中医药治疗登革热研究进展

登革热是由4个血清型的登革病毒引起,通过媒介伊蚊叮咬传播,是在世界范围内流行分布最广、发病人数最多、危害性极大的一种虫媒病毒性传染病[1]。1970—1989年,我国东南沿海地带曾数次暴发较大规模的登革热疫情[2-3],之后疫情基本得到控制,大体呈零星散发与局部聚集性小规模暴发结合态势。自2012年起疫情形势再度严峻,连续7年出现较大规模的本地暴发[4],流行区域逐渐由东南沿海向内陆地区蔓延[5]。2019年全国共有13个省(自治区、直辖市)曾暴发登革热本地病例,点多面广,达到了自新中国成立以来登革热本地病例发生省份数量的最高水平[6]。对于登革热的治疗西医尚无特效药物,主要采取对症支持治疗。媒介控制和疫苗接种是防治本病的有效途径,但截至目前,尚没有非常安全、稳定的登革热疫苗可以满足对抗4个血清型登革病毒的需求[7]。登革热虽属现代医学病名,古代中医论著中却有不少涉及本病的阐述,中医药历史悠久,参与登革热治疗已有超过30年的历史。通过在临床实践中的长期探索,目前对登革热的中医溯源、病因病机、治则治法等有了较为详尽的了解,对如何运用中医辨证论治的优势治疗登革热也取得了一些研究进展。

灵芝多糖抗肿瘤作用机制研究进展

总结灵芝多糖的抗肿瘤作用机制。灵芝多糖主要是通过提高机体免疫功能从而达到抗肿瘤的效果,而灵芝多糖对体外培养的肿瘤细胞没有直接的抑制作用。灵芝多糖还可通过抑制肿瘤细胞增殖、迁移,诱导肿瘤细胞凋亡,降低肿瘤细胞耐药性和降低化疗药物毒性等途径发挥抗肿瘤作用。灵芝多糖的抗肿瘤作用机制仍有较多争议,尚未达成共识,仍需要更深入的研究来确定其确切的机制和途径。

野生和养殖绿鳍马面鲀肌肉品质及肠道菌群的比较

为更好地对绿鳍马面鲀养殖进行管理,比较研究了野生和养殖绿鳍马面鲀的肌肉品质与肠道微生物菌群的结构差异性。结果表明:野生绿鳍马面鲀的肌肉持水、持鲜、抗腐能力均优于养殖绿鳍马面鲀;野生和养殖绿鳍马面鲀肌肉的氨基酸组成及含量差异不显著,但野生绿鳍马面鲀多不饱和脂肪酸含量高于养殖绿鳍马面鲀。绿鳍马面鲀肠道中变形菌门、厚壁菌门、放线菌门和拟杆菌门为优势细菌门,子囊菌门为优势真菌门;优杆菌属、支原体-f-未分级、乳酸杆菌属、短波单胞菌属为优势细菌属,酵母菌属为优势真菌属。养殖环境下的绿鳍马面鲀肠道菌群结构及相对丰度与野生环境的绿鳍马面鲀相比已发生明显变化:在门水平下,细菌拟杆菌门和梭菌门在养殖绿鳍马面鲀中的相对丰度低于野生绿鳍马面鲀,真菌担子菌门和壶菌门在养殖绿鳍马面鲀中的相对丰度高于野生绿鳍马面鲀;在属水平下,黄杆菌属和不动杆菌属在养殖绿鳍马面鲀中的相对丰度高于野生绿鳍马面鲀,而支原体则低于野生绿鳍马面鲀,酵母属在养殖绿鳍马面鲀中的相对丰度低于野生绿鳍马面鲀,根霉属和曲霉属则高于野生绿鳍马面鲀。和养殖绿鳍马面鲀相比,野生绿鳍马面鲀肌肉更为多汁鲜嫩且必需氨基酸、必需脂肪酸含量更高;养殖环境让绿鳍马面鲀的肠道菌群在门水平和属水平下均发生了改变。研究结果可为后续绿鳍马面鲀肠道微生物的研究和养殖管理提供基础数据和参考。

