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外源生长激素基因在蓝太阳鱼中的整合、表达和遗传 被引量:10
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作者 曹运长 李文笙 +1 位作者 叶卫 林浩然 《动物学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第2期299-307,共9页
通过基因重组, 将石斑鱼生长激素基因编码序列克隆到鲤鱼βactin基因启动子下游, 构建了“全鱼”生长激素基因表达载体pCAecGHc。采用显微注射法, 研制出转“全鱼”生长激素基因蓝太阳鱼。经过PCR、PCR Southern杂交、RT PCR等技术对转... 通过基因重组, 将石斑鱼生长激素基因编码序列克隆到鲤鱼βactin基因启动子下游, 构建了“全鱼”生长激素基因表达载体pCAecGHc。采用显微注射法, 研制出转“全鱼”生长激素基因蓝太阳鱼。经过PCR、PCR Southern杂交、RT PCR等技术对转植基因在转基因蓝太阳鱼中的整合和表达情况进行了检测。结果表明:转植基因在两批次P0 转基因蓝太阳鱼中的整合率为5 .60%和12. 26%, 并在转基因鱼中得到了正确表达, 表现为嵌合性表达。对转基因蓝太阳实验鱼进行了对照养殖实验, 初步显示转基因蓝太阳鱼具有较快的生长表型效应, 比对照组生长速度快20%-40%左右。应用近交策略培育出了两个转基因蓝太阳鱼F1 品系, 检测表明, 转植基因在两个品系的整合率分别为22 .03%和40 .8%。结果表明: 转植基因通过性腺传递给了子代, 同时也证实转基因P0 代的生殖腺为转植基因的嵌合体。 展开更多
关键词 外源生长激素基因 蓝太阳鱼 基因整合 基因表达 转基因 性腺
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蓝太阳鱼生长激素全长cDNA的克隆与序列分析 被引量:9
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作者 曹运长 李文笙 +1 位作者 叶卫 林浩然 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期589-593,共5页
The full length cDNA encoding growth hormone of a freshwater fish, Lepomis cyanellus, (LcGH) was cloned from pituitary RNA with RT-PCR, 3′and 5′ RACE (rapid amplification of cDNA ends). The LcGH cDNA (Genbank No. AY... The full length cDNA encoding growth hormone of a freshwater fish, Lepomis cyanellus, (LcGH) was cloned from pituitary RNA with RT-PCR, 3′and 5′ RACE (rapid amplification of cDNA ends). The LcGH cDNA (Genbank No. AY530822), about 989nt (nucleotide) long, consisted of a open reading frame with 615nt long, 5′and 3′untranslated regions with 93nt and 224nt long respectively, and a 57nt poly (A) tail. The DNA sequence analysis showed that there are typical Kozak sequence and polyadenylation signal. The pregrowth hormone peptide of 204aa deduced from LcGH cDNA included a putative signal peptide (17aa) locating in its N-terminal. There exist a Asn-Cys-Thr glycosylation site at amino acid 201, and 4 cysteine residues (No. 69, 177, 194, 202) that are essential to construct two S-S bonds in this pregrowth hormone peptide. Homological comparision among LcGH and other species growth hormones showed that There is high homology (more than 85%) between growth hormone of Lepomis cyanellus and that of most perciformes fish, but low homology (less than 70%) in comparison with other species such as Siluriformes and Cypriniformes fish. 展开更多
