非小细胞肺癌大分割三维适形放疗的剂量递增研究

目的:探讨非小细胞肺癌大分割三维适形放疗的最大耐受剂量和毒性。方法:采用三维适形放疗,分割剂量3Gy/次,每周5次。据肺V20(照射剂量≥20Gy的肺的体积占双肺体积的百分比)进行剂量递增。V20≤20%组从66Gy开始剂量递增,20%<V20≤30%组从60Gy开始剂量递增。每个剂量级别至少入组3例患者。结果:2005年6月至2007年5月共有32例非小细胞肺癌患者进入临床试验。V20≤20%组,总剂量66Gy3例,69Gy3例,72Gy 3例,75Gy7例,在75Gy剂量水平有2例患者出现3级急性放射性肺炎和晚期放射性肺损伤。20%<V20≤30%组,总剂量60Gy 3例,63Gy 3例,66Gy 3例,69Gy 7例,在69Gy剂量水平有2例患者出现3度急性放射性肺炎和晚期放射性肺损伤。治疗结束后评价近期疗效完全缓解为19%(6/32),部分缓解为72%(23/32),稳定为9%(3/32),有效率为89%(29/32)。中位随访时间19个月(10～32个月),34.3%(11/32)患者出现病情进展,1年疾病无进展率为65.7%(21/32)。结论:非小细胞肺癌采用三维适形放疗技术3Gy/次大分割照射是可行的,肺V20≤20%的最大耐受剂量为75Gy,20%<V20≤30%为69Gy,今后还需要更多病例来验证其疗效和远期毒性。

口服康复新在治疗放射性食管炎中的作用

目的观察口服康复新配合重组人表皮生长因子外用溶液(金因肽)+庆大霉素+地塞米松联合雾化吸入治疗急性放射性食管炎的疗效。方法将40例急性放射性食管炎患者分为两组,两组患者均采用相同的基础综合治疗,包括注射用哌拉西林钠舒巴坦钠(新克君)抗炎、止咳化痰、营养治疗。对照组20例用金因肽+庆大霉素+地塞米松联合雾化吸入治疗,放疗前15 min进行,2次/d,连续10 d。观察组20例用口服康复新配合金因肽+庆大霉素+地塞米松联合雾化吸入治疗,治疗方法与对照组相同。分别进行疗效观察。结果在急性放射性食管炎的症状和体征的消失时间上,观察组明显少于对照组。观察组在缓解和治疗放疗期间引起的急性放射性食管炎也优于对照组,总有效率分别为95%和50%。结论用口服康复新配合金因肽+庆大霉素+地塞米松联合雾化吸入治疗急性放射性食管炎疗效确切,两者具有协同作用,可有效减轻急性放射性食管炎的症状,不良反应少,值得临床推广应用。

亚甲基四氢叶酸还原酶多态性对结直肠癌患者化疗预后的影响

【目的】观察结直肠癌患者亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T和A1298C多态性与化疗后无进展生存期的相关性。【方法】收集经病理学确诊的Ⅳ期结直肠腺癌患者共81例,接受标准的FOLFOX6方案或XELOX方案化疗,化疗前抽取患者外周血,采用DNA测序的方法检测MTHFR基因C677T和A1298C多态性,比较不同基因型化疗后的无进展生存时间,并分析各种因素和预后的相关性。【结果】81例结直肠癌患者中,MTHFR677 CC、CT、TT基因型分别为:54.3%、41.9%、3.7%;CC型和CT/TT型中位PFS分别为11.4月和13.8月,P=0.046。MTHFR1298 AA、AC、CC基因型分别为:62.9%、34.5%、2.5%,AA型和AC/CC型化疗中位无进展生存分别为13.2月和11.7月,差异无统计学意义,P=0.127。其他因素如性别、年龄、肿瘤部位等同PFS无相关性。【结论】CT/TT基因型患者PFS优于CC型。MTHFR C677T基因多态性可作为预测结直肠癌患者化疗预后的指标。