壳聚糖-卡那霉素接枝物的制备及抑菌性能研究

壳聚糖被广泛应用于食品中,但其抑菌性能较弱.为了提高壳聚糖的抑菌性能,接枝卡那霉素,制备壳聚糖-卡那霉素接枝物,将其作为一种理想的抑菌材料应用到食品中.以壳聚糖和卡那霉素为主要原料,通过单因素试验研究反应温度、反应时间及高碘酸钠用量对壳聚糖氧化醛基含量的影响,结合响应面试验优化确定壳聚糖氧化的最佳条件;将氧化的壳聚糖粉末溶液与卡那霉素溶液混合,在60℃的油浴锅中反应6 h,得到壳聚糖-卡那霉素接枝物溶液;经透析冷冻干燥得到接枝物,将壳聚糖和接枝物进行抑菌性能比较.结果表明:壳聚糖氧化的最佳条件为反应时间4 h、高碘酸钠用量4.8 g、反应温度40℃,在此条件下计算出醛基含量为4.89mmol/g,理论值(4.07 mmol/g)与试验值的相对偏差为0.82%;将氧化的壳聚糖与卡那霉素进行席夫碱反应,显示卡那霉素成功接枝上,元素分析计算得知,接枝物中卡那霉素的接枝率达到52%;通过抑菌试验可知,接枝物的抑菌性能优于壳聚糖.

辣木籽异硫氰酸酯柔性脂质体的制备工艺研究

为提高辣木籽异硫氰酸酯的稳定性及生物利用率,使用薄膜分散法,以卵磷脂和胆固醇的质量比、卵磷脂和胆酸钠的质量比、超声时间为影响因素,以包封率为评判标准,采用单因素和响应曲面法进行辣木籽异硫氰酸酯柔性脂质体的工艺优化。使用低温超速离心法分离柔性脂质体中游离的辣木籽异硫氰酸酯以计算其包封率;通过紫外分光光度计法测定异硫氰酸酯含量。结果表明,辣木籽异硫氰酸酯柔性脂质体优化后的工艺为卵磷脂与胆固醇质量比9.95∶1、卵磷脂与胆酸钠质量比10.32∶1、超声时间7.78 min,在此条件下制备的辣木籽异硫氰酸酯柔性脂质体包封率为64.17%。通过表征,辣木籽异硫氰酸酯柔性脂质体的粒径为348 nm,多分散系数为0.251,Zeta电位为-24.7mV。透射电镜显示该柔性脂质体分散比较均匀,呈较规则圆形。经过24 h体外释放率检测后,发现该柔性脂质体体外释放率最后保持在80.105%,具有缓释的效果。

辣木叶多糖提取分离及其抗氧化研究

以辣木叶为原料,首先对植物多糖提取的影响因素及工艺进行研究,其次通过不同体积分数乙醇分级醇沉多糖探索辣木叶多糖的抗氧化性。采用热水浸提法,在单因素的基础上进行正交试验,考察辣木叶多糖得率的影响因素,通过乙醇梯度沉淀分级的方法得到3种辣木叶多糖,分别命名为MP-1(40%乙醇)、MP-2(60%乙醇)、MP-3(80%乙醇),真空冷冻干燥后得到这3种辣木叶粗多糖,并探讨辣木叶多糖体外抗氧化活性。通过单因素及正交试验得出辣木叶多糖的最佳提取工艺为:料液比1∶20 g/mL、提取温度85℃、提取时间2.5 h、提取次数2次,在此条件下,辣木叶多糖得率为2.039%。体外抗氧化实验表明,MP-1、MP-2、MP-3均具有良好的DPPH自由基清除活性,在辣木叶多糖浓度为25μg/mL时,MP-1的DPPH自由基清除能力最低,此时MP-3的DPPH自由基清除能力最高,达到85.34%。该提取工艺条件稳定可行,多糖得率较高,且具有较强的抗氧化能力;该提取方法无需特殊设备,生产工艺成本低,安全,适合工业化大生产,是一种可取的提取方法。

