明确意义的鳞状上皮细胞病变的诊断价值

目的探讨薄层液基细胞学检查(TCT)诊断为不能明确意义的鳞状上皮细胞病变(ASCUS)患者联合高危型人乳头瘤病毒脱氧核糖核酸(High-risk HPV DAN,HR-HPV DNA)检测的诊断价值,同时比较未绝经组与绝经组的结果,科学指导临床绝经后女性宫颈癌筛查。方法回顾性分析我院在2015年9月～2016年6月行宫颈癌筛查的患者200例,所有患者均行TCT及HR-HPV DNA检测,其中诊断为ASC-US的患者99例,未见肿瘤细胞(NILM)101例;以病理活检为金标准,对比分析TCT联合HR-HPV DNA的诊断价值,同时分析其在绝经患者宫颈癌筛查中的价值。结果 TCT检测灵敏度为71.0%,特异度为72.0%,准确率为71.5%,阳性预测值为71.7%,阴性预测值为71.3%;TCT联合HR-HPV DNA检测灵敏度为89.0%,特异度为87.0%,准确率为88.0%,阳性预测值为87.3%,阴性预测值为88.8%;联合检测的灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值和阴性预测值均高于单项检测,差异有统计学意义(P<0.05)。绝经组与未绝经组比较,TCT联合HR-HPV DNA检测具有更高的阳性率(P<0.05)。结论 TCT联合HR-HPV DNA检测可显著提高临床宫颈癌筛查水平,尤其对于绝经后女性具有更高的诊断价值。

老年科医用织物污染情况调查与抗菌织物抑菌效果评价

目的探讨老年科医用织物的污染情况,并对抗菌织物的抑菌效果进行评价。方法自2016年12月1日-2017年6月30日以广东省3家大型三级甲等医院的老年科为基础,选取老年科常用的7类织物为研究对象,分别为床单、上衣、裤子、医护服、被套、枕套和布样共247份。将上述纺织物分为抗菌处理和非抗菌处理组,非抗菌处理的织物又进一步分为洗涤后使用与未使用组,采用3M PetrifilmTM测试片法进行细菌和真菌的菌落计数。结果纳入247份医院用织物品进行分析,抗菌和未抗菌处理的织物分别为59份(23.89%)和188份(76.11%)。洗涤后使用和未使用的织物分别为178份(72.06%)和69份(27.94%)。对医用织物使用情况进行细菌和真菌培养发现,使用过的织物(除医、护服外)细菌培养结果均高于未使用组(P<0.05),枕套、床单和上衣菌落计数最高为90(21,108)CFU/ml、63(30,127)CFU/ml、61(17,106)CFU/ml。真菌培养结果显示,使用过的枕套的真菌菌落数为7(1,10)CFU/ml高于未使用组(P=0.001),其余种类织物的培养结果差异无统计学意义。而对于抗菌效果评价发现,抗菌处理织物的细菌培养中位菌落数和最大菌落数均显著低于未抗菌处理织物(P<0.001)。两组织物的真菌菌落计数差异无统计学意义,但抗菌织物最大计数值仅为15 CFU/ml,未抗菌处理组为49 CFU/ml。结论枕套、床单和上衣是老年科最容易污染的织物,使用抗菌处理的织物可减少细菌的定植。

