恶性血液病患者异基因造血干细胞移植后营养障碍性神经系统疾病临床分析

目的分析恶性血液病患者异基因造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)后以共济失调为主要表现的营养障碍性神经系统疾病特点。方法回顾性分析自2010年1月1日至2020年1月31日在广东省人民医院血液科接受HSCT治疗,术后诊断为营养障碍性神经系统疾病病例的临床特点、诊疗经过以及预后,并在万方、维普、CNKI及PubMed数据库检索相关文献进行分析,分别以“韦尼克脑病(Wernicke's encephalopathy,WE)”或“亚急性脊髓联合变性(subacute combined degeneration of spinal cord,SACD)”和“异基因造血干细胞移植”或“骨髓移植”或“移植”等关键词进行检索,检索时间截止至2020年1月31日。结果482例恶性血液病患者接受HSCT,有5例出现以共济失调为表现的神经系统病变,占1%。其中4例伴有认知异常,结合影像学等资料临床诊断WE,与文献检索到国内外20多例病例临床症状相似,但发现与移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)、血栓性微血管病(thrombotic microangiopathy,TMA)有重叠之处,予维生素B1等治疗后一周余好转。1例伴排尿困难、臀部会阴麻木,结合影像学等资料临床诊断SACD,与文献检索到日本的2例病例的临床症状及影像资料相似、且均有大剂量甲氨蝶呤的使用史,但日本这2例病例均告死亡,最终尸检验证影像结果;我们的患者在予甲酰四氢叶酸钙、腺苷蛋氨酸、氨茶碱、维生素B12等治疗后,情况逐渐好转而生存。结论营养障碍性疾病是HSCT后容易忽视的并发症,常与GVHD、TMA伴随,缺乏实验室检测手段,死亡率高,但根据临床症状及影像学资料早期诊断、早期干预效果好。对于移植术后出现共济失调的患者,如合并有认知异常或脊髓病的症状,应注意诊断WE或SACD,维生素B1或叶酸、维生素B12等治疗安全有效。

2020年血液肿瘤靶向免疫检查点治疗研究进展

免疫检查点在维持机体免疫功能平衡方面发挥重要作用,然而,许多癌细胞利用这种分子逃避免疫监视。研究发现血液肿瘤患者免疫检查点分子异常高表达,免疫检查点阻断疗法在多种血液肿瘤的应用也显示出明显的临床疗效[1-2]。但仍存在较多问题:并非所有患者都有效、缺乏预测治疗反应的标志以及与其他疗法联用的问题[3]。本文对血液肿瘤患者免疫检查点如PD-1、CTLA-4、LAG-3、TIM-3和TIGIT的表达、检查点阻断对患者的疗效或临床试验结果做一简要综述。

2018年血液肿瘤免疫治疗研究进展

2018年,随着诺贝尔生理学/医学奖的揭晓,检查点抑制剂治疗成为人类对抗癌症的里程碑,同时,嵌合抗原受体T细胞免疫治疗(chimeric antigen receptor T-cell immumotherapy,CAR-T)也是硕果累累的一年。本文将对过去一年来发表的血液肿瘤免疫治疗的相关文献以及第60届美国血液病学会(American Society of Hematology,ASH)会议中关于免疫治疗血液肿瘤研究进展作一综述。

2019年CAR-T细胞治疗在血液肿瘤的研究进展

对传统治疗耐药或复发的患者,预后差,急需个体化的治疗方法改善其疗效。嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T-cell immunotherapy,CAR-T)是指利用基因工程修饰T细胞,使其表达嵌合抗原受体从而产生肿瘤特异性识别的T细胞,并帮助T淋巴细胞活跃起来能够杀灭肿瘤细胞。CAR-T疗法被认为是目前最有前景的肿瘤免疫治疗方式之一,已获得美国食品药品监督管理局(food and drug administration,FDA)和欧洲药品管理局(European medicines agency,EMA)的批准,可用于治疗小儿和成人复发/难治性B细胞急性淋巴细胞白血病(B acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)和弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)。

2021年血液肿瘤分子靶向治疗研究进展

靶向治疗在恶性血液肿瘤治疗中发挥着重要的作用。药物特异性靶向基因或者蛋白能够通过干扰肿瘤细胞生长和增殖,从而实现对肿瘤的治疗。靶向治疗也经常与传统的化疗,手术治疗和放疗联合使用。但是靶向治疗存在着靶点突变,耐药以及脱靶等问题,还伴随着强烈的副作用。因此,对靶向治疗药物的研发和改进一直是血液肿瘤领域重要的研究方向。近年来,靶向治疗在血液肿瘤治疗中取得显著进步,本文将对近期靶向治疗小分子药物在血液肿瘤中的进展进行回顾。