疏水性组织透明化技术的研究进展

组织透明化技术可通过降低光散射和光吸收使样本在视觉下达到透明,并结合光学显微镜和荧光标记技术实现组织结构三维重建,弥补传统组织切片技术的不连续性、图像重建困难等缺陷。近年来,组织透明化技术逐渐发展,其中疏水性组织透明化技术因具有操作简单、透明速度快和透明度高等特点而广泛应用,本文从其透明程序、发展和应用三个方面进行综述。

磷酸化扁藻胞外多糖的修饰及其抗肿瘤活性研究

目的优化扁藻胞外多糖的磷酸化工艺并研究磷酸化扁藻胞外多糖对肿瘤的抑制作用。方法以正交实验分析影响扁藻胞外多糖磷酸化的因素,分别检测扁藻胞外多糖(PEPs)和磷酸化扁藻胞外多糖(pPEPs)的红外吸光度,利用MTT法研究扁藻胞外多糖及其磷酸化衍生物对Raw 264.7的生长抑制作用。结果正交实验显示最佳多糖磷酸化工艺条件为:反应温度为100℃,反应时间为6 h,磷酸化试剂比例为6∶1,pH=8。PEPs与pPEPs样本经红外吸光度扫描显示多糖均为吡喃型多糖,以共价键形式连接的磷酸化多糖修饰成功。MTT结果显示PEPs与pPEPs均对小鼠巨噬细胞Raw 264.7的增殖具有抑制作用(P<0.05或0.01),且以pPEPs的抑制作用更为显著(P<0.05或0.01)。结论以正交实验统计方法筛选扁藻胞外多糖磷酸化工艺操作简单方便,pPEPs具有体外抗肿瘤作用。

马尾藻多糖拮抗LPS诱导的巨噬细胞极化及铁死亡

目的:研究马尾藻多糖(SP)对抗脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞极化和铁死亡,以明确SP是否存在对免疫功能的调节作用。方法:分离、提纯和鉴定SP,建立LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症模型。采用CCK-8法检测SP对巨噬细胞增殖的影响,采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法和Western blot法分别检测巨噬细胞极化相关指标CD80、CD163、IL-6、IL-10、精氨酸-1(Arg-1)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、TNF-α含量。为了解巨噬细胞铁死亡情况,以活性氧(ROS)检测试剂盒检测ROS含量,并以Western blot法检测谷胱甘肽过氧化物4(GPX4)的表达。结果:成功分离SP,并鉴定其不属于呋喃糖。高浓度SP对巨噬细胞具有促增殖作用,并对LPS诱导的细胞增殖抑制具有显著的保护作用。SP能使RAW264.7细胞向M2极化,并且能拮抗LPS诱导的M1极化。LPS可诱导巨噬细胞内ROS显著增加,SP则可使其ROS水平显著降低。LPS诱导巨噬细胞的GPX4蛋白表达水平显著降低,高浓度的SP能显著上调其表达(P均<0.05)。结论:SP诱导巨噬细胞向M2极化,拮抗LPS诱导的巨噬细胞M1型极化和铁死亡。

响应面法优化方格星虫多肽-钙螯合物的制备工艺

目的探究方格星虫多肽-钙螯合物的最佳制备工艺。方法通过单因素试验探究螯合反应中肽钙质量比及反应时间、温度、pH对螯合率的影响。通过Box-Behnken响应面试验探究螯合反应的最佳工艺。结果经过Box-Behnken响应面试验的优选,方格星虫多肽-钙螯合物的最佳制备工艺条件为:肽钙质量比5∶1、反应时间30 min、反应温度60℃、反应pH 7.0,经验证试验后方格星虫肽钙螯合率可达68.32%。结论响应面法优化的方格星虫多肽-钙螯合物的制备工艺简单、高效。

