吸烟导致的芳香烃受体抑制因子基因低甲基化与冠心病患者死亡风险的相关性

目的通过检测冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者芳香烃受体抑制因子(aryl-hydrocarbon receptor repressor,AHRR)(cg05575921)甲基化水平,探究AHRR基因甲基化水平与吸烟、冠心病患者心血管危险因素及死亡之间的关系。方法于2010至2013年在广东省人民医院心内科入选冠心病患者,172例死亡患者作为死亡组,209例非死亡患者作为对照组。建立焦磷酸测序法检测AHRR(cg05575921)的甲基化水平,验证吸烟与AHRR(cg05575921)甲基化水平的关系,采用线性回归分析对AHRR(cg05575921)甲基化与心肌酶、血脂和心功能的相关性进行分析,采用Logistic回归分析对AHRR(cg05575921)甲基化水平与冠心病患者全因性死亡的相关性进行分析。结果吸烟患者AHRR(cg05575921)甲基化水平显著低于戒烟患者和不吸烟患者,差异有统计学意义(P<0.0001);戒烟患者AHRR(cg05575921)甲基化水平低于不吸烟患者,差异有统计学意义(P=0.0027)。AHRR(cg05575921)甲基化水平与心肌损伤标志物[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肌酸激酶同工酶(CKMB)、乳酸脱氢酶(LDH)和α-羟丁酸脱氢酶(HBDH)]和左心室收缩末期内径(left ventricular end-systolicdiameter,LVESD)呈显著负相关(P<0.005),与左心室射血分数呈显著正相关(P<0.005)。死亡患者AHRR(cg05575921)甲基化水平显著低于非死亡患者(0.6963±0.0088 vs.0.7224±0.0081,P=0.0064)。校正潜在混杂因素之后,AHRR(cg05575921)甲基化水平与死亡呈显著的负相关(OR=0.046,95%CI:0.0028~0.48965,P=0.0441)。结论吸烟导致AHRR(cg05575921)低甲基化,可能引起冠心病患者的心肌损伤指标升高并且影响心功能,从而增加冠心病患者死亡风险。

mtDNA变异对中国冠心病患者血脂水平的影响

目的探讨冠心病患者血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、总胆固醇(CHOL)浓度与线粒体DNA变异之间的关系,并找到潜在的影响血浆胆固醇水平进而影响心功能的单核苷酸多态性位点(SNPs)。方法采用GSA基因芯片测序的方法,同时从广东省人民医院病历系统收集857例冠心病患者生化指标检验信息,利用线性回归分析全部线粒体基因SNP位点与冠心病患者血浆LDL-C、HDL-C和CHOL浓度的相关性,利用Logistic回归分析与血脂相关的SNP变异对心功能指标脑钠肽(BNP)的影响。结果分别发现3、4、4个SNP位点与LDL-C、HDL-C和CHOL显著相关(P<0.05),其中位于线粒体D环区的G513A经FDR校正之后依然与血浆LDL-C显著相关(FDR<0.05),且513A突变碱基携带患者体内LDL-C水平显著高于513G携带者。其余7个位点在经过FDR校正之后差异无统计学意义。除G513A以外,MT-RNR11048C→T和MT-RNR2G3010A变异分别与体内LDL-C降低和升高显著相关;MT-RNR11438G→A和MT-ND614502T→C与体内HDL-C呈负相关,MT-ND614502T→C与BNP正相关,MT-CO2G7853A和MT-ND411536C→T突变型患者HDL-C浓度均高于野生型患者。除G513A以外,MT-RNR11438G→A、MT-RNR2G3010A和MT-ATP6C8964T突变型患者体内CHOL水平均显著低于野生型患者(P<0.05)。结论位于D环区的G513A位点的突变可使体内LDL-C浓度显著升高,该位点可能是冠心病患者血浆胆固醇浓度居高不下的潜在原因,为冠心病患者的优化治疗提供了潜在的药物干预靶点。

高效液相色谱-串联质谱法测定人血浆中色氨酸及其代谢物浓度

目的建立一种基于高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术同时快速测定人血浆中色氨酸及其代谢产物(犬尿氨酸、犬尿喹啉酸和吲哚丙酸)含量的方法。方法采用甲醇/乙腈(v/v,50/50)沉淀蛋白,以色氨酸-d5为内标,色谱柱:Ultimate XB-C18HPLC柱(2.1mm×100mm,3μm),流动相:水-甲醇(45/55,水相含5mmol/L醋酸铵和0.2%甲酸),流速:0.3ml/min,柱温:40℃,分析时间共3min。质谱采用API4000 QTrap三重四极杆质谱仪的正离子多反应监测模式监测。考察该方法的专属性、线性及定量范围、精密度与准确度、回收率与基质效应以及稳定性。结果色氨酸、犬尿氨酸、犬尿喹啉酸及吲哚丙酸的线性范围分别在100~2×10^4、25~5000、5~1000、10~2000ng/ml;平均回收率均>90%;日内和日间精密度(RSD)和准确度(RE)均小于15%;稳定性良好。该方法成功测定了90例冠心病患者血浆中的色氨酸、犬尿氨酸、犬尿喹啉酸及吲哚丙酸的浓度。结论该方法简便、快捷、灵敏,可用于人体血浆中色氨酸及其代谢产物浓度的测定。

基因变异对瑞舒伐他汀引起造影剂相关的急性肾损伤的影响

目的研究基因变异对服用瑞舒伐他汀的造影患者发生造影剂相关的急性肾损伤事件的影响。方法考察贵州省人民医院和广东省人民医院服用瑞舒伐他汀患者造影前后48 h的肾功能和造影剂相关的急性肾损伤事件,采用Sequenom Mass Array system对瑞舒伐他汀的药动学和药效学相关基因进行分型。结果共635人纳入了研究,其中30名患者发生造影剂相关的急性肾损伤。ABCG2 rs2231142(421C>A)突变组的造影剂相关急性肾损伤风险显著高于未突变组(OR:2.049;95%CI:1.185~3.542,P=0.010)。经基线校正后,差异仍具有显著意义(OR:2.283;95%CI:1.247~4.182,Padj=0.008)。结论 ABCG2 421C>A是服用瑞舒伐他汀患者发生造影剂相关的急性肾损伤事件独立的危险因素,服用瑞舒伐他汀且携带ABCG2 rs2231142 A等位基因的患者行造影时需警惕造影剂相关的急性肾损伤的发生。