TLR4调控p38信号通路对呼吸道合胞病毒感染的支气管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨Toll样受体4(TLR4)在呼吸道合胞病毒(RSV)感染的支气管上皮细胞凋亡中的作用及机制。方法 RSV感染支气管上皮细胞16HBECs,以Real-time PCR测定TLR4 mRNA水平,以Western blot法测定TLR4蛋白表达。在细胞中转染TLR4 shRNA,用RSV感染后,流式细胞术测定凋亡,分光光度法检测含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)活性,Western blot检测p38磷酸化水平。用p38信号通路抑制剂处理敲低TLR4后的细胞,用RSV感染后,流式细胞术检测凋亡,分光光度法检测Caspase-3活性。结果 RSV处理后的16HBECs细胞中TLR4 mRNA和蛋白水平均高于未经RSV处理的细胞(P <0. 05)。RSV感染后的细胞凋亡率升高,细胞中Caspase-3活性升高,细胞中p38磷酸化水平也升高,与未经RSV感染的细胞比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。转染TLR4 shRNA的细胞经RSV感染,细胞凋亡率降低,细胞中Caspase-3活性下降,细胞中p38磷酸化水平降低,与未做转染的细胞比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。p38信号通路抑制剂处理的敲低TLR4后的细胞凋亡率进一步降低,细胞中Caspase-3活性进一步下降,与未经p38信号通路抑制剂处理的细胞相比,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论敲低TLR4可以通过抑制p38信号通路的激活减少RSV诱导的支气管上皮细胞凋亡。