大黄蒽醌对大鼠糖皮质激素性股骨头坏死的保护作用

目的观察大黄蒽醌对大鼠糖皮质激素性股骨头坏死的保护作用。方法162只SD雌性大鼠随机分为正常组、模型组、实验组,分别给予生理盐水、醋酸泼尼松(3.5 mg/kg)、大黄蒽醌(70 mg/kg)+醋酸泼尼松(3.5 mg/kg)灌胃13周。每组在3、5、7、9、11、13周处死9只大鼠,进行股骨头Micro CT扫描及重建、骨形态计量学分析。结果MicroCT重建显示在3周时3组骨小梁结构近乎相似;13周时,模型组骨小梁结构遭到严重破坏,全骨结构特性破坏,实验组接近于正常组。与正常组比较,模型组与实验组在3、5、7、9、11周骨小梁骨密度(Tb.BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)水平下降,结构模型指数(SMI)、骨小梁分离度(Tb.Sp)升高,且模型组更为显著(P<0.01或0.05);13周时,实验组Tb.BMD、BV/TV、Tb.Th、Tb.N水平高于模型组,SMI、Tb.Sp水平低于模型组(P<0.01)。结论大黄蒽醌对大鼠糖皮质激素性股骨头坏死有预防作用。

血管紧张素转化酶与相关疾病的关联机制

生命体的氧化应激参与各种疾病的发生发展进程,而氧化应激的发生与血管紧张素转化酶(ACE)有密切联系。研究ACE结构特征与疾病关联机制,有助于阐明相关疾病的发病机制及研发靶向药物。该文综述了ACE与相关疾病的关联机制。

海洋来源多肽生物活性及提纯方法研究进展

海洋生物来源的多肽,种类丰富,结构新颖,副作用小,是近年来研究的热点。本文主要对海洋生物来源的具有血管紧张素转化酶(ACE)抑制、抗氧化、抗菌、抗肿瘤的多功能活性肽进行综述,并对多肽的提取分离方法进行介绍,为进一步研究海洋生物活性肽提供参考。

基于生物信息学分析胃癌铁死亡相关基因预后及免疫细胞浸润的临床和功能意义

目的:采用生物信息学方法寻找胃癌(GC)中有预后价值的差异表达基因(DEGs)和免疫细胞浸润矩阵,并探讨其临床和功能意义。方法:建立基于TCGA GC数据集的10个铁死亡相关基因风险模型,并采用GEO数据集验证其预后预测准确性。利用R软件clusterProfiler包进行功能富集分析。单样本基因集富集分析(ssGSEA)量化16个免疫细胞的浸润水平和13个免疫相关通路活性。结果:根据10基因模型得出的中位风险评分将患者分为高风险组和低风险组。生存分析表明,高风险组和低风险组GC患者总生存率(OS)差异有统计学意义。铁死亡相关风险评分与是GC患者OS的独立预测因子。功能富集分析显示,风险模型与PI3K-Akt信号通路相关。ssGSEA和免疫评分相关性分析指出了高风险组中上调的免疫细胞和免疫相关途径,开发了一个列线图帮助临床医生更好地决策。结论:基于10个铁死亡相关基因的风险模型显示出较好的预后预测性能,为GC提供了一种有希望的治疗策略。

方格星虫低聚肽的分离、鉴定及其促骨发育作用评价

目的:从方格星虫中分离和筛选可促进骨形成的生物活性低聚肽。方法:通过酶解法和膜分离法制备寡肽,并通过HPLC-MS/MS鉴定肽段序列。通过在线数据库预测药物形成,并通过斑马鱼模型评估促进骨形成的作用。结果:共鉴定出10种低分子量肽,通过斑马鱼骨发育模型获得了两种潜在的候选肽,其氨基酸序列分别为GFAGDDAPR和GLGGLSPEK;分别命名为GSP1和GSP2;其分子量分别为905.04和857.06 Da;与空白对照组相比,1~50μg/mL GSP1溶液浓度处理的AB斑马鱼幼鱼颅骨积分光密度和绿色荧光的面积均有所增加,GSP1浓度在5μg/mL时促进骨发育的效果最好(P<0.05)。1~50μg/mL GSP2溶液浓度处理的AB型斑马鱼幼鱼颅骨积分光密度和绿色荧光的面积均有所增加,且随着浓度的增加而增大,GSP2浓度在50μg/mL时促进骨发育的效果最好(P<0.05)。结论:小于1000 Da的寡肽有望成为促进骨形成的候选药物。

