多重耐药革兰阴性杆菌Ⅰ类整合子的检测

目的研究整合子在多重耐药革兰阴性菌中的分布和所起的作用。方法用Kirby-Bauer(K-B)药敏法分析80株多重耐药革兰阴性菌的耐药性,再用可变引物与兼并引物进行聚合酶链反应(PCR),分别扩增革兰阴性菌整合子。结果用兼并引物可检出50株革兰阴性菌携带有整合子,有21.2%的菌株同时对10种抗生素都耐药,依次为氨苄西林(72.5%)、头孢曲松(62.5%)、头孢唑啉(61.2%)、头孢他啶(56.2%)、哌拉西林(55.0%)、复方磺胺嘧啶(51.2%)、环丙沙星(50%)、庆大霉素(48.8%)、头孢吡肟(48.8%)、头孢西丁(33.8%),显著高于整合子阴性的菌株。用可变引物检出29株携带有Ⅰ类整合子,可扩增出1000bp,1450bp,1600bp,1700bp,1850bp,1900bp,大于2000bp等6种不同长度的脱氧核苷酸(DNA)片段,相同菌属可携带有不同长度的耐药基因片段,不同细菌种属间携带有相同长度的耐药基因片段。结论Ⅰ类整合子广泛分布于革兰阴性杆菌中,在多重耐药机制中起着重要的作用。

华南地区出现新型CMY型AmpCβ-内酰胺酶

目的分析多重耐药弗劳地柠檬酸杆菌29号试验菌株耐β-内酰胺抗生素的原因及耐药性的转移性。方法用双纸片扩散法和改良三相试验分析4株弗劳地柠檬酸杆菌所产β内酰胺酶,进行初步分类,再用聚合酶链反应(PCR)扩增和PCR产物测序方法确认β内酰胺酶基因。结果29号试验菌株产CMY与DHA型AmpC型β-内酰胺酶,同时还有TEM、SHV型超广谱β内酰胺酶。DNA测序表明该基因和CMY-2有97%的同源性,为一种新的CMY型头孢菌素酶。结论29号试验菌株耐β内酰胺抗生素的原因,可能是产生了可转移的CMY、DHA-1型AmpC及TEM、SHV型ESBLs,基因位于质粒上。