香烟烟雾提取物致大鼠膈肌细胞氧化损伤

目的研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠膈肌细胞8一羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1（OGGl）表达对8．OHdG含量变化的影响。方法用不同浓度CSE分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后，采用高效液相色谱．电化学法（HPLC—ECD）检测大鼠膈肌细胞8．OHdG的含量，流式细胞术检测大鼠膈肌细胞ROS水平，采用实时定量PCR检~IJOGG!mRNA水平，用Western印迹法检测OGGl蛋白水平。结果经相同CSE浓度分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后，大鼠膈肌细胞中8-OHdG含量、ROS水平及OGGlmRNA和蛋白水平均无明显差异。但经不同浓度CSE刺激相同时间后，10．00％CSE和20．00％CSE刺激组大鼠膈肌细胞8-OHdG含量明显高于对照组和5．00％CSE刺激组（P〈0．05）；大鼠膈肌细胞内ROS水平、OGGlmRNA和蛋白水平较对照组均明显升高（P〈0．05）；大鼠膈肌细胞8-OHdG含量与其ROS水平呈明显正相关（r=0．826，P：0．000）；经CSE刺激后，大鼠膈肌细胞OGGlmRNA和蛋白水平均高于对照组（P〈O．05），但大鼠膈肌细胞8．OHdG含量与其OGGlmRNA和蛋白水平无明显相关（r=0．373，P=0．254；r=0．329，P=0．296）。结论CSE刺激可引起大鼠膈肌细胞8-OHdG升高，8-OHdG含量与ROS水平有关，但与其修复酶OGGl表达水平无明显相关。