线粒体DNA缺失HepG2细胞系的建立、鉴定及放射生物学特性

目的为研究人肝癌细胞系Hep G2线粒体DNA(mt DNA)缺失后的放射生物学特性,建立并鉴定mt DNA缺失Hep G2(ρ0Hep G2)细胞系。测定辐射干预下mt DNA缺失(Rho0)肝癌细胞的凋亡情况、侵袭能力以及辐射敏感性的变化。方法在含有溴化乙锭(EB)、丙酮酸、尿嘧啶的特殊培养基中培养Hep G2细胞,经30次传代后,有限稀释法筛选完全去除mt DNA的克隆。去除丙酮酸及尿嘧啶后,观察细胞的存活情况。PCR法鉴定mt DNA的缺失。用6Mv X射线梯度剂量照射Hep G2细胞和ρ0Hep G2细胞,平板克隆法绘制生长曲线,线性二次方程拟合生存曲线,计算α/β。2Gy剂量辐射细胞,24 h后用Hochest33342细胞核染色,比较Hep G2细胞与ρ0Hep G2凋亡率的差异。用Transwell法测定两种不同细胞的侵袭能力。结果在含EB特殊培养环境下,Hep G2细胞可持续生长传代至30代,去除丙酮酸和尿嘧啶后,细胞短时间内大量死亡。经PCR法证实mt DNA完全缺失。ρ0Hep G2细胞α/β显著低于正常Hep G2细胞,辐射抵抗能力增强。辐射干预后ρ0Hep G2的凋亡比例显著减少。ρ0Hep G2穿膜细胞数显著增多。结论在EB长期诱导下,Hep G2肝癌细胞可被成功诱导为mt DNA缺失细胞。ρ0Hep G2细胞的辐射抵抗性显著增强,抗凋亡能力及侵袭能力均提高。

亚甲基四氢叶酸还原酶A1298C多态性与结直肠癌患者化疗敏感性的相关性研究

目的探讨结直肠癌(colorectal cancer,CRC)患者亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因A1298C多态性与化疗有效率和预后的相关性。方法收集经病理学确诊的Ⅳ期CRC患者75例,接受标准的FOLFOX6或XELOX方案化疗,化疗前抽取患者外周血,采用DNA测序法检测MTHFR基因A1298C多态性,观察不同基因型化疗有效率和无进展生存时间(PFS),分析二者的相关性。结果 75例CRC者中,MTHFR1298 AA、AC、CC基因型频率分别为61.3%、34.7%、4.0%,化疗有效率分别为39.1%、30.8%、33.3%,差异无统计学意义(P>0.05)。AA型和AC/CC型化疗中位PFS分别为13.3个月、11.4个月,差异具有微弱的边际统计学意义(P=0.068)。结论 MTHFR A1298C基因多态性和患者化疗后有效率无关。MTHFR 1298携带AA基因型的患者化疗后PFS略优于携带C基因型的患者。

亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性和结直肠癌对FOLFOX6方案化疗反应的相关性

【目的】分析结直肠癌患者亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因C677T多态性与FOLFOX6方案化疗疗效和毒性的相关性。【方法】收集经病理学确诊的III-IV期结直肠腺癌患者92例。所有患者均接受FOLFOX6方案化疗,化疗前抽取患者外周血,提取DNA,采用DNA测序的方法检测MTHFR基因C677T多态性,并分析其与化疗方案疗效及毒性的相关性。【结果】92例结直肠癌患者中,MTHFR C677T CC、CT、TT基因型频率分别为:55.4%、40.2%、4.3%。携带T基因型的患者疾病控制率高于CC型患者(P=0.054)。在血液毒性中,C/C基因型患者中性粒细胞减少发生率较C/T、T/T基因型低,差异具有显著性(P<0.05)。其他血液学毒性及非血液学毒性的发生率同MTHFRC677T多态性无相关性。【结论】MTHFR C677T基因多态性,可作为结直肠癌患者化疗的疾病控制率和粒细胞减少的预测指标。

