红树林植物内生菌分离鉴定及其抑菌活性研究

[目的]从红树林植物组织中分离出对动物病原菌具有广谱抑菌活性的植物内生菌。[方法]以铜绿假单胞菌、多杀性巴氏杆菌、产气肠杆菌、粪肠球菌4种常见的致病菌作为指示菌,采用M10和P3培养基从红树林植物根、茎、叶组织中分离内生菌,以固体琼脂打孔法筛选具有抑菌活性的菌株,提取菌株的基因组DNA,PCR扩增16S rDNA基因并测序,通过邻接法构建系统发育树。[结果]从红树林植物组织中共分离857株可培养的内生菌,有145株菌有抑菌活性,占分离菌株的16.6%。其中通过M10培养基从红树林植物叶组织分离的菌株32-5对铜绿假单胞菌、产气肠杆菌都具有最强抑菌活性,其抑菌圈直径分别为38和42 mm;通过P3培养基从红树林植物茎组织分离的菌株12-4对粪肠球菌具有最强抑菌活性,其抑菌圈直径为56 mm;通过M10培养基从红树林植物茎组织分离的菌株13-2对多杀性巴氏杆菌具有最强抑菌活性,其抑菌圈直径为64 mm。有抑菌活性菌株分为10个属,其中芽孢杆菌属是优势菌属。[结论]该试验初步揭示红树植物根、茎、叶组织中植物内生菌的抑菌活性和多样性,为开发新型抗菌药物及应用提供理论依据。

湛江地区罗非鱼病原菌分离鉴定及毒力基因检测

[目的]了解湛江市某水产养殖场患病罗非鱼病原菌携带毒力基因情况。[方法]从10尾患病罗非鱼心脏、肠道、脾、肝脏等器官分离细菌,提取分离纯化细菌的总DNA,PCR扩增16S rDNA基因后经过基因测序鉴定细菌,并利用PCR技术检测分离菌株的毒力基因。[结果]从罗非鱼内脏中分离的细菌为华纳葡萄球菌、大肠杆菌和粪肠球菌,在毒力基因检测中发现华纳葡萄球菌携带毒力基因gap,大肠杆菌携带毒力基因pap、afa,粪肠球菌携带毒力基因efaA、cylM、cylB。[结论]该研究结果可为湛江地区罗非鱼细菌性疾病防控提供理论依据。

一株蜡样芽孢杆菌产抑菌物质发酵条件优化及抑菌效果研究

从广东湛江红树林自然保护区的红树植物根际土壤中分离筛选出一株广谱抑菌效果的菌株蜡样芽孢杆菌M15,对菌株M15进行发酵培养条件优化,采用特定发酵培养基的基础上,控制单一变量,对装液量、接种量、发酵温度和发酵时间进行优化,并对其抑菌活性物质的酸碱稳定性、热稳定性和蛋白酶耐受性进行测定。结果表明:菌株M15的发酵条件为装液量30 mL、接种量2%、发酵温度30℃、发酵时间120 h时,发酵液的抑菌效果最佳,对大肠杆菌、链球菌和沙门氏菌抑菌圈直径均为17 mm,金黄色葡萄球菌抑菌圈直径为15 mm;发酵培养基pH小于5.0或者大于6.0时,抑菌活性丧失;菌株M15的发酵液抑菌活性在30~60℃较稳定,但≥80℃时,发酵液抑菌物质失去活性;抑菌物质对胰蛋白酶不敏感,对木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶E和蛋白酶K敏感。

新种芽孢杆菌分离鉴定及抑菌活性分析

芽孢杆菌具有较强的抵抗外界环境压力的能力,无毒副作用,是饲料益生菌添加剂菌种开发的关注点。试验旨在寻找和探索作为饲料益生菌添加剂的新型芽孢杆菌菌种,进而研究芽孢杆菌分离株的抑菌活性。采用加热分离方法,从养鱼池沉积物和乌龟池底泥分离出两株细菌,经形态学观察、生化鉴定、16S rDNA序列比对并建立遗传进化树进行鉴定,再进行药敏试验及菌株抑菌性测定。结果表明,分离的两株细菌均为芽孢杆菌新种,分别命名为芽孢杆菌sp X102和芽孢杆菌sp X901。两株分离菌对7种常见药物均敏感,且对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌指示菌具有较强抑菌作用。说明分离的两株芽孢杆菌新种可作为动物益生菌菌种进行开发。