亲水性透明化技术在骨组织的应用

在整体组织上实现细胞及亚细胞水平的三维成像是现代组织病理发展的新趋势。光透明化技术的出现打破了组织表面阻隔光透射的壁垒,结合现代光学成像技术可在组织器官上获取包含细胞及亚细胞层面在内的三维图像信息。亲水性透明化方案具有使用简单、无毒性和对荧光蛋白保护性高等特点,是应用最为广泛的组织透明化工具。但其对硬组织渗透性差,折射率匹配性差,在对包含骨在内的硬组织的应用上受到了极大的限制。本文综述亲水性透明化方案针对硬组织透明的发展历程,以推动透明化技术的革新。

化橘红花、果中挥发油成分的比较

目的比较化橘红花、果中挥发油成分差异。方法采用低温变压浸出法提取化橘红花、果中挥发油,再用精馏法分离、气相色谱-质谱联用技术分析挥发油中轻、重组分。结果化橘红花、果中轻组分挥发油成分包括萜类、醇类、酯类、脂肪酸和芳香烃类,均以脂肪酸、萜类为主;重组分挥发油成分包括甾醇类、香豆素类、脂肪酸类、萜类和烷烃类,均以甾醇类、脂肪酸类为主。结论化橘红花、果中挥发油成分、含量相似。

组织透明化三维成像技术在卵巢组织中的应用进展

卵巢是哺乳动物生殖系统的重要器官,目前对卵巢的了解多在二维层面。组织透明化三维成像技术的快速发展为卵巢三维可视化提供了平台,可以通过组织透明化方法和光学成像技术对正常和病理卵巢组织进行全面成像,从细胞或亚细胞单位水平探索卵巢组织及其与脉管和神经系统的关系,并揭示卵巢组织的空间关系和构造特征。该技术还可以分析卵巢肿瘤的三维结构及生长模式,并研究脉管和神经系统的密度、完整性及形态异质性等,为卵巢肿瘤的治疗和预后提供方向。综述组织透明化三维成像技术在哺乳动物卵巢组织中的应用进展,以期对卵巢组织进行更深入的了解。

肺腺癌患者代谢相关基因和免疫相关预后模型的建立

目的:构建一个基于代谢相关基因(MRGs)的肺腺癌(LUAD)预测模型并分析肿瘤免疫微环境(TIME)与MRGs的关系。方法:从TCGA和GEO数据库下载LUAD的基因表达数据,Msign数据库提取MRGs,取交集得到LUAD患者MRGs表达矩阵和对应的临床数据。单因素COX回归分析和Lasso回归分析筛选出生存相关MRGs并据此构建风险预测模型。采用Kaplan-Meier曲线验证模型区分高低风险患者的能力,ROC曲线预测患者生存率的稳定性。对模型基因进行GO、KEGG富集分析和单样本基因集富集分析(ssGSEA)以评估相关通路活性和免疫细胞浸润水平。结果:构建并验证了一个基于MRGs的预后模型,该模型能较好地区分高低风险的LUAD患者,具有稳定的预测性能,并可在一定程度反映TIME。基于模型风险评分绘制的列线图可更准确地预测LUAD患者一、三、五年生存率,更方便临床使用。结论:本研究确定了一些有临床意义的MRGs,是LUAD患者生存率、TIME的潜在预测指标。基于这些基因构建的风险模型和列线图具有良好的预测性能。