来氟米特抑制狼疮肾炎患者树突状细胞成熟的实验研究

目的:观察来氟米特活性代谢产物A771726处理前后狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)患者树突状细胞(DC)表面标志及功能的改变,探索来氟米特治疗LN的新途径。方法:分离LN患者外周血单个核细胞,用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage colony stimulating factor,GM-CSF)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)等细胞因子诱导DC成熟,来氟米特组再加入A771726培养。培养第9天收集DC细胞,流式细胞仪检测CD80、CD86和HLA-DR的表达。MTT法检测DC刺激淋巴细胞增殖的能力,ELISA法检测混和淋巴细胞反应培养上清IL-10和IFN-γ水平。结果:A771726处理后的DC表达CD80、CD86和HLA-DR百分数较对照组均明显降低[(62.80±1.67)vs(78.35±4.50),(64.50±13.06)vs(84.91±9.80),(71.44±11.56)vs(91.51±7.63)],P均<0.01;A771726处理后的DC与T细胞混合培养,其刺激T细胞增殖相应的OD值较对照组明显降低[DC∶TC=1∶10时,(0.295±0.069)vs(0.468±0.100);DC∶TC=1∶50时,(0.196±0.044)vs(0.391±0.023)],P均<0.01。其混合培养的上清液中IL-10水平较无A771726处理的DC与T细胞的混合培养上清液明显降低[(205.0±35.8)pg/mlvs(443.6±93.2)pg/ml,P<0.01],而IFN-γ两者间无统计学差异[(89.3±11.9)pg/mlvs(99.9±15.7)pg/ml,P>0.05]。结论:A771726在体外可抑制LN患者外周血DC的成熟,未成熟DC能抑制T细胞增殖及T细胞向Th2细胞转化。

他克莫司体外诱导狼疮性肾炎患者耐受性树突状细胞形成

目的:观察他克莫司(tacrolimus)处理前后狼疮性肾炎(LN)患者外周血树突状细胞(dendriticcells,DCs)表面标志及功能的改变。方法:分离LN患者外周血单个核细胞,用GM-CSF、IL-4等细胞因子诱导DCs成熟,他克莫司组在加入上述细胞因子前先加入他克莫司(5μg/ml)培养。培养第9d收集DCs细胞,流式细胞仪检测CD80、CD86和HLA-DR的表达。MTT法检测DCs刺激淋巴细胞增殖能力,ELISA法检测混合淋巴细胞反应培养上清IL-10和IFN-γ水平。结果:他克莫司处理后的DCs表达CD80、CD86和HLA-DR百分数较对照组均明显降低(52.70±1.77vs78.36±4.80,63.50±14.06vs83.91±9.81,70.41±12.51vs90.51±8.63),P均<0.01;他克莫司处理后的DCs与T细胞混合培养,其刺激T细胞增殖相应的OD值明显降低(DC∶TC=1∶10时,0.294±0.094vs0.582±0.123;DC∶TC=1∶50时,0.325±0.099vs0.458±0.080),P均<0.01。其混合培养的上清液中IL-10水平较无他克莫司处理的DCs与T细胞的混合培养上清液明显降低[(195.0±36.9)pg/mlvs(423.6±93.2)pg/ml,P<0.01],而IFN-γ两者间无统计学意义[(88.2±11.6)pg/mlvs(86.9±12.7)pg/ml,P>0.05]。结论:他克莫司在体外可抑制LN患者外周血DCs的成熟,且他克莫司处理后的DCs能明显抑制T细胞增殖及T细胞向Th2细胞转化。