间充质干细胞诱导小鼠CD8α^+ CD11b^+ jagged2^(high)调节性树突状细胞的方法

目的:研究小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外诱导CD8α+CD11b+jagged2high调节性树突状细胞(DCregs)的方法。方法:应用4种细胞因子体外刺激BALB/c(H-2d)小鼠骨髓有核细胞(BMCs)3 d,流式细胞术(FCM)分选树突状细胞(DCs),与BMSCs共培养10 d,诱导DCregs产生。FCM分析共培养前后DCs的表型、细胞周期及Notch信号通路中Jagged1、Jagged2配体的表达变化。结果:小鼠BMSCs在体外成功诱导新型DCs转变为DCregs,其CD86、CD80、CD40、MHC-II表达均明显下降(P<0.05),而CD205、Jagged1、Jag-ged2表达均明显上升(P<0.05);细胞周期中(G2+S)期细胞增加。结论:MSC可诱导DC细胞向DCregs转化,该MSC-DCregs具有致免疫耐受性表型,增殖能力提高;MSC诱导免疫耐受的机制可能与上调DC的Jagged1和Jagged2基因表达,激活T细胞Notch信号通路相关。

CLAT方案治疗难治性急性髓系白血病的疗效观察

目的:观察CLAT方案治疗难治性急性髓系白血病(R-AML)的疗效及不良反应。方法:2013年6月至2015年10月期间,广东省人民医院采用CLAT方案治疗R-AML患者18例,中位年龄37岁(18-58)岁;男性16例,女性2例。CLAT方案:克拉屈滨(Cla)5 mg/(m^2·d),d 1-5;阿糖胞苷(Ara-C)1.0 g/(m^2·d),d 1-5;拓扑替康(Top)1.25 mg/(m^2·d),d 1-5;粒细胞集落刺激因(G-CSF)300μg/d,第6天直至中性粒细胞(ANC)>1.0×10~9/L。结果:18例患者中2例因早期死亡未进行疗效评估,可评估疗效的16例患者。10例(55.6%)获得完全缓解(CR),2例(11.1%)部分缓解(PR),总有效率(OR)66.7%(12/18),4例(22.2%)未缓解(NR)。CLAT化疗后,所有患者均出现重度骨髓抑制,ANC<0.5×10~9/L的中位持续时间为13(2-21)d,血小板<20×10~9/L中位持续时间为12(2-21)d,感染发生率为100%,2例因感染早期死亡,16例患者发生Ⅱ-Ⅳ级感染,均能获得有效控制。主要非血液学毒性为Ⅰ-Ⅱ度恶心、呕吐、腹泻、皮疹,经对症支持治疗后好转。CR患者预期平均OS为11.6±2.5个月(95%CI:6.7-16.64),中位OS为9.5个月;预期平均DFS为11.4±2.7个月(95%CI:6.1-16.7),中位DFS为9.5个月;CR患者预期1年OS和DFS分别为45%和46.9%。结论:CLAT方案治疗难治性急性髓系白血病有效,患者耐受性良好,可作为桥接移植的挽救治疗方案,并为不适合使用蒽环类药物化疗的难治患者提供了新选择。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂-C是影响多发性骨髓瘤患者的预后因素

目的肾功能损害是多发性骨髓瘤(MM)的常见并发症且与生存期缩短有关。将评价MM病人半胱氧酸蛋白酶抑制剂-C(Cys-C)的血清水平,探讨Cys-C水平与MM病人生存的关系。方法新诊断的MM病人76例及健康人20例抽血检测Cys-C水平。结果 76例新诊断的MM病人中,男41例,女35例,年龄30～81岁,中位年龄66岁。与对照组相比,MM病人Cys-C水平显著升高(P<0.05),42例(55.3%)MM病人Cys-C水平高于正常值。ISSⅢ期的病人血Cys-C水平显著高于Ⅰ期病人(P<0.05)。同时,Cys-C水平与血β2微球蛋白(β2-MG)、乳酸脱氢酶(LDH)水平密切相关。生存分析提示Cys-C正常的病人生存期明显优于Cys-C升高的病人(P<0.05)。结论这个研究提示MM病人Cys-C水平不但是肾脏损害的敏感指标,也很好地提示MM病人的肿瘤负荷和生存期。因此,MM病人有必要检测Cys-C水平,以更好地评价MM病人的预后。进一步将探讨Cys-C联合其他指标如LDH、β2-MG评价MM病人的预后。