血流感染高致病性肺炎克雷伯菌毒力因子及分子分型特点分析

目的研究血流感染高致病性肺炎克雷伯菌的毒力基因和基因分型特点。方法采用PCR方法检测临床分离株血流感染高致病性肺炎克雷伯菌的高毒力基因,并进行荚膜血清型和ST分型;采用微量肉汤稀释法通过BD Phoenix全自动细菌鉴定/药敏系统对分离菌株进行药敏试验;应用加克拉维酸复合药(头孢他啶/克拉维酸或头孢噻肟/克拉维酸)与单药(头孢噻肟或头孢他啶)的药敏纸片组合进行肺炎克雷伯菌产ESBLs的表型确证试验。结果 115株血流感染肺炎克雷伯菌临床分离株分为高毒力肺炎克雷伯菌(Hvkp,占43.48%,50/115)和非Hvkp(non-HvKP,占56.52%,65/115)。与non-HvKP相比,HvKP更容易表现为高黏液性表型(44.00%VS 6.15%,P<0.01),且普遍携带rmpA(98.00%VS 4.61%,P<0.01)、rmpA2(50.00%VS 3.08%,P<0.01)、wcag(24.00%VS 2.15%,P<0.05)毒力基因。HvKP常为K1、K2荚膜血清型,non-HvKP常为K-nontypable血清型。本组血流感染肺炎克雷伯菌主要流行ST型别为ST23、ST65、ST37,其中Hvkp流行型为ST23、ST65和ST86。Hvkp对常用抗生素的敏感性好于non-HvKP,其中发现产ESBLs耐药hvKP菌株4株。结论血液感染高毒力肺炎克雷伯菌易表现为高黏液性表型且普遍携带rmpA毒力基因,因此应注意检测肺炎克雷伯菌黏液性状、荚膜血清型、毒力基因以及ST分型,以利于hvkp感染的识别。

宫内感染与早产儿肺部疾病研究进展

宫内感染是引发早产儿肺部疾病不良结局的重要原因之一。早产儿肺部组织发育尚未成熟,暴露于宫内炎性环境时,病原体可触发局部甚至全身炎症反应,导致胎儿或新生儿肺组织受到不同程度的破坏,可引发早产儿支气管肺发育不良、新生儿肺炎、新生儿呼吸窘迫综合征等疾病,影响其生存质量。该文就有关宫内感染在早产儿肺部疾病中的致病机制及研究进展进行综述。

母乳库的发展及现状

国外母乳库的发展已超过100年历史,并相应成立了北美母乳库协会以及欧洲母乳库协会,建立了成熟的母乳库管理指南.但我国对母乳库的认知及技术的研究仍处于探索及待发展阶段,产妇对母乳捐献愿望及对捐献母乳喂养接受度均较低.在母乳喂养越来越受重视的今天,目前的现状不能满足医学发展的需要,我国需要一个正规的管理指南来指导母乳库的发展.该文通过介绍母乳库概念、母乳喂养的重要性、母乳库建立的必要性和可行性、母乳库的发展前景等对母乳库的认知情况形成系统的回顾,旨在更好地了解母乳库,消除对捐献母乳的顾虑,提高母乳捐献率,从而让母乳库建设成果更好地服务于早产儿及身患疾病的新生儿.

血流感染产ESBLs肺炎克雷伯菌毒力基因及分子分型研究

目的研究血流感染产ESBLs肺炎克雷伯菌的毒力基因和基因分型特点。方法采用PCR检测菌株中高毒力因子、荚膜血清型以及ST分型;采用微量肉汤稀释法对菌株进行药敏试验;采用加克拉维酸的复合药(头孢他啶/克拉维酸或头孢噻肟/克拉维酸)与单药(头孢噻肟或头孢他啶)的药敏纸片组合进行肺炎克雷伯菌产ESBLs的表型确证试验。结果 128株血流感染肺炎克雷伯菌中,有23株产ESBLs(产ESBLs组),占17.97%(23/128);105株不产ESBLs(非产ESBLs组),占82.03%(105/125)。本地区血流感染肺炎克雷伯菌主要流行ST型别为ST23、ST65、ST37和ST29,其中ST23、ST29、ST65为非产ESBLs的优势ST型别菌株,而在产ESBLs菌株中无优势型别。两组菌在高黏液表型、荚膜血清型和毒力基因分布上差异均无统计学意义(P>0.05)。产EBSLs组中发现8株高毒力产EBSLs肺炎克雷伯菌。结论临床诊疗中需在肺炎克雷伯菌耐药株中识别出高毒力肺炎克雷伯菌并给与及时的治疗,避免其并发症的发生。