叶氏狼疮方诱导狼疮肾炎患者T细胞免疫耐受分子机制研究

目的:探讨叶氏狼疮方在诱导狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)患者外周血T淋巴细胞免疫耐受中有无作用。方法:密度梯度离心法提取LN患者及健康对照外周血单个核细胞(PBMCs),设立4个培养亚组:空白(blank)、植物血凝素(PHA)、狼疮方血清(lupus formula serum,LFS)、PHA+LFS组。双色标记流式细胞术检测PBMCs及其条件培养后CD3+T细胞表面分子CD28,CD40L,LFA-1a和CTLA-4的表达水平。多组间比较采用单因素方差分析。结果:活动性LN组外周血T细胞表面CD28、CD40L、LFA-1a和CTLA-4表达水平较健康对照组明显上调(P均<0.01);PHA可诱导健康对照T细胞表面CD28和CD40L表达明显上调(P均<0.01),但对其CTLA-4和LFA-1a的表达无明显影响(P均>0.05);而PHA对活动性LN组外周血T细胞表面上述指标表达均有明显上调作用(P均<0.05);叶氏狼疮方对健康人外周血T细胞表面上述指标的表达无明显影响,但可逆转活动性LN患者外周血T细胞表面的CD40L、LFA-1a过度表达(P均<0.05),对其CD28和CTLA-4过度表达无明显影响(P均>0.05);且叶氏狼疮方对PHA所诱导的活动性LN患者外周血T细胞表面CD28、CD40L和LFA-1a表达增加亦有明显抑制。结论:叶氏狼疮方可能主要通过下调T细胞CD40L和LFA-1a表达水平来诱导LN患者外周T细胞免疫耐受重建。

腹膜透析患者的抑郁情况及影响因素分析

目的探讨尿毒症患者的抑郁情况对腹膜透析治疗及转归的影响。方法选择78例尿毒症腹膜透析患者进行抑郁调查,进行汉密尔顿抑郁量表评分,分为抑郁组,非抑郁组,两组间进行性别、年龄、文化程度、婚姻障碍、经济状况、就业率及顺应性比较,观察两组患者的透析充分性、营养状况及生活质量。结果47.4%存在抑郁情况。两组间性别、年龄、文化程度、婚姻障碍无显著差异,而顺应性、透析充分性、营养状态及生活质量存在显著差异。结论尿毒症腹膜透析患者的抑郁情况是常见的。它可造成腹膜透析患者的顺应性下降、透析不充分,营养不良,影响疾病的治疗和转归。

连续性血液滤过治疗多器官功能障碍综合征的疗效观察

目的观察连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)在多器官功能障碍综合征(MODS)患者的临床疗效。方法观察2002年至2005年接受CVVH的89例MODS患者中CVVH疗效及治疗过程中患者血压、心率、呼吸、体温等生命体征变化,监测肾功能及其并发症。结果64例患者(71.9%)死亡,存活率28.1%。所有患者在CVVH治疗中血压、心率平稳。存活组患者APACHEII评分在治疗过程中明显下降。死亡组患者在停止CVVH治疗时尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)、中心静脉压(CVP)、平均动脉压(MAP)、动脉氧分压(PaO2)均较CVVH前显著改善。治疗中并发症发生率低。结论CVVH治疗用于MODS的救治,可有效缓解患者病情,降低死亡率,改善预后。

腹膜透析患者血压控制不佳的相关因素分析

目的:探讨维持性腹膜透析患者血压控制不佳的相关因素。方法:对39例持续不卧床腹膜透析患者(CAPD)进行回顾分析,对血压控制良好(正常血压组)和血压控制不佳(高血压组)患者的临床指标、腹膜转运特性、容量状态进行比较;利用单因素及多因素分析探讨CAPD患者血压控制不佳的危险因素。结果:两组患者的主要临床指标仅血清白蛋白在两组之间存在有统计学差异,两组间在腹膜转运特性方面存在统计学差异。单因素分析结果显示,腹膜转运特性为高转运、容量超负荷、每日残余尿量少于400 ml、低血清白蛋白、未能定期回透析中心随访等与腹膜透析患者血压控制欠佳有关;多因素Logistic回归分析结果显示,容量超负荷、腹膜转运特性为高转运、低血清白蛋白、未能定期回透析中心随访为腹膜透析患者血压控制欠佳的独立危险因素。结论:容量超负荷、腹膜高转运、低血清白蛋白、未定期随访是CAPD患者血压控制不佳的危险因素。