间充质干细胞治疗激素耐药重度急性移植物抗宿主病

目的:探讨体外扩增骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)治疗激素耐药重度急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease,aGVHD)的临床疗效和安全性。方法:4例恶性血液病患者经HLA匹配同胞外周血干细胞联合骨髓移植后,诊断为激素耐药重度aGVHD,在原有免疫抑制治疗的基础上给予MSCs0.5×106/kg受者体重。结果:4例患者经静脉输注体外扩增MSCs共9例次,未发现输注相关不良反应。所有患者均显示不同程度的治疗反应,总有效率达100%。4例发生消化道aGVHD,完全缓解2例,显著缓解1例,部分缓解1例。2例合并肝脏aGVHD患者中1例获完全缓解,1例获部分缓解。初始显效和充分显效的中位时间分别为3d(2～5d)和23d(10～72d)。MSCs输注后,病情缓解者外周血CD8+CD28-T细胞比例明显上升,而CD8+CD28+T细胞比例下降。结论:MSCs可快速缓解激素耐药重度aGVHD病情,其可能通过对CD8+CD28-/CD8+CD28+T细胞比例的调控发挥抗aGVHD的作用。

RAEB型骨髓增生异常综合征患者血清蛋白质组学研究

目的利用蛋白质组学方法,寻找与RAEB(refractory anemia with excess blasts in transformation)型骨髓增生异常综合征(MDS)相关的特异性血清蛋白质标志物。方法应用双向电泳分别分离RAEB型MDS、急性髓性白血病及正常人的血清蛋白,通过对3组图谱进行比较分析,识别差异反应的蛋白质点,根据差异反应蛋白质点位置在平行胶上找出匹配的蛋白质点,并通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对差异蛋白质点进行鉴定,通过数据库搜索鉴定出差异反应的蛋白质。结果以MDS组为参照,经过胶图分析得到7个差异蛋白质点,质谱鉴定提示4种蛋白有统计学意义,包括二肽基肽酶(dipeptidyl peptidase,DPP/CD26)、DNA聚合酶、未命名蛋白2044和类白蛋白物质。结论以2-DE为基础的血清蛋白质组学方法可用于筛选与MDS相关的蛋白质标志物;DPP在RAEB型MDS中的异常高表达提示DPP/CD26可能与进展类型的MDS相关。

运动康复对骨髓增殖性肿瘤患者的疗效探讨

1文献来源Pedersen KM,Zangger G,Brochmann N,et al.The effectiveness of exercise-based rehabilitation to patients with myeloproliferative neoplasms-An explorative study[J]. Eur J Cancer Care (Engl),2018,27(5):e12865.

Venetoclax联合小剂量阿糖胞苷治疗不耐受强化疗的初诊急性髓系白血病

1文献来源Wei AH,Montesinos P,Ivanov V,et al.Venetoclax plus LDAC for newly diagnosed AML ineligible for intensive chemotherapy:A phase 3 randomized placebo⁃controlled trial[J].Blood,2020,135(24):2137-2145.2证据水平1b。3背景老年及合并明显并发症的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者常常不耐受强化疗,而低强度的治疗,如去甲基化药物(阿扎胞苷或地西他滨)治疗后.

慢性中性粒细胞白血病获长生存11年1例

患者,女,50岁,因头晕、乏力、纳差、四肢皮肤反复出现淤斑、低热伴腹胀2个月,在门诊查血常规发现白细胞、血小板均升高,拟ET或白血病于000年6月20日入院。体检：T 38℃,Bp 16/10kPa,四肢皮肤散在淤斑,胸骨无压痛,心肺无异常,上腹稍膨隆,肝大右季肋下6cm,脾平脐,质硬,前缘可触及切迹,甲乙线、甲戊线均为20cm,

