阿尔兹海默病中医药防治的新靶点:细胞自噬

分析了阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)的中医病机及其细胞自噬的现代病理机制。肾精不足、痰瘀阻滞、脑神失养为AD的主要中医病机,而肝肾亏虚、脾肾亏虚和痰浊血瘀阻窍可影响AD的发病;细胞自噬是AD的重要病理机制。以自噬通路为靶点的中医药防治AD的研究,将为中医药治疗AD和寻找新的临床药物提供思路。

新医改背景下中医医院急诊科建设的思考

随着医改的不断推进与发展,医院建设迎来了新的机遇与挑战,尤其是中医医院中的急诊科,需全面加强各方面的建设,以适应新医改的发展,文章对此进行了探讨。

石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠海马中单胺类神经递质的影响

目的:研究石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠的海马中单胺类神经递质的影响。方法:60只APP/PS1双转基因小鼠随机分为6组,雌雄各半,每组10只,即模型组、人参总皂苷(75 mg/kg)组、石菖蒲挥发油(15 mg/kg)组及石菖蒲挥发油+人参总皂苷低(15 mg/kg+75 mg/kg)、中(30 mg/kg+150 mg/kg)、高(60mg/kg+300 mg/kg)剂量组。正常对照组为C57BL/6品系的正常小鼠10只,雌雄各半。模型组和正常对照组用等体积蒸馏水代替,灌胃给药,连续30 d。末次给药后心脏灌注排血后取出海马组织,采用高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FD)法检测多巴胺(DA)、3,4-二羟基苯乙酸(DOPAC)、高香草酸(HVA)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟基吲哚乙酸(5-HIAA)和去甲肾上腺素(NE)的含量。结果:与正常对照组比较,模型组DA、DOPAC、HVA、5-HT、5-HIAA、NE含量及(DOPAC+HVA)/DA、5-HIAA/5-HT、DA/5-HT比值显著降低(P<0.01),DA/NE、5-HT/NE比值显著升高(P<0.01)。与模型组比较,石菖蒲挥发油+人参总皂苷各剂量组DA、DOPAC、HVA、5-HT、5-HIAA、NE含量及(DOPAC+HVA)/DA、5-HIAA/5-HT、DA/5-HT比值显著升高(P<0.01),DA/NE及5-HT/NE比值显著降低(P<0.01),且效果优于人参总皂苷组或石菖蒲挥发油组。结论:石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠海马中DA和5-HT的生成及代谢及NE的生成均有促进作用。

石菖蒲挥发油有效成分β-细辛醚联合左旋多巴对6-OHDA诱导帕金森模型大鼠的分子伴侣介导自噬的影响

目的:研究石菖蒲挥发油有效成分β-细辛醚联合左旋多巴(L-dopa)对6-羟基多巴(6-OHDA)诱导帕金森(PD)模型大鼠的分子伴侣介导自噬(CMA)的影响。方法:将SD大鼠通过脑立体定位仪于内侧前脑束(MFB)处注射6-OHDA制备PD模型大鼠。将60只PD大鼠随机分为5组,每组12只,即模型组、MEF2D抑制剂(SB203580,0.5 mg/kg)组、MEF2D激活剂(LiCl,100 mg/kg)组、β-细辛醚(15 mg/kg)组、联合用药组(L-dopa 60 mg/kg+β-细辛醚15 mg/kg)组。给药组按上述剂量灌胃给药,2次/d,持续30 d。而假手术组和模型组按0.5 mL/kg灌胃蒸馏水,2次/d。实验结束后ELISA法检测α-syn、TH、LAMP-2A、HSP70、MEF2D水平,RT-PCR法和Western blot法检测Beclin-1、HSP70、HSC70、MEF2D mRNA及蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组α-syn和Beclin-1显著升高,TH、LAMP-2A、HSP70、MEF2D、HSC70显著降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,MEF2D抑制剂组的α-syn显著升高,Beclin-1、TH、LAMP-2A水平及HSP70、MEF2D、HSC70 mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01),而LiCl组、β-细辛醚组和联合用药组的α-syn、Beclin-1显著降低,TH、LAMP-2A水平及HSP70、MEF2D、HSC70 mRNA表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:石菖蒲挥发油有效成分β-细辛醚与L-dopa联合用药通过调节HSP70/MEF2D/Beclin-1分子伴侣介导的自噬通路降低6-OHDA诱导PD大鼠中多巴胺能神经元的损伤。

