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人血管紧张素Ⅱ2型受体基因慢病毒表达载体的构建
1
作者
雷和平
麦丽萍
+4 位作者
朱杰宁
单志新
杨敏
林秋雄
余细勇
《岭南心血管病杂志》
2014年第5期636-639,共4页
目的构建携带人血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AGTR2)基因的慢病毒表达载体。方法运用基因重组技术,将AGTR2基因克隆至慢病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1中,获得慢病毒表达载体pLVX-AGTR2-IRES-ZsGreen1,XhoI、BamHI双...
目的构建携带人血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AGTR2)基因的慢病毒表达载体。方法运用基因重组技术,将AGTR2基因克隆至慢病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1中,获得慢病毒表达载体pLVX-AGTR2-IRES-ZsGreen1,XhoI、BamHI双酶切反应及测序分析加以鉴定。在Lipofectamine 2000的介导下将慢病毒表达载体质粒和包装质粒(pHelper1.0、pHelper2.0)共转染人胚肾细胞系(293T),包装慢病毒载体并测定滴度。反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测AGTR2基因在感染病毒的293T细胞中的表达水平。结果所获AGTR2基因测序证明与GenBank中序列一致;成功构建慢病毒表达载体pLVX-AGTR2-IRES-ZsGreen1并获得相应的慢病毒。收集、浓缩病毒后测定其滴度为1.2×108 TU/mL。构建的携带AGTR2基因的慢病毒表达载体可有效转染293T细胞,RT-PCR结果表明AGTR2基因呈高表达。结论成功构建AGTR2慢病毒表达载体,为进一步研究其功能建立了实验基础。
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关键词
血管紧张素Ⅱ2型受体
慢病毒表达载体
293T细胞
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职称材料
L-型钙通道参与大鼠动脉收缩反应的异质性
被引量:
3
2
作者
刘林
邝素娟
+7 位作者
杨慧
饶芳
张梦珍
麦丽萍
林秋雄
单志新
杨敏
邓春玉
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期563-569,共7页
目的研究不同动脉对同一血管收缩剂的反应性是否存在差异,及其与L-型钙通道的关系。方法采用离体血管张力测定实验方法,测定在累积浓度血管收缩剂处理下的大鼠胸主动脉、肾内动脉或冠状动脉的张力变化以及L-型钙通道阻断剂硝苯地平(nife...
目的研究不同动脉对同一血管收缩剂的反应性是否存在差异,及其与L-型钙通道的关系。方法采用离体血管张力测定实验方法,测定在累积浓度血管收缩剂处理下的大鼠胸主动脉、肾内动脉或冠状动脉的张力变化以及L-型钙通道阻断剂硝苯地平(nifedipine)的影响。结果苯肾上腺素(phenylephrine,Phe)对冠状动脉无明显影响,但可诱导胸主动脉和肾内动脉产生明显的浓度依赖性收缩,胸主动脉的pEC_(50)明显大于肾内动脉(P<0.05);给予硝苯地平孵育后,再给予累积浓度的Phe,胸主动脉收缩的下降幅度大于肾内动脉(P<0.05)。5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)对胸主动脉的收缩作用不明显,但可浓度依赖性诱导肾内动脉和冠状动脉收缩;给予硝苯地平孵育后,再给予累积浓度的5-HT,冠状动脉收缩的下降幅度明显大于肾内动脉(P<0.05)。胸主动脉、肾内动脉和冠状动脉均对血栓素A2类似物(9,11-dideoxy-11α,9α-epoxymethanoprostaglandin,U46619)产生浓度依赖性收缩,肾内动脉收缩量效曲线的E_(max)最小(P<0.05),胸主动脉收缩量效曲线pEC_(50)最大(P<0.05)。给予硝苯地平孵育后,再给予累积浓度的U46619,冠状动脉收缩的下降幅度最大,胸主动脉收缩的下降幅度最小。结论大鼠胸主动脉、肾内动脉及冠状动脉对同一血管收缩剂的反应存在异质性,其中L-型钙通道介导的收缩作用也不同。
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关键词
动脉异质性
L-型钙通道
血管收缩剂
血管张力
胸主动脉
肾内动脉
冠状动脉
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职称材料
题名
人血管紧张素Ⅱ2型受体基因慢病毒表达载体的构建
1
作者
雷和平
麦丽萍
朱杰宁
单志新
杨敏
林秋雄
余细勇
机构
广东省
人民医院
(
广东省
医学
科学院
)
医学
研究
部
广东省
