矿泉水和山泉水中铜绿假单胞菌污染调查及分离菌株毒力基因与耐药性分析

【目的】初步掌握全国矿泉水和山泉水生产过程中铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的污染情况。分析矿泉水与山泉水中铜绿假单胞菌的致病性与耐药性。【方法】研究通过对广西、湖北、云南等全国9个省36家水厂进行采样,共采集108个样本,并根据《饮用天然矿泉水检测方法》国家标准(GB/T 8538-2008)检测其铜绿假单胞菌的污染率、污染水平。对分离出的铜绿假单胞菌菌株进行毒力基因与药敏实验。【结果】全国矿泉水水源水、活性碳过滤后水、成品水的污染率分别为16.7%、16.7%、0,污染水平分别为3.7、2.0、0 CFU/250 m L。全国山泉水水源水、活性碳过滤后水、成品水的污染率分别为66.7%、83.3%、5.6%,污染水平分别为5.1、7.3、2.0 CFU/250 m L。对所分离出的36株铜绿假单胞菌进行毒力基因检测和药敏试验显示:exo U、exo S、phz M、tox A、las B检出率分别为25.0%、75.0%、100%、88.8%、100%,但对美国国家临床实验室标准化委员会标准中14种抗生素均无耐药性。【结论】山泉水水源水、活性碳过滤后水、成品水污染率明显高于矿泉水,但污染水平均较低,无大于40.0 CFU/250 m L样品检出。山泉水活性碳过滤后污染率最高,表明大部分企业在活性碳过滤环节存在污染问题。毒力基因exo U、exo S、phz M、tox A、las B在分离到的36株铜绿假单胞菌检出率高,但分离到的菌株对所选取的14种抗生素均无耐药性。

放线菌PY-C-21菌株鉴定及其活性产物的结构分析

拮抗性放线菌是开发高效安全食品生物防腐剂的基础。本研究从广州及其周边采集的土样中通过平板稀释法获得190株放线菌,分别采用琼脂块法和牛津杯定量扩散法进行初筛和复筛,然后通过16S r DNA序列分析,结合形态特征、培养特性和生理生化特性,对菌株PY-C-21进行鉴定。采用溶剂萃取法提取菌株PY-C-21发酵产物的活性成分,接着采用硅胶柱层析分离该菌株的粗提取物,再通过高效液相色谱、薄层色谱和制备色谱制备纯品化合物,采用气质比对法和高分辨质谱法等分析具有抑菌活性的单体化合物。结果表明,菌株PY-C-21具有稳定且广谱抗菌活性,并被鉴定为毒三素链霉菌(Streptomyces toxytricini),该菌株发酵产物的活性物质主要为邻苯二甲酸二丁酯、苯甲酸、2,2-亚甲基双(4-甲基-6-叔丁基苯酚)和邻苯二甲酸二(2-乙基己)酯。