湛江地区肉鸡养殖场大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

为了解广东湛江地区肉鸡养殖场中大肠杆菌耐药性和耐药基因的流行与传播特点,从湛江地区的8个肉鸡场分别采集粪便和土壤样品各120份,从中分离鉴定出200株大肠杆菌,药敏纸片扩散试验检测分离菌株对23种抗菌药的耐药情况,并利用PCR法检测分离菌株携带耐药基因的分布情况。结果显示,从粪便和土壤中分离的200株菌株均对磺胺异噁唑、万古霉素、复方新诺明等12种抗菌药具有较高耐药率(≥50%),对美罗培南、呋喃唑酮、磷霉素等11种抗菌药具有较低耐药率(≤50%)。分离的大肠杆菌菌株均检出耐药基因,养殖场粪便分离菌中检出耐药基因28种,其中blaTEM、sul2检出率较高;土壤分离菌中检出耐药基因25种,其中blaTEM、int1、sul2、tetD检出率较高。分离菌的多重耐药现象普遍存在。由于耐药机制复杂,细菌耐药性的传播特点和方式仍需进一步探索。

海洋天然产物壳寡糖抑制细菌生长和黏附的作用评价

海产品加工副产物壳寡糖(COS)具有抗菌、消炎和黏膜修复等重要生物活性。为了解COS作为替抗天然产物的功能和作用,本研究检测了COS对致病性大肠杆菌、肠炎沙门菌、金黄色葡萄球菌和福氏志贺菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC),通过羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)标记观察了COS对4种致病菌在猪肠道上皮细胞IPEC-J2黏附的抑制率,通过qPCR检测了细菌黏附相关基因的表达水平。结果表明:COS对这4种肠道致病菌均有良好的抑菌作用,其中对致病性大肠杆菌抑杀效果最明显;COS可抑制4种致病菌对IPEC-J2细胞的黏附作用,以对致病性大肠杆菌的黏附抑制效果最好,黏附率能下降至50%以下;COS对致病菌侵染的IPEC-J2细胞间黏附分子-1(ICAM-1)基因相对表达量的上调有极显著抑制作用(P<0.01),对黏蛋白(MUC)2、MUC4及闭锁蛋白(Occludin)基因相对表达量有显著上调作用(P<0.05)。结果说明,COS有明显的抑菌、黏附抑制和黏膜保护作用,具有作为替抗减抗功能饲料添加剂开发的潜力。

黄芪多糖的糖含量与饮片截面积的关系及对小鼠免疫器官指数的影响

[目的]以多糖含量来评价黄芪质量,并研究黄芪多糖对小鼠免疫器官指数的影响。[方法]根据黄芪饮片大小编号为1号、2号和3号,先测量其面积,粉碎机粉碎后过20目筛,经过水提醇沉的方法提取多糖,用酶标仪测定黄芪多糖中的糖含量,选用糖含量最高的提取物制作黄芪多糖药液(10 mg/mL);将小鼠随机分成2组,即对照组和黄芪多糖组(0.01 mL/g)给小鼠灌胃7 d,称量小鼠体重,眼球采血,测量其外周血白细胞数及采集其胸腺、脾脏并称重,比较其内脏系数和外周血白细胞数的变化。[结果]1~3号黄芪多糖的提取率分别为5.75%、5.95%和7.76%,糖含量分别为208.75、209.45和212.35 mg/g,黄芪饮片的内圈大小和多糖提取量呈正相关,3号饮片质量最佳;小鼠灌胃黄芪多糖后胸腺、脾脏系数显著增高。[结论]黄芪多糖改善了小鼠的免疫功能。

氟苯尼考胁迫对土壤解磷菌解磷能力的影响

从土壤中分离得到10株解磷菌,将菌株接种至LB液体培养基中,30℃培养24 h作为种子液。在无机磷液体培养基中加入氟苯尼考,使培养基含药浓度分别为0、0.1、1.0、10.0、50.0μg/mL。按照1%的接种量接种种子液,30℃培养5 d,每24 h取2 mL培养液,利用钼锑抗分光光度法测定培养液中速效磷含量。结果表明,10株解磷菌在50.0μg/mL药物浓度下,培养基中速效磷含量明显低于其他药物浓度组;大部分菌株在药物浓度0~50.0μg/mL菌液中细菌数量变化不明显。说明氟苯尼考对解磷菌的解磷能力产生了抑制作用,但与细菌的生长繁殖并无明显相关性。

