EV71感染手足口病患儿细胞免疫及体液免疫功能变化研究

目的研究EV71感染手足口病患儿细胞免疫及体液免疫功能的临床变化特点。方法随机选取2014年1月~2015年6月医院收诊的60例EV71感染手足口病患儿,按照《手足口病诊疗指南（2010版）》将患儿分为轻型（A组）和重型（B组）,再随机选取2014年1月~2015年6月至医院体检的30例正常儿童作为对照组（C组）,观察比较三组静脉血淋巴细胞（Th细胞、Ts细胞、B细胞）、血清炎性介质（TNF-α、IL-6、IL-10）、血清免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）及补体（C3、C4）表达水平。结果1静脉血淋巴细胞表达水平：A、B两组的Th细胞、Ts细胞表达水平显著低于C组,B细胞表达水平高于C组,差异有统计学意义（P〈0.05）;2血清炎性介质表达水平：A、B两组的TNF-α、IL-6、IL-10表达水平显著高于C组,且B组显著高于A组（P〈0.05）;3血清免疫球蛋白水平及补体水平：A、B两组的IgA、IgG水平高于C组,且B组显著高于A组（P〈0.05）;三组的IgM水平比较差异无统计学意义;A、B两组的C3、C4水平显著高于C组,且B组显著高于A组（P〈0.05）。结论EV71感染手足口病患儿呈细胞及体液免疫功能异常表现,且与患儿的病情有一定的相关性,检测相关血清指标有助于提高临床预后评估质量。

三种不同腺病毒基因组提取方法对全基因组克隆构建的影响分析

目的 建立一种简单、快速、有效、纯度高的人腺病毒全基因组提取的方法 。方法 用60 mm细胞培养皿培养A549或AD293细胞,接种培养人7型腺病毒（HAdV-7）CQ1198株,收集病毒感染的细胞,分别用Hirt＇s改良法、试剂盒A和试剂B提取HAdV-7-CQ1198病毒株全基因组,提取的基因组进行限制性内切酶酶切实验、细菌内同源重组实验和转染细胞拯救病毒实验。结果 几种方法都成功获得高质量的腺病毒全基因组,可以用于PCR、测序、酶切、同源重组和转染实验;两种试剂盒方法较传统的Hirt＇s改良法更快,不需要特别步骤去除细胞基因组,可以在1h内完成基因组提取。其中,试剂盒A提取的病毒基因组量最多（20-50μg）,RNA含量最少,不需要另外加入核糖核酸酶（RNase）,而Hirt＇s改良法需要在裂解液中或最终产物中加入RNase以去除细胞RNA成分。结论 试剂盒A和试剂盒B均可替代传统Hirt＇s提取方法用于快速提取高质量腺病毒基因组,提取的基因组能用于酶切分型、转染等实验操作。

冠状动脉疾病与血清Hcy、叶酸及维生素B12水平的相关性

目的探讨冠状动脉疾病与血清Hcy、叶酸及维生素B12水平的相关性。方法选取2018年1~12月在我院诊断治疗的冠状动脉病变患者60例为研究对象,根据冠脉Gensini积分分为<30分组(19例),30~60分组(22例)与>60分组(19例)。另选取健康志愿者20例为对照组。比较各组血清Hcy、叶酸及维生素B12水平,分析冠状动脉疾病患者冠脉Gensini积分与血清Hcy、叶酸及维生素B12水平的相关性。结果(1)<30分组、30~60分组、>60分组Hcy水平显著高于对照组,叶酸水平、维生素B12水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);30~60分组、>60分组Hcy水平显著高于<30分组,叶酸水平、维生素B12水平显著低于<30分组,差异有统计学意义(P<0.05);>60分组Hcy水平显著高于30~60分组,叶酸水平、维生素B12水平显著低于30~60分组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)血清Hcy与冠脉Gensini积分呈显著正相关的关系(r=0.890)。(3)血清叶酸水平与Gensini积分呈显著负相关的关系(r=-0.767)。(4)维生素B12与Gensini积分呈显著负相关的关系(r=-0.698)。结论冠状动脉疾病患者血清Hcy水平显著升高,叶酸及维生素B12水平显著下降,并且与病变Gensini积分密切相关。Hcy与Gensini积分显著正相关,叶酸及维生素B12水平与Gensini积分显著负相关。

实时荧光定量PCR法在手足口病中的诊断价值

目的探讨实时荧光定量PCR(QPCR)法在手足口病中的诊断价值。方法回顾性分析2019年1—12月来广东医科大学附属东莞儿童医院就诊的手足口病儿童163例,将其作为试验组,选取同期161例入院体检儿童作为对照组,所有儿童均采集粪便进行QPCR检测。结果试验组163例儿童中检测阳性144例(88.34%),对照组161例儿童中阳性3例(1.86%),两组比较差异有统计学意义(P<0.05),144例手足口病患者中主要以肠道病毒EV为主,有102例(70.83%),其次是CA16,有33例(22.92%),最后是EV71,有9例(6.25%)。结论QPCR对手足口病的诊断具有较高的临床意义。