一氧化氮在人骨髓间充质干细胞抑制淋巴细胞异基因增殖反应的初步研究

本研究探讨一氧化氮在骨髓间充质干细胞(MSC)抑制淋巴细胞增殖中的作用及机制。从人骨髓中分离培养MSC,预先接种在培养板上,建立混合淋巴细胞培养(MLC)体系,利用CCK-8法检测淋巴细胞增殖情况,并用Griess法检测培养体系NO的产生,real-timePCR检测淋巴细胞FOXP3mRNA表达水平。结果表明:MSC干预组淋巴细胞增殖活性下降,其OD值为0.49±0.03,NO含量明显升高为(21.05±1.14)μmol/L,淋巴细胞FOXP3mRNA表达水平为(1.56±0.34)%,而无MSC的MLC组NO含量为(3.30±0.36)μmol/L,FOXP3表达水平为(0.74±0.15)%,两组相比具有显著性差异。结论:MSC产生的NO上调淋巴细胞FOXP3mRNA的表达水平,从而抑制淋巴细胞增殖。

间充质干细胞诱导的CD8α^+ Jagged2^(high) CD11b^(high)调节性树突状细胞防治小鼠aGVHD

目的:观察间充质干细胞诱导的CD8α+Jagged2highCD11bhigh调节性树突状细胞(MSC-DCregs),对小鼠急性移植物抗宿主病(a GVHD)的影响。方法:体外诱导MSC-DCregs。以C57BL/6(H-2b)小鼠为供鼠、接受清髓性全身照射(TBI)预处理的BALB/c(H-2d)小鼠为受鼠进行移植。分为以下5组:为正常对照组;TBI组;移植组:移植物为1×107骨髓细胞(BMCs);a GVHD组:移植物为1×107BMCs+1×107脾细胞(Sp Cs);MSC-DCregs组:移植物为1×107BMCs+1×107Sp Cs+1×106MSC-DCregs。监测植入情况、H2-Kb嵌合率、a GVHD评分、生存和病理学改变。结果:处理1 0 d后所有小鼠造血恢复,30 d后嵌合率检测转为供鼠型。a GVHD组和MSC-DCregs组中位生存期分别为27 d和33 d,MSC-DCregs组生存期较a GVHD组延长(P<0.01),临床评分比a GVHD组低(P<0.01),33 d的皮肤、肝脏病理学改变均优于a GVHD组。结论:MSC-DCregs具有防治a GVHD的作用,其相关作用机理待进一步研究。

慢性粒单核细胞白血病患者骨髓成纤维集落形成单位功能及意义

背景:研究表明,异常的骨髓微环境可能参与慢性粒单核细胞白血病的发生,成纤维集落形成单位(colony formingunit-fibroblast,CFU-F)代表了一组具有多系分化潜能的间充质干细胞,其功能、数量状态具有评价骨髓基质微环境状态的意义。目的:评估慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞形成CFU-F的能力与成骨分化潜能,探讨CFU-F指标与患者外周血细胞计数、疾病表现型等指标的相关性。方法:①收集广东省人民医院血液科收治、资料齐全的慢性粒单核细胞白血病患者15例与对照组志愿者10例,比较两组间骨髓形成CFU-F的功能与分化潜能;②分析慢性粒单核细胞白血病患者骨髓CFU-F数量与初诊时外周血细胞计数、临床表现型、骨髓原始细胞及患者基因突变的相关性。实验方案得到广东省人民医院(广东省医学科学院)伦理委员会批准,批件号:[2018]002号。结果与结论:①15例慢性粒单核细胞白血病患者CFU-F数量低于对照组(P=0.04),其中67%(10/15)的慢性粒单核细胞白血病患者骨髓CFU-F数量显著降低(P=0.00),33%(5/15)患者CFU-F水平接近对照组(P=0.14);②全组慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞成骨转录因子Osterix及RUNX2的表达量显著降低(P <0.05),成骨分化潜能显著下降(P=0.00);③慢性粒单核细胞白血病患者CFU-F数量与初诊时外周血白细胞、中性粒细胞以及单核细胞计数呈负相关,与外周血小板计数呈正相关;④在CFU-F数量显著降低的10例患者中,90%(9/10)外周血白细胞计数均升高(≥13×10~9L^(-1),P=0.01),50%(5/10)患者携带有NRAS/KRAS基因位点突变。⑤结果表明:慢性粒单核细胞白血病患者骨髓间充质干细胞功能受损,形成的CFU-F数量降低,CFU-F数量与外周血细胞计数以及患者临床特征具有相关性,提示了CFU-F指标具有潜在的临床价值。

年轻骨髓增殖性肿瘤患者的生存预期显著高于老年患者

1 文献来源 Szuber N,Vallapureddy RR,Penna D,et al.Myeloproliferative neoplasms in the young:Mayo Clinic experience with 361 patients age 40 years or younger[J]. Am J Hematol,2018,93(12):1474- 1484.