关键词 蓝太阳鱼 生长激素 逆转录-聚合酶链式反应 CDNA末端快速扩增
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蓝太阳鱼第一次性周期性腺发育的组织学 被引量:5
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作者 曹运长 李文笙 +1 位作者 叶卫 林浩然 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期88-95,共8页
蓝太阳鱼(Lepomis cyanellus)是广东省于1997年从北美引进的小型淡水鱼类,本文采用组织切片技术对蓝太阳鱼的性腺发育进行了研究。蓝太阳鱼的性腺发育程序可以分为5个时期。在1月龄,卵巢和精巢处于第Ⅰ期;2-3月龄时,卵巢和精巢发育到... 蓝太阳鱼(Lepomis cyanellus)是广东省于1997年从北美引进的小型淡水鱼类,本文采用组织切片技术对蓝太阳鱼的性腺发育进行了研究。蓝太阳鱼的性腺发育程序可以分为5个时期。在1月龄,卵巢和精巢处于第Ⅰ期;2-3月龄时,卵巢和精巢发育到第Ⅱ期;4月龄时发育到第Ⅲ期;5-6月龄时发育到第Ⅳ期;7-8月龄时达到性成熟第Ⅴ期。过冬时,卵巢退化到第Ⅱ-Ⅲ期,而精巢仍停留在第Ⅴ期。成熟卵巢的成熟系数为2.80%-8.10%,成熟精巢的成熟系数为1.45%-3.45%。精巢和卵巢发育都为不完全同步型,且精巢发育比卵巢稍快。蓝太阳鱼的繁殖期在广州地区为3-11月,为多次产卵类型。本文从生殖和生长的关系上对蓝太阳鱼生长缓慢的原因进行了初步探讨,并将蓝太阳鱼作为一种鱼类实验动物的可行性进行了分析。 展开更多
关键词 蓝太阳鱼 精巢 卵巢 性腺发育
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长臀鮠胚胎发育的研究 被引量:8
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作者 周立斌 叶卫 《水产科学》 CAS 北大核心 2007年第1期31-34,共4页
催产4龄亲鱼,催产药物为LHRH-A,DOM,CPE,催产率66%,孵化率20%;长臀鮠成熟卵圆球形,透明,卵径平均(1.10±0.20)mm,为沉性卵,具黏性,受精卵孵化分为胚盘阶段、卵裂阶段、囊胚阶段、原肠阶段、神经胚期、器官分化阶段和孵化等7个阶段,... 催产4龄亲鱼,催产药物为LHRH-A,DOM,CPE,催产率66%,孵化率20%;长臀鮠成熟卵圆球形,透明,卵径平均(1.10±0.20)mm,为沉性卵,具黏性,受精卵孵化分为胚盘阶段、卵裂阶段、囊胚阶段、原肠阶段、神经胚期、器官分化阶段和孵化等7个阶段,当水温26-29℃时,孵化时间为96h10min。 展开更多
关键词 长臀鮠 全人工繁殖 胚胎发育
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硬骨鱼类促性腺激素分泌调控的研究进展 被引量:2
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作者 周立斌 叶卫 《水利渔业》 北大核心 2007年第2期1-2,共2页
综述了国内外有关硬骨鱼类促性腺激素分泌调控的研究进展,包括硬骨鱼类促性腺激素类型、促性腺激素分泌调控、促性腺激素基因表达调控等。
关键词 硬骨鱼类 促性腺激素 性腺发育 调控
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外源基因在蓝太阳鱼胚胎发育过程中的表达
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作者 曹运长 李文笙 +1 位作者 叶卫 林浩然 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期62-66,共5页
通过基因重组,将石斑鱼生长激素基因编码序列克隆到鲤鱼β_actin基因启动子下游,构建成全鱼基因重组子。采用显微注射法将报告基因GFP基因导入蓝太阳鱼受精卵中,研究了外源基因在鱼类胚胎发育中的整合与表达的时序。结果表明GFP在原肠... 通过基因重组,将石斑鱼生长激素基因编码序列克隆到鲤鱼β_actin基因启动子下游,构建成全鱼基因重组子。采用显微注射法将报告基因GFP基因导入蓝太阳鱼受精卵中,研究了外源基因在鱼类胚胎发育中的整合与表达的时序。结果表明GFP在原肠末期开始表达,一直到鱼苗期并未出现表达量的衰减,并表现为嵌合性表达。在受体胚胎早期,外源基因的表达与基因构型和注射的剂量有关,环形质粒的表达要略高于线形质粒,较高浓度的外源基因的表达效率要高。同时将GFP基因与全鱼基因重组子进行了共转移,结果表明两种独立的基因在受体中的整合或表达没有必然的联系。 展开更多
关键词 GFP 生长激素基因 基因重组 基因转移 共转移
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