黄芩苷酯化物缓解H_(2)O_(2)诱导的猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)氧化应激反应的研究

试验旨在探讨黄芩苷酯化物(BE)对H_(2)O_(2)诱导的IPEC-J2细胞氧化应激的缓解作用及其分子机制。采用CCK-8法检测细胞活性筛选出黄芩苷酯化物的适用浓度;采用ELISA法检测细胞中活性氧(ROS)水平、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性、丙二醛(MDA)含量;采用qPCR法检测细胞中HO-1和NQO-1 mRNA的表达量;采用WB法检测胞浆Nrf2蛋白、胞核Nrf2蛋白和HO-1的蛋白表达水平;免疫荧光法检测Nrf2蛋白入核情况。结果显示,BE的适用浓度为10、20、40 mmol/L;与对照组相比,H_(2)O_(2)组中ROS、MDA含量显著升高(P<0.05);SOD、CAT活性显著下降(P<0.05);胞浆Nrf2蛋白与胞核Nrf2蛋白表达量显著升高(P<0.05);HO-1 mRNA的表达量显著升高(P<0.05);NQO-1 mRNA(P<0.05)表达量显著降低。与H_(2)O_(2)组相比,中、高剂量BE显著降低ROS、MDA含量(P<0.05);低、中、高剂量BE显著提高SOD、CAT活性(P<0.05);中剂量BE显著升高胞浆Nrf2蛋白的表达(P<0.05);低、中、高剂量BE显著升高胞核Nrf2蛋白的表达(P<0.05);中、高剂量BE显著升高HO-1 mRNA的表达量(P<0.05),低、中、高剂量均可显著升高HO-1蛋白表达;低、中、高剂量BE显著升高NQO-1 mRNA表达量(P<0.05)。研究表明,BE可以通过激活Nrf2信号通路发挥抗氧化作用。

八种植物提取物对MODE-K细胞抗氧化能力的影响

该试验旨在评价基于脂多糖(LPS)诱导MODE-K细胞氧化应激模型评价8种植物提取物的抗氧化能力。采用CCK8法检测细胞存活率筛选建模条件。用ELISA法检测细胞炎性因子白介素6(IL-6)、活性氧(ROS)水平、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,丙二醛(MDA)和还原型辅酶Ⅰ(NADH)的表达量,用qPCR法检测细胞中HO-1 mRNA的表达量。结果显示:与对照组相比,40μg/mL的LPS处理细胞1 h后极显著降低细胞活率(P<0.01);显著提高IL-6、ROS、LDH、MDA表达量(P<0.05),极显著提高HO-1 mRNA的表达(P<0.01),显著降低SOD(P<0.01)与NADH活性(P<0.05);与模型组相比,紫苏籽与虎杖提取物组的MDA表达量均显著降低(P<0.05),NADH与HO-1 mRNA表达量均显著升高(P<0.05),其余6种提取物并未表现出显著差异。综上,8种植物提取物中,紫苏籽与虎杖提取物(20μg/mL)使MODE-K细胞抗氧化作用提升,且紫苏籽效果优于虎杖。

加味葛根芩连汤对湿热泄泻仔猪肠道炎症和损伤修复的作用

通过用加味葛根芩连汤治疗仔猪的湿热泄泻,探讨其对湿热泄泻仔猪肠道的修复作用。选取8~15日龄未断奶仔猪(大白×长白)30头,其中健康仔猪6头,为对照组;有粪色黄褐而臭、小便短赤、舌质红等症状的泄泻仔猪24头,分为湿热泄泻组、加味葛根芩连汤低剂量组、加味葛根芩连汤中剂量组和加味葛根芩连汤高剂量组,每组6头。对照组和湿热泄泻组仔猪灌服生理盐水,药物组仔猪灌服加味葛根芩连汤(按生药量,低、中、高剂量组药物添加量分别为2.5、5.0和10.0 g·d~(-1)),连续5 d。在服药的第0、3、5天记录各组仔猪的粪便评分。取对照组、湿热泄泻组、加味葛根芩连汤中剂量组仔猪十二指肠、空肠、回肠和结肠进行组织切片和H.E.染色,取十二指肠进行增殖性细胞核抗原(PCNA)免疫组化染色;用荧光定量PCR检测对照组、湿热泄泻组、加味葛根芩连汤中剂量组仔猪空肠TLR4、TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达量变化。湿热泄泻严重破坏了仔猪的十二指肠、空肠、回肠和结肠结构,尤其是十二指肠和空肠,十二指肠隐窝处PCNA表达量显著升高(P<0.05)。与对照组相比,湿热泄泻组仔猪空肠TLR4 (P<0.05)、TNF-α(P<0.01)、IL-1β(P<0.01)和IL-6 (P<0.05) mRNA表达量显著升高。相比于湿热泄泻组,加味葛根芩连汤显著降低了仔猪的粪便评分(P<0.05)。中剂量加味葛根芩连汤组仔猪的小肠和结肠的组织结构得到显著改善,十二指肠的肠腔中有不断脱落的绒毛团,绒毛中的PCNA表达量极显著升高(P<0.01)。与湿热泄泻组相比,加味葛根芩连汤中剂量组空肠TLR4 (P<0.05)、TNF-α(P<0.01)、IL-1β(P<0.01)和IL-6 (P<0.05) mRNA表达量显著降低。综上表明,加味葛根芩连汤可通过促进隐窝干细胞的增殖和降低炎症反应对湿热泄泻造成的仔猪肠道损伤进行修复。