γ干扰素联合脂多糖诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化

背景:间充质干细胞的免疫调节特性已被临床广泛应用于自身免疫性疾病和移植物抗宿主病,但是其免疫调节的可塑性导致间充质干细胞临床治疗效果出现异质性和不稳定性。目的:探索γ干扰素联合脂多糖模拟炎症微环境诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的作用。方法:体外分离培养人脐带间充质干细胞,进行形态学、表面标志物、成脂及成骨诱导分化能力鉴定。分别用γ干扰素(10μg/L)、脂多糖(100μg/L)及二者联合刺激人脐带间充质干细胞24h,与植物凝集素刺激的外周血单个核细胞直接共培养或Transwell间接共培养5 d。流式细胞术检测共培养不同时间点调节性T细胞和Th1细胞比例,荧光定量PCR检测人脐带间充质干细胞的Toll样受体2,3,4 mRNA表达水平。结果与结论:①人脐带间充质干细胞呈梭形或成纤维形,高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD34、CD45、HLA-DR;②在直接与间接共培养条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞均可增加调节性T细胞的比例,优于γ干扰素或脂多糖单独刺激组、未刺激组及外周血单个核细胞对照组(P <0.05);③Th1细胞比例随共培养时间的延长呈逐渐下降的趋势;④在间接共培养的条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞更早向免疫抑制型MSC2极化,Toll样受体3表达显著增高(P <0.05);⑤以上结果表明间接共培养体系下γ干扰素(10μg/L)联合脂多糖(100μg/L)是诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的高效组合,并且MSC2的免疫抑制作用不依赖于细胞间的直接接触,为MSC2来源外泌体将来应用于临床研究奠定实验基础。

CLAT联合微移植治疗难治性急性髓系白血病疗效观察

目的探讨克拉屈滨联合阿糖胞苷和拓扑替康(CLAT)方案联合供者粒细胞集落刺激因子动员的外周血单个核细胞(微移植,G-PBSC)治疗难治性急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的有效性及安全性。方法广东省人民医院血液科2015年4月至2018年11月接受CLAT方案联合供者G-PBSC治疗难治性AML患者。CLAT方案:克拉屈滨5 mg/m^2/d,静脉滴注,d1~d5;阿糖胞苷1 mg/m^2/d,静脉滴注,d1~d5;拓扑替康1.25 mg/m^2/d,口服,d1~d5;粒细胞集落刺激因子300μg/d,d6至中性粒细胞计数>1.0×10^9/L。目标剂量为单个核细胞2.0×10^8/kg或CD3+细胞1.0×10^8/kg。结果9例患者中位年龄34岁(范围:20~44岁);男性7例,女性2例,5例为原发难治性AML患者,4例为继发难治性AML患者。第一疗程疗4例(44.4%)患者获得完全缓解,3例(33.3%)患者获得部分缓解,总反应率为77.8%,累计完全缓解率为55.6%。9例患者均于微移植治疗后出现Ⅳ度骨髓抑制,中性粒细胞计数<0.5×10^9/L持续中位时间为14(7~21)天,血小板计数<20×10^9/L持续中位时间为8(0~19)天。结论CLAT方案联合供者粒细胞集落刺激因子动员后的外周血造血干细胞治疗难治性AML反应率高,不良反应可控。

异基因造血干细胞移植后胰腺相关指标异常患者的临床特点和影响因素分析

目的研究分析异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后胰腺相关指标异常患者的临床特征和影响因素。方法选取2019年3月至2020年6月于广东省人民医院行allo-HSCT的血液肿瘤患者共54例,按照血清淀粉酶指标是否有异常升高分为异常组和正常组,回顾性分析两组性别、年龄、病因、移植前疾病状态、干细胞来源、供受者关系、HLA配型、胆结石病史、高甘油三酯血症病史、高胆固醇血症病史、预处理方案、移植物抗宿主病预防方案、环孢素A浓度水平各项指标和胰腺相关指标异常升高的关系。结果54例患者中有11例(20.4%)出现了血淀粉酶的升高,其中10例伴有血脂肪酶的升高,有3例(5.6%)确诊为急性胰腺炎。多因素分析结果显示,有高胆固醇血症病史、应用改良全身照射/环磷酰胺预处理方案为导致胰腺相关指标异常升高的独立危险因素(P<0.05)。结论allo-HSCT患者要重视高胆固醇血症病史的存在和预处理方案的使用,早期采取合理的干预措施,有助于防止急性胰腺炎的发生。