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猪SIgA分泌片的表达及其多克隆抗体的制备
1
作者
朱利塞
贾爱卿
+5 位作者
王贵平
王娟
李菲
邓胜朝
钱雪桥
丁壮
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2020年第3期68-72,共5页
SIgA是评价黏膜免疫的重要指标,分泌片(SC)是SIgA的特有成分,为了更方便的获得大量的SIgA的分泌片,本研究应用RT-PCR方法扩增出SC基因片段,将SC基因片段克隆到pGEX-4T-1原核表达载体上,经酶切和测序验证获得pGEX-4T-1-SC重组质粒;将获得...
SIgA是评价黏膜免疫的重要指标,分泌片(SC)是SIgA的特有成分,为了更方便的获得大量的SIgA的分泌片,本研究应用RT-PCR方法扩增出SC基因片段,将SC基因片段克隆到pGEX-4T-1原核表达载体上,经酶切和测序验证获得pGEX-4T-1-SC重组质粒;将获得的pGEX-4T-1-SC转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达重组蛋白rSC.重组蛋白rSC经鉴定和纯化后,按常规免疫程序制备多克隆抗体;利用Western blot对抗重组蛋白rSC的多克隆抗体进行鉴定.结果显示,该抗体能特异性识别猪初乳中的SIgA免疫球蛋白,而与猪初乳中的IgG不发生反应.因此,抗SC重组蛋白的多克隆抗体可以作为抗SIgA免疫球蛋白的特异性抗体,为进一步建立SIgA的检测方法及黏膜免疫的研究奠定基础.
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关键词
SIGA
分泌片
多克隆抗体
黏膜免疫
下载PDF
职称材料
题名
猪SIgA分泌片的表达及其多克隆抗体的制备
1
作者
朱利塞
贾爱卿
王贵平
王娟
李菲
邓胜朝
钱雪桥
丁壮
机构
广东海大集团股份有限公司畜牧水产研究中心、海大中央研究院农业农村部微生态资源养殖利用重点实验室
广东
海大
畜牧
兽医
研究院
吉林大学动物医学学院
出处
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2020年第3期68-72,共5页
基金
博士后科研(基金配套)项目经费(4000826)
广东海大畜牧兽医研究院基于畜禽重要疫病诊断技术院士工作站(2017B090904029)
猪重要疫病快速诊断试剂的研发及产业化(201804020006)。
文摘
SIgA是评价黏膜免疫的重要指标,分泌片(SC)是SIgA的特有成分,为了更方便的获得大量的SIgA的分泌片,本研究应用RT-PCR方法扩增出SC基因片段,将SC基因片段克隆到pGEX-4T-1原核表达载体上,经酶切和测序验证获得pGEX-4T-1-SC重组质粒;将获得的pGEX-4T-1-SC转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达重组蛋白rSC.重组蛋白rSC经鉴定和纯化后,按常规免疫程序制备多克隆抗体;利用Western blot对抗重组蛋白rSC的多克隆抗体进行鉴定.结果显示,该抗体能特异性识别猪初乳中的SIgA免疫球蛋白,而与猪初乳中的IgG不发生反应.因此,抗SC重组蛋白的多克隆抗体可以作为抗SIgA免疫球蛋白的特异性抗体,为进一步建立SIgA的检测方法及黏膜免疫的研究奠定基础.
关键词
SIGA
分泌片
多克隆抗体
黏膜免疫
Keywords
SIgA
secretory component
polyclonal antibody
mucosal immunity
分类号
S852.42 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
猪SIgA分泌片的表达及其多克隆抗体的制备
朱利塞
贾爱卿
王贵平
王娟
李菲
邓胜朝
钱雪桥
丁壮
《中国动物传染病学报》
CAS
北大核心
2020
0
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