黄芩苷通过抑制核因子-κB和激活核因子-E2相关因子2信号通路缓解脂多糖诱导的小鼠空肠炎症和氧化应激

本试验旨在探讨黄芩苷对脂多糖(LPS)诱导的小鼠空肠炎症和氧化应激的缓解作用及其分子机制。将36只小鼠随机分为对照组、阴性对照组、模型组以及低、中、高剂量黄芩苷组,每组6只。适应性生长7 d后开始试验。对照组小鼠不作处理,阴性对照组和模型组小鼠每天灌胃0.2 mL磷酸盐缓冲液(PBS),黄芩苷组小鼠每天灌胃黄芩苷药液0.2 mL(根据小鼠体重计算黄芩苷用量,低剂量组为100 mg/kg BW,中剂量组为200 mg/kg BW,高剂量组为400 mg/kg BW),连续灌胃7 d,第7天给模型组、黄芩苷组小鼠腹腔注射0.2 mL LPS(3.5 mg/kg BW)。注射LPS 24 h后处死小鼠,取空肠进行形态学观察,检测空肠中炎性因子mRNA表达量和含量以及核因子-κB(NF-κB)和核因子-E2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶-1(HO-1)信号通路关键蛋白表达量的变化。结果显示:相比于对照组,模型组小鼠空肠组织绒毛结构损伤,绒毛高度与隐窝深度比值显著降低(P<0.05),空肠中Toll样受体4(TLR4)的mRNA表达量显著升高(P<0.05),炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]的mRNA表达量和含量显著升高(P<0.05),P65的蛋白表达量、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(P-IκBα)/NF-κB抑制蛋白α(IκBα)和磷酸化P65(P-P65)/P65比值显著升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)活性和HO-1的蛋白表达量显著降低(P<0.05)。相对于模型组,黄芩苷组小鼠空肠组织结构得到明显改善,绒毛高度与隐窝深度的比值显著升高(P<0.05),TLR4和炎性因子的mRNA表达量显著下降(P<0.05),P-65、P-IκBα的蛋白表达量显著降低(P<0.05);高剂量黄芩苷组空肠中SOD的活性显著升高(P<0.05);中、高剂量黄芩苷组空肠中HO-1和醌氧化还原酶-1(NQO-1)的mRNA表达量显著升高(P<0.05),HO-1和胞核Nrf2的蛋白表达量显著升高(P<0.05)。综上可知,在LPS构建的小鼠空肠炎症模型中,黄芩苷在适宜剂量内可以通过抑制NF-κB信号通路发挥抗炎症作用,通过激活Nrf2信号通路发挥抗氧化作用,推荐剂量为200 mg/kg BW。

30种中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌体外抑制作用的研究

研究中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌效果。采用水煎法提取30种中草药的有效成分,采用二倍稀释法分别测定对沙门菌和金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并筛选出有较强抗菌作用的中草药与其他中草药联合,评价抑菌效果。结果显示,黄连、诃子、五倍子等对两种细菌的抑制作用都比较强,其中五倍子水提取物对沙门菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,MIC值均为1.563 mg/mL,MBC值分别为12.5 mg/mL和6.25 mg/mL。在两药联合中,对沙门菌,黄连和紫花地丁、金银花和连翘、金银花和穿心莲的联合药对均呈现协同作用,其中黄连和紫花地丁联合药对抑制效果最好(MIC为12.5 mg/mL,MBC为100 mg/mL);而对金黄色葡萄球菌,紫花地丁和艾草、金银花和穿心莲的联合药对为协同作用。黄莲和艾草、菊花和连翘、花椒和黄芪的联合药对对两种菌都呈拮抗作用,其余大部分为相加或无关作用。说明抑菌能力强的中草药与其他中草药联合,抑菌效果不一定增强。