石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠乙酰胆碱转移酶、胶质纤维酸性蛋白和海马组织病理形态学的影响

目的:观察石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠乙酰胆碱转移酶(choline acetyl transferase,ChAT)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和海马组织病理形态学的影响。方法:60只APP/PS1双转基因阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠随机分为6组(n=10),即模型组(蒸馏水),人参总皂苷组(75mg·kg^(-1)),石菖蒲挥发油组(15 mg·kg^(-1)),联合低剂量组(15 mg·kg^(-1)石菖蒲挥发油联合75 mg·kg^(-1)人参总皂苷),联合中剂量组(30 mg·kg^(-1)石菖蒲挥发油联合150 mg·kg^(-1)人参总皂苷),联合高剂量组(60 mg·kg^(-1)石菖蒲挥发油联合300 mg·kg^(-1)人参总皂苷)。另取10只C57BL/6小鼠为正常组。正常组和模型组灌胃等体积的蒸馏水,各组连续给药30 d。末次给药结束1 h后,麻醉各组小鼠,其中3只灌注固定后的全脑用于HE染色和尼氏体染色,其余小鼠在冰上迅速取出海马用于酶联免疫吸附法(ELISA)检测ChAT及Western blot检测GFAP。结果:与正常组比较,模型组的ChAT水平显著减少(P <0. 01),GFAP表达显著增加(P <0. 01)。与模型组、人参总皂苷组和石菖蒲挥发油组比较,联合用药各剂量组的ChAT水平显著增加(P <0. 05),GFAP表达显著减少(P <0. 05)。与模型组比较,各给药组的海马CA1区神经元结构清晰和核染较浅,尼氏体有一定程度的染色加深,尼氏体数目有一定程度的增加。结论:石菖蒲挥发油与人参总皂苷联合用药对APP/PS1双转基因AD模型小鼠具有一定的增加ChAT水平、降低GFAP表达和保护海马组织神经元的作用。

石菖蒲挥发油联合人参总皂苷通过调节PI3K/Akt/mTOR通路对痴呆模型APP/PS1双转基因小鼠的Aβ_(40)和GFAP的影响

目的:研究石菖蒲挥发油联合人参总皂苷对APP/PS1双转基因小鼠的Aβ_(40)和GFAP的含量变化及对调节PI3K/Akt/mTOR通路的影响。方法:112只APP/PS1双转基因小鼠随机分为8组,模型组、人参总皂苷75 mg/kg组、石菖蒲挥发油15 mg/kg组、石菖蒲挥发油15 mg/kg+人参总皂苷75 mg/kg、石菖蒲挥发油30 mg/kg+人参总皂苷150 mg/kg、石菖蒲挥发油60 mg/kg+人参总皂苷300 mg/kg、雷帕霉素0. 5 mg/kg组和LY294002 0. 75 mg/kg组。正常组和模型组灌胃等体积的生理盐水,各组连续给药30 d。末次给药后采用免疫组化检测GFAP; ELISA检测Aβ_(40)和GFAP; Western blot检测p-mTOR和p-Akt。结果:与正常组比较,模型组的Aβ_(40)和GFAP表达显著增加,p-mTOR和p-Akt表达显著减少。与模型组比较,人参总皂苷组、石菖蒲挥发油组和联合各剂量组的的Aβ_(40)和GFAP表达都显著减少,雷帕霉素组的p-mTOR表达显著减少及p-Akt的表达显著增加,LY294002组的p-mTOR表达显著增加及p-Akt的表达显著减少,联合各剂量组的p-mTOR和p-Akt的表达显著增加。与人参总皂苷组和石菖蒲挥发油组比较,其中联合各剂量组的Aβ_(40)和GFAP表达都显著减少。与LY294002组比较,雷帕霉素组和联合各剂量组的p-mTOR表达显著减少及p-Akt的表达显著增加。与雷帕霉素组比较,联合各剂量组的p-mTOR表达显著增加及p-Akt的表达显著减少。结论:石菖蒲挥发油联合人参总皂苷通过上调PI3K/Akt/mTOR通路来减少APP/PS1双转基因小鼠中Aβ_(40)和GFAP表达。