屎肠球菌临床分离株生物膜形成与毒力基因及ST分型之间的关系

目的研究临床分离屎肠球菌株生物膜形成与ST分型和毒力基因之间的关系。方法收集深圳市南山医院2011—2017年临床分离的不重复屎肠球菌共122株,采用结晶紫染色法检测细菌生物膜形成能力,对分离株进行多位点序列分型(MLST)分析,PCR方法检测屎肠球菌临床株毒力基因表面蛋白(esp)、透明质酸酶(hyl)、表面聚集蛋白(asa1)、明胶酶(gelE)、溶细胞素(cylA)等的分布。结果122株屎肠球菌生物膜形成阳性率为49.2%,其生物膜形成能力主要表现为弱阳性。屎肠球菌毒力基因检测提示esp和hyl检出率分别为39.3%(48/122)和15.6%(19/122),所有菌株未检测到asa1、gelE、cylA;其中esp阳性与生物膜形成能力相关(P<0.05),而hyl阳性与生物膜形成能力无相关性(P>0.05)。MLST分型提示屎肠球菌临床株主要为ST78及ST18型,分别为26株及18株,其中ST78与ST18之间生物膜形成能力差异无统计学意义(P>0.05),esp更常见于ST78分离株。结论临床分离屎肠球菌生物膜形成能力较弱,其毒力基因esp阳性更容易形成生物膜,而hyl与生物膜形成能力无明显相关性,ST78与ST18之间生物膜形成能力无明显差异,esp更常见于ST78分离株。

EGCG对新生鼠高氧诱导支气管肺发育不良的预防作用

目的 研究表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对高氧诱导小鼠支气管肺发育不良模型的预防作用.方法 出生36 ～40 h昆明小鼠88只.随机分为4组:空气组(空气+NS组、空气+EGCG组)和高氧组(高氧+NS组、高氧+EGCG组),每组22只,每天气流驱动雾化给药一次,共28 d.其中高氧组(70±3)％氧环境中饲养28d后转移至空气中饲养.分别于处理第21天、28天和49天取肺组织行切片进行形态学观察和匀浆液行ELISA检查,观察肺组织病理形态,放射状肺泡记数(RAC)和测定细胞因子白细胞介素2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、髓过氧化物酶(MPO)表达水平.结果 第21天空气组IL-2、TNF-α水平均低于高氧组[IL-2:空气组(1 760.83±303.38) pg/g vs高氧组(4 251.00±644.07) pg/g,TNF-α:空气组(4 308.83±1 114.91)pg/g vs高氧组(8 301.83±802.26)pg/g],差异有统计学意义(P均＜0.01).MPO水平:高氧+EGCG组(7 472.83±1 922) U/g＞高氧+NS组(4767.68±1 110.72)U/g＞空气+EGCG组(3712.68±734.40)U/g＞空气+NS组(2711.68 ±763.39)U/g,差异具有统计学意义(P均＜0.05).虽然第21天IL-2和第49天TNF-α在高氧组和空气组均无统计学差异,但各时间点高氧+ EGCG组炎症因子水平均低于高氧+NS组.病理:空气组RAC计数随观察时间逐渐增加,而高氧组逐渐减少,但EGCG组在停止高氧暴露第21天后明显恢复.结论 雾化吸入EGCG可以减轻高氧暴露小鼠肺组织炎症反应程度,减轻肺组织病理损伤,并在停止高氧暴露后加速肺组织恢复.EGCG有望用于预防高氧诱导的支气管肺发育不良.

AEM补片法联合痰管结扎术治疗肛痰的临床疗效研究

目的研究瑞诺脱细胞异体真皮基质(AEM)补片法联合瘘管结扎术治疗肛瘘的临床疗效。方法纳入2017年2月至2017年12月广东医科大学附属深圳南山区人民医院240例肛瘘患者作为研究对象,随机抽签分为两组,每组各120例。观察组行AEM补片法联合瘘管结扎术,对照组行常规瘘管切开挂线术。比较两组手术相关情况、疗效、复发情况、术后肛门功能及并发症发生情况。结果术后第3 d,观察组疼痛程度较对照组轻(P <0.05);观察组住院时间和创面愈合时间较对照组短(均P <0.05),两组手术时间差异无统计学意义(P> 0.05)。两组治愈率和显效率比较,差异均无统计学意义(均P> 0.05),观察组复发率低于对照组(P <0.05)。观察组术后Wexner评分低于对照组,观察组术后并发症总发生率低于对照组,差异均有统计学意义(均P <0.05)。结论 AEM补片法联合瘘管结扎术与常规瘘管切开挂线术治疗肛瘘疗效相当,前者可减轻术后疼痛、促进早期恢复、减少并发症的发生及降低复发率。