9种中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌体外抑制作用

研究石榴皮、花椒、大青叶等9种中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用。采用水煎煮法分别提取9种不同中草药的有效成分;采用二倍稀释法、平板培养法分别检测中草药对沙门菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),筛选出抑菌功效良好的5味中草药,再分别对2种细菌进行联合用药,测定中草药联用的体外抑菌功效。结果表明,花椒、黄连、石榴皮、诃子、龙胆草等单味药具有较好的体外抑菌功效,在9种中草药中抑菌作用最佳的是黄连,其对沙门菌和金黄色葡萄球菌的MIC值分别为1.625 mg/mL和3.125 mg/mL,MBC值分别为100.000 mg/mL和200.000 mg/mL。对金黄色葡萄球菌,中草药间有拮抗作用的组合有黄连+花椒、黄连+诃子、石榴皮+龙胆草,其他中草药联合时均为无关作用;对沙门菌,中草药间有拮抗作用的组合有黄连+花椒、诃子+龙胆草、石榴皮+诃子、黄连+诃子、石榴皮+龙胆草,中草药间有相加作用的组合是花椒+石榴皮,其MIC值为3.125 mg/mL,FIC值为0.75,其他中草药联合时均为无关作用。结果提示,单独用药对细菌具有良好抑菌功效的中草药,联合用药时抑菌作用未必会增强。

白头翁散与其他中药联合对大肠杆菌的体外抑菌效果

研究中药白头翁散各组分(白头翁、黄柏、黄连、秦皮)以及其他6种中药对大肠杆菌的体外抑菌效果。用传统水煎法分别提取10种中药的有效成分;采用试管二倍稀释法测定单味中药、两药联合组成药对及自制白头翁散对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)以及最小杀菌浓度(MBC)。结果显示,白头翁散各组分均可有效抑制大肠杆菌,其中黄连的MIC为6.250 mg/mL,抑菌效果最佳。单味中药中对大肠杆菌杀菌效果较好的是黄连、秦皮、诃子,MBC均为200.000 mg/mL;药对中白头翁+黄连、大青叶+诃子对大肠杆菌的MIC均为3.125 mg/mL,抑菌效果最佳;白头翁+黄连对大肠杆菌的MBC为12.500 mg/mL,杀菌效果最佳。自制白头翁散对大肠杆菌的MIC为3.125 mg/mL、MBC为100.000 mg/mL。结果提示,白头翁散4种单药相加的抗菌效果优于单药和部分药对。

20味中药对大肠杆菌的体外抑菌作用

研究苏木、黄连、石榴皮等20味中药对大肠杆菌的体外抑菌作用。采用水提法制备20味中药的提取物,通过试管二倍稀释法测定20味中药水提取物对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC);再将20味中药组成药对,进行联合抑菌,测定药对的MIC和MBC,计算其部分抑菌浓度指数(FIC)。结果表明,20味中药中,黄连、苏木抑菌效果最佳,MIC均为6.250 mg/mL,茯苓、山楂、火麻仁抑菌效果最差,其MIC和MBC均大于400.000 mg/mL。联合抑菌的28组药对中,苏木与石榴皮、石榴皮与黄柏、石榴皮与黄芩、地榆与苏木、地榆与乌梅、地榆与花椒、地榆与黄柏、火麻仁与旋覆花、旋覆花与山楂等9组药对均呈现协同作用,石榴皮与黄连、石榴皮与乌梅均呈现拮抗作用,其他药对呈现相加或无关作用。说明对大肠杆菌抑菌作用强的单味中药与其他中药联合,其抑菌效果未必会增强。