一种结合低秩与稀疏惩罚的PET动态图像重建方法

目的提出一种结合低秩与稀疏惩罚的PET动态图像重建方法(L&S)。方法建立L&S重建模型,利用split Bregman法来最优化求解代价函数。采用单房室模型仿真一套PET心肌82Rb灌注图像,将L&S重建方法与最大似然期望值法(MLEM)、低秩惩罚和稀疏惩罚重建方法比较。结果 L&S方法重建的图像的均方误差(MSE)最小,并且保留了更多图像特征。另外L&S重建得到的靶心图和参考组的靶心图最相近。结论 L&S重建方法无论是在直观视觉上,还是定量分析上都优于另外3种方法。

脑脊液蛋白指纹图谱诊断模型对肺腺癌脑转移早期诊断价值初步评价

目的:前瞻性探讨非小细胞肺癌脑转移脑脊液蛋白质谱诊断模型在多站纵隔淋巴结转移肺腺癌脑转移中的早期诊断价值。方法:选择多站纵隔淋巴结转移的Ⅲ期肺腺癌患者24例,抽取其脑脊液处理后冰冻保存,并进行定期随访,记录其脑转移发生情况。脑脊液样本应用磁珠联合表面增强激光解析电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术进行蛋白组学分析,Biomarker Patterns软件计算蛋白质谱峰强度,采用前期实验建立的蛋白质谱诊断模型进行检测,分析其灵敏度和特异性。进一步用Ciphergen ProteinChip和Biomarker Wizard对随访有脑转移和无脑转移患者的蛋白质谱进行分析,寻找其差异蛋白峰和建立诊断模型。结果:24例患者,随访发现有8例(33.3%)患者确诊发生脑转移,中位发生时间为10.5个月。脑脊液蛋白质谱诊断结果显示,8例确诊脑转移中有7例被检出,灵敏度为87.5%(7/8),无脑转移的16例患者中有12例被检出,特异度为75.0%(12/16),总的准确率为79.2%(19/24)。对8例有脑转移和16例无脑转移的患者脑脊液蛋白质谱进一步分析发现,有6个差异蛋白峰,其中m/z 1526.10和m/z 8149.73被自动选择用于建立树状决策分类模型。对24例样本进行检验,8例脑转移患者中有6例被树状分析模式正确筛出,灵敏度为75.0%(6/8),16例无脑转移患者中有12例检出,特异度为75.0%(12/16)。结论:采用脑脊液蛋白质谱诊断模型来早期诊断纵隔多站淋巴结转移肺腺癌脑转移有较高的灵敏度和特异性,对早期发现脑转移有一定的辅助诊断价值,但这种技术容易产生误差,需要进一步加大样本量来研究和确认。

siRNA抑制肺腺癌细胞DNA—DPKCS表达与放射敏感性关系研究

目的探讨稳定表达的小干扰RNA（siRNA）抑制DNA依赖蛋白激酶催化亚基（DNA—DPKCS）表达对非小细胞肺癌细胞增殖、细胞周期及放射敏感性的影响。方法构建DNA—DPKCS—siRNA重组质粒转染肺腺癌细胞A549。流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，成克隆实验测定细胞存活曲线。结果建立了与A549细胞同源的DNA—DPKCS低表达细胞系549pRNA—DNA—DPKCS、阴性对照549pRNA—C细胞、空白549pSUPER细胞。与A549细胞相比549pRNA—DNA—DPKCS细胞的DNA—DPKCS mRNA（0．110：1．000；F=80．55，P〈0．01）、蛋白表达水平（0．870：2．967；F=63．96，P〈0．01）以及DNA—DPKCS活性（0．004：0．266；F=51．62，P〈0．01）均显著降低。549pRNA—DNA—DPKCS细胞2Gy存活分数、平均致死剂量、亚致死性损伤剂量均较A549细胞明显降低（0．25：0．76；F=996．86，P〈0．01：1．42：1．62：F=17．41，P〈0．05；0．06：1．00；F=68．92，P〈0．01）。DNA—DPKCS表达受抑后549pRNA—DNA—DPKCS细胞较A549细胞s期和G2期细胞比例明显减少（24．5％：35．5％；F=4．83，P〈0．05和10．7％：11．0％：F=32．04，P〈0．01）。结论抑制DNA—DPKCS表达可提高肺腺癌细胞A549的放射敏感性，同时调控细胞周期时相分布。