广东东莞地区犬、猫弓形虫血清学调查

应用正向间接血凝试验，对东莞市2005-2006年采集的629份犬、猫血清进行了弓形虫抗体检测，其中检测的610份犬血清，抗体阳性4份，抗体阳性检出率为0．66％，检测的19份猫血清中，抗体阳性0份。

东莞市猪圆环病毒2型的血清学调查

从2004年12月～2005年4月,对东莞市26个镇、区74个猪场,16个镇屠场,共采集猪血清1766份,用酶联免疫吸附试验法检测,共检出阳性血清235份,总阳性率13.31%;阳性场46个,占所检测场的62.16%,阳性屠场3个,占所检测屠场的18.75%.血清学调查结果显示,PCV-2在东莞市猪场的感染已普遍存在.

东莞市5种猪病的血清学调查

在东莞市29个养猪场和26个屠宰场共抽取了989份猪血清,应用正向间接血凝试验对猪瘟、弓形虫、衣原体抗体进行了检测,应用酶联免疫吸附试验对伪狂犬病gE抗体进行了检测,应用虎红平板凝集试验对布鲁菌病抗体进行了检测。养猪场猪瘟的免疫合格率是84.83%,弓形虫抗体阳性检出率4.98%,衣原体抗体阳性检出率10.66%,伪狂犬病gE抗体阳性率41.47%。屠宰场的猪瘟免疫合格率是30.51%,弓形虫抗体阳性检出率1.76%,衣原体抗体阳性检出率2.47%,伪狂犬病gE抗体阳性率14.99%。布鲁菌病抗体均未检出阳性。

东莞地区散养家禽禽流感H5免疫效果调查

应用禽流感血凝和血凝抑制方法对东莞地区散养家禽207个场点2006年采集的1514羽份家禽血清进行检测,结果总的免疫合格率为70.74%,其中第1季度的免疫合格率为88.68%,第2季度的免疫合格率为66.37%,第3季度的免疫合格率为63.27%,第4季度的免疫合格率为71.11%。

多重PCR方法检测大肠杆菌O157∶H7的初步研究

目的研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157∶H7的多重PCR方法。方法以大肠杆菌O157∶H7的O157抗原基因(rfbE基因)、鞭毛H7抗原基因(fliC基因)、粘附素基因(eaeA基因)和志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ(SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因)为扩增对象,设计能导至目的片段大小不同的5对引物,通过优化条件,建立了可用于粪便检测的大肠杆菌5重PCR。结果在同一扩增体系中,检测了5株不同来源的大肠杆菌O157∶H7及27株非大肠杆菌O157∶H7细菌。结果表明,该方法能从2株大肠杆菌O157∶H7中扩增出rfbEf、liC、eaeA、SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因,它们的大小分别为582 bp、802 bp、487 bp3、68 bp和177 bp。而另外3株大肠杆菌O157∶H7也能扩增出除eaeA、SLT-Ⅱ基因外的其它3个基因片段。表明该方法可用于检测大肠杆菌O157∶H7,还可检测细菌是否含有毒素基因。在检测27株非大肠杆菌O157∶H7,除O149出现SLT-II扩增产物和O1∶H7出现fliC基因扩增产物外,其它非大肠杆菌O157∶H7的扩增结果均为阴性,表明该方法有较高的特异性。当粪便样品经增菌培养12 h,用该5重PCR体系能检测出最初接种量为5cfu/g粪便的样品。结论本5重PCR方法具有较高的特异性和敏感性,可迅速、有效地将大肠杆菌O157∶H7与其它非大肠杆菌O157∶H7相区别,同时还能检测O157∶H7中的毒力因子。因此,通过进一步研究,本方法有望应用于临床大肠杆菌O157∶H7感染的辅助诊断。

大肠杆菌O_(157):H_7 rfbE基因和fliC基因的克隆与序列分析

根据已发表的E.coliO_(157):H_7EDL933株的rfbE基因和fliC基因,设计了两对引物,分别对两个O_(157):H_7菌株的rfbE基因和一个菌株的fliC基因进行PCR,并将PCR产物克隆于pMD18-T载体质粒。测序结果表明,获得到了与理论相符的582bprfbE基因片段和802bpfliC基因片段。一株菌的rfbE基因存在无意义突变(两个)。而另一株菌fliC基因有一个有意义突变(aac→gac)

应用荧光PCR方法检测猪链球菌2型

应用荧光PCR方法,对东莞市12个屠宰场份的120猪内脏和11个冻肉库的110份冻肉进行了猪链球2型检测,结果均为阴性。并随机从样品中选出22份样品进行了细菌分离鉴定,均未分离出猪链球菌2型。结果表明猪链球菌2型荧光PCR检测方法与传统的细菌分离鉴定方法一致,猪链球菌2型荧光PCR检测方法适合大规模动物产品的检测。