36种中药提取物对罗非鱼大肠杆菌和华纳葡萄球菌的抑菌效果研究

研究36种中药对罗非鱼大肠杆菌和华纳葡萄球菌的体外抑菌效果。采用水提法提取芦根、地榆、苦参、黄芩、大青叶、黄柏、丁香、蛇床子、连翘、金银花、栀子、山楂、黄连等36种中药有效成分,采用肉汤二倍稀释法测定中药提取物对大肠杆菌和华纳葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC),选择抑菌效果较好的单药进行联合抑菌试验。结果表明,山楂对罗非鱼大肠杆菌抑菌效果最佳,MIC值为31.250 mg/mL;栀子、地榆、丁香对罗非鱼华纳葡萄球菌抑菌效果较好,MIC值为62.500 mg/mL。联合用药结果显示,在对大肠杆菌的体外抑菌试验中,大青叶与地榆、大青叶与黄连、大青叶与山楂、地榆与丁香、地榆与山楂、丁香与黄连、丁香与山楂、黄连与山楂等药物联合均为拮抗作用(FIC指数>2.000),其余发生沉淀反应;在对华纳葡萄球菌的体外抑菌试验中,只有山楂和黄连联用时有相加作用,其FIC值为1.000,其余均为无关作用或发生沉淀反应。由此可见,两种中药进行联合用药有可能产生无关甚至拮抗等作用,反而导致抑菌活性降低。

湛江地区水产养殖场大肠杆菌耐药性和耐药基因分析

从湛江地区3个水产养殖场分别采集各场的水、池塘底泥和土壤样品,分离鉴定大肠杆菌,调查水产养殖环境中大肠杆菌的耐药情况。采用PCR法鉴定分离菌株,通过纸片扩散法检测分离菌株对22种抗生素的耐药性,PCR法检测耐药基因的携带情况。结果显示,从水体、池塘底泥和土壤样品中共分离鉴定出90株大肠杆菌,分离菌株对青霉素、林可霉素和克林霉素的耐药率为100%;对磺胺异(口恶)唑、利福平、新诺明、阿莫西林和氟苯尼考的耐药率分别为90.0%、88.9%、80.0%、57.8%和48.9%;对头孢唑啉、头孢噻肟、阿奇霉素和多肽类、喹诺酮类、四环素类、硝基呋喃类抗生素的耐药率较低(1.1%~8.9%);对丁胺卡那霉素和庆大霉素的耐药率为0。分离的90株菌均至少对4种药物耐受,最多耐受14种药物,耐受9种药物的菌株数最多,且90株均为多重耐药菌株。该养殖场分离的90株菌中bla;、aphA1、sul2、floR等6种耐药基因检出率较高(≥50%);aac(3)-Ⅱ、ereA、oqxB、tetM、sul1等5种耐药基因检出率较低(≤20%)。单株菌株至少检出1种耐药基因,最多检出10种耐药基因,其中携带6种耐药基因的菌株数最多(25株)。本试验表明当地养殖场环境中大肠杆菌耐药性较严重。

鸡大肠杆菌病的辨证和中西医治疗

鸡大肠杆菌病是家禽养殖业中常见多发性疾病之一。因大肠杆菌的耐药性增强,抗生素药效降低,探索和改进临床治疗方法是急需解决的问题。本文通过鸡大肠杆菌病的临床表现、病理变化,从脏腑辨证和卫气营血辨证等方面对该病进行分析。外邪(大肠杆菌)侵犯病鸡后机体表现为实热病证,心火亢盛、气血瘀滞、湿热内蕴;随着病情加重,表现为里虚病证,脾气虚弱、肝不藏血、肾气虚弱;在大肠杆菌病发病的不同阶段也可辨证为卫气营血中的卫分、气分、营分和血分病证。治疗可采用中药与抗生素联用的方法,并优先选择具有清热生津、燥湿解毒和涩肠止痢的中药。三黄汤具有清热燥湿、泻火、解毒的作用,黄连解毒散具有清热凉血、止痢的功效,是治疗大肠杆菌病的代表性药物。

具有抑菌活性的红树植物根际土壤细菌鉴定及多样性研究

为在红树植物根际土壤中挖掘具有广谱抑菌活性的细菌。以大肠埃希氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌作为指示菌,采用琼脂扩散法对红树植物根际土壤中分离到的细菌进行抑菌活性筛选,提取活性菌株的DNA,对其16S rRNA基因进行测序分析。试验从红树植物根际土壤中共分离702株细菌,筛选出35株具有抑菌活性的菌株,其中M27抑菌效果最好,对4种指示菌均具有抑菌作用,且抑菌圈直径均在13 mm以上。在属水平上,具有抑菌活性的菌株分属7个属,其中芽孢杆菌属为优势菌属,占有抑菌活性菌株的54.3%。试验初步揭示了红树植物根际土壤具抑菌活性细菌的多样性,为开发新型抗菌药提供理论依据。