心血管病
研究所
出处
《岭南心血管病杂志》
2014年第5期636-639,共4页
基金
国家自然科学基金资助项目(项目编号:81202602
81330007
+1 种基金
81270222)
广东省医学科研基金(项目编号:B2013017)
文摘
目的构建携带人血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensinⅡtype 2 receptor,AGTR2)基因的慢病毒表达载体。方法运用基因重组技术,将AGTR2基因克隆至慢病毒载体pLVX-IRES-ZsGreen1中,获得慢病毒表达载体pLVX-AGTR2-IRES-ZsGreen1,XhoI、BamHI双酶切反应及测序分析加以鉴定。在Lipofectamine 2000的介导下将慢病毒表达载体质粒和包装质粒(pHelper1.0、pHelper2.0)共转染人胚肾细胞系(293T),包装慢病毒载体并测定滴度。反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)法检测AGTR2基因在感染病毒的293T细胞中的表达水平。结果所获AGTR2基因测序证明与GenBank中序列一致;成功构建慢病毒表达载体pLVX-AGTR2-IRES-ZsGreen1并获得相应的慢病毒。收集、浓缩病毒后测定其滴度为1.2×108 TU/mL。构建的携带AGTR2基因的慢病毒表达载体可有效转染293T细胞,RT-PCR结果表明AGTR2基因呈高表达。结论成功构建AGTR2慢病毒表达载体,为进一步研究其功能建立了实验基础。
关键词
血管紧张素Ⅱ2型受体
慢病毒表达载体
293T细胞
Keywords
angiotensin Ⅱ type 2 receptor
lentiviral expression vector
293T cells
分类号
R331 [医药卫生—人体生理学]
下载PDF
职称材料
题名
L-型钙通道参与大鼠动脉收缩反应的异质性
被引量:
3
2
作者
刘林
邝素娟
杨慧
饶芳
张梦珍
麦丽萍
林秋雄
单志新
杨敏
邓春玉
机构
南方医科大学药
学院
广东省
人民医院
(
广东省
医学
科学院
)
医学
研究
部
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第4期563-569,共7页
基金
国家自然科学基金资助项目(No81470440,81273516)
文摘
目的研究不同动脉对同一血管收缩剂的反应性是否存在差异,及其与L-型钙通道的关系。方法采用离体血管张力测定实验方法,测定在累积浓度血管收缩剂处理下的大鼠胸主动脉、肾内动脉或冠状动脉的张力变化以及L-型钙通道阻断剂硝苯地平(nifedipine)的影响。结果苯肾上腺素(phenylephrine,Phe)对冠状动脉无明显影响,但可诱导胸主动脉和肾内动脉产生明显的浓度依赖性收缩,胸主动脉的pEC_(50)明显大于肾内动脉(P<0.05);给予硝苯地平孵育后,再给予累积浓度的Phe,胸主动脉收缩的下降幅度大于肾内动脉(P<0.05)。5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)对胸主动脉的收缩作用不明显,但可浓度依赖性诱导肾内动脉和冠状动脉收缩;给予硝苯地平孵育后,再给予累积浓度的5-HT,冠状动脉收缩的下降幅度明显大于肾内动脉(P<0.05)。胸主动脉、肾内动脉和冠状动脉均对血栓素A2类似物(9,11-dideoxy-11α,9α-epoxymethanoprostaglandin,U46619)产生浓度依赖性收缩,肾内动脉收缩量效曲线的E_(max)最小(P<0.05),胸主动脉收缩量效曲线pEC_(50)最大(P<0.05)。给予硝苯地平孵育后,再给予累积浓度的U46619,冠状动脉收缩的下降幅度最大,胸主动脉收缩的下降幅度最小。结论大鼠胸主动脉、肾内动脉及冠状动脉对同一血管收缩剂的反应存在异质性,其中L-型钙通道介导的收缩作用也不同。
关键词
动脉异质性
L-型钙通道
血管收缩剂
血管张力
胸主动脉
肾内动脉
冠状动脉
Keywords
arterial heterogeneity
L-type calcium channel
vasoconstrictor
vascular tension
thoracic aorta
intrarenal artery
coronary artery
分类号
R-332 [医药卫生]
R322.12 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人血管紧张素Ⅱ2型受体基因慢病毒表达载体的构建
雷和平
麦丽萍
朱杰宁
单志新
杨敏
林秋雄
余细勇
《岭南心血管病杂志》
2014
0
下载PDF
职称材料
2
L-型钙通道参与大鼠动脉收缩反应的异质性
刘林
邝素娟
杨慧
饶芳
张梦珍
麦丽萍
林秋雄
单志新
杨敏
邓春玉
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
3
下载PDF
职称材料
已选择
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