狼疮性肾炎环磷酰胺冲击治疗的间期与剂量研究

探讨不同活动程度的狼疮性肾炎(LN)使用环磷酰胺冲击治疗的最佳间期与合理剂量。方法 将96例重症LN患者随机分成三组。A组:环磷酰胺冲击治疗(Ⅳ-CTX),每2周1次,每次8～12mg/kg,连用2天。B组:Ⅳ-CTX每月1次,每次0.5～1.0/m^2。C组:Ⅳ-CTX每三个月1次,每次0.5～1.0/m^2。三组均同时口服强的松。结果 A组起效时间显著比B组与C组快;病情缓解率A组也显著高于B组及C组(P<0.01);病情活动性积分下降至50％时,三组CTX累积量无显著性差异(P>0.05)。B、C两组共15例(23.8％)治疗过程中因病情加重,改为2周1次后得到控制,而A组则有3例(9％)因白细胞下降需将冲击间期延后1周。三组副反应及其发生率无显著统计学差异(P>0.05)。结论 Ⅳ-CTX应根据狼疮活动程度进行选择。在急、重症LN治疗的初期,Ⅳ-CTX以每2周1次,每次8～12mg/kg,连用2天,有利于及时缓解病情,提高疗效;治疗后病情减轻时改为每月1次,每次0.51.0/m^2,狼疮活动基本控制后应以每三个月1次,每次0.5～1.0/m^2,以巩固疗效。

狼疮肾炎病人尿蛋白刺激肾小管上皮细胞发生表型改变和Ⅰ型胶原的表达上调

目的探讨狼疮性肾炎尿蛋白引起肾小管间质纤维化的发生机制。方法收集初发狼疮性肾炎病人的尿液(6例)提纯总蛋白,体外与 HK-2细胞培养不同时间(0、1、2、12、24、48 h),应用逆转录-聚合酶链式反应法检测 HK-2细胞转化生长因子β_1(TGF-β_1)、Ⅰ型胶原(COL Ⅰ)及仪平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA 的表达;应用 Western 印迹及间接免疫荧光法检测 TGF-β_1、COL Ⅰ及α-SMA 的蛋白表达。结果狼疮性肾炎尿蛋白可以刺激 HK-2细胞 TGF-β_1、COL Ⅰ及α-SMA mRNA及蛋白表达上调[(0,48 h 分别为 TGF-β_1 mRNA 0.39±0.03 vs 0.27±0.02(P<0.01),TGF-β_1蛋白0.37±0.03 vs 0.27±0.04,(P<0.01);COL Ⅰ mRNA 0.38±0.02 vs 0.22±0.03,(P<0.01),COL Ⅰ蛋白0.44±0.03 vs 0.19±0.02,(P<0.01);α-SMA mRNA 0.66±0.04 vs 0.44±0.03,(P<0.01),α-SMA 蛋白0.43±0.02 vs 0.24±0.03,(P<0.01)]。结论狼疮性肾炎尿蛋白诱导 HK-2细胞发生表型转化及产生细胞外基质增多,可能是肾间质性纤维化的发生机制之一。

糖尿病肾病病人血浆心钠素及内皮素含量分析

目的 比较糖尿病肾病 (DN)病人治疗前后心钠素 (ANP)、内皮素 (ET 1)含量的变化。方法 用放射免疫法测定 4 3例糖尿病 (DN)和 2 0例正常对照组血浆ANP、ET 1的含量。结果 DN组血浆ANP和ET 1浓度明显高于正常对照组 (P <0 0 5 ) ;ANP、ET 1在治疗前含量最高 ,治疗后下降 ;治疗组治疗 12个月后ANP、ET 1含量较常规组下降 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论 糖尿病肾病病人治疗前后心钠素及内皮素含量的改变 ,可能与糖尿病肾病的发生和发展有关。

糖尿病病人血管内皮生长因子及血管紧张素Ⅱ水平分析

目的 探讨糖尿病肾病病人血浆血管紧张素Ⅱ (ATⅡ )和血管内皮生长因子 (VEGF)水平变化。方法 用放免法和酶免法测定 43例糖尿病肾病组 ,55例糖尿病非肾病组病人和 2 5例正常对照组血浆中血管紧张素Ⅱ、血管内皮生长因子、糖化血红蛋白 (GHbALc)及尿微白蛋白 (UmALB)的水平。结果 DN组和NDN组病人ATⅡ、VEGF、GHbALc及UmALB水平均明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ;糖尿病肾病组ATⅡ、VEGF及UmALB明显高于糖尿病非肾病组 (P <0 0 1) ;两组糖尿病病人血浆ATⅡ和VEGF、UmALB水平呈显著正相关 (γ =0 465,γ =0 485,P <0 0 5)。结论 糖尿病病人血浆ATⅡ